李 莉

鄭州市中心醫(yī)院，河南鄭州 450000

血漿D-二聚體(D-dimer)是纖維蛋白降解產(chǎn)物,是一個特異性的纖溶過程標(biāo)記物，其水平的增加可反映繼發(fā)性纖溶活性的增強(qiáng)，D-二聚體水平增高提示機(jī)體內(nèi)存在血栓形成和繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)。 近年來，D-二聚體逐漸拓展到許多領(lǐng)域，盡管其診斷特異性不高，但該實(shí)驗(yàn)具有高度的敏感性和極佳的陰性預(yù)測能力，特別是應(yīng)用于深靜脈血栓(DVT)肺靜脈栓塞（PE）以及彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)的診斷，D-二聚體的定量測定也常用作臨床監(jiān)測溶栓效果的指標(biāo)之一，另外，也用于惡性腫瘤、產(chǎn)科并發(fā)癥和糖尿病并發(fā)癥的診斷中。 現(xiàn)將該院兩種檢測D-二聚體的方法進(jìn)行比較，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該院2011年12月-2012年1月病房的住院病人4 650 例，其中男2 543 例，女2 107 例，年齡在20～99 歲之間。

1.2 方法

2011年12月2 300 例病人采用挪威Nycocard 公司生產(chǎn)的D-二聚體單一試劑盒及配套的測讀儀Nycocard Reader 。2012年1月的2 350 例病人采用免疫比濁Sysmex CA1500 全自動血凝儀進(jìn)行檢測，試劑為德國德靈公司提供。

1.3 標(biāo)本采集與處理

采集待檢者靜脈血1.8 mL 于含有109 mmol/L 枸櫞酸鈉0.2 mL的專用真空采血管中，充分混勻后用3000 r/min 離心10 min，分離血漿進(jìn)行檢測。

1.4 試驗(yàn)原理

膠體金法試驗(yàn)原理，加入樣品中的D-二聚體分子被包有特異性單克隆抗體的濾過膜吸附，隨后加入D-二聚體單克隆抗體與膠體金的偶聯(lián)物溶液，膜上的D-二聚體抗體與偶聯(lián)物發(fā)生結(jié)合反應(yīng)，并發(fā)生顏色變化，通過光度計(jì)檢測讀數(shù)，顏色的深淺與D-二聚體含量成正比。 免疫比濁法的原理，樣品中的D-二聚體分子與包被有高特異性D-二聚體單克隆抗體的乳膠顆粒結(jié)合后，乳膠顆粒發(fā)生凝集，在405nm檢測透光強(qiáng)度變化，凝集程度與樣本中的D-二聚體含量成正比。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

用SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t 檢驗(yàn)和P 值比較。

2 結(jié)果

4650 例樣本中，Nycocard 試劑盒的陽性率為27.69%，Sysmex CA1500 全自動血凝儀法陽性率為32.34%，免疫比濁法的陽性率高于膠體金法，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

表1 4650 例樣本兩種方法檢測D-二聚體結(jié)果分析

3 討論

D-二聚體檢測最先用于臨床排除肺栓塞風(fēng)險(xiǎn)的評估中，且被證實(shí)有臨床價(jià)值。 臨床和實(shí)驗(yàn)室也嘗試通過動態(tài)觀察D-二聚體水平來進(jìn)行外科手術(shù)后血栓風(fēng)險(xiǎn)評估。近年來，D-二聚體檢測在心血管疾病、 惡性腫瘤以及精神疾病的領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。 D-二聚體的檢測在上述疾病的診斷、 疾病的發(fā)生發(fā)展，臨床用藥監(jiān)測，疾病預(yù)后的觀察均具有十分重要的意義。

D-二聚體的測定方法很多，有定性和半定量的膠乳凝集實(shí)驗(yàn)(LATEX)及定量的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，膠體金免疫滲透試驗(yàn)和免疫比濁法。 乳膠凝集法是一種半定量試劑盒，敏感性較低，且肉眼觀察，有主觀差異，只能作為篩查，該方法臨床現(xiàn)在已很少使用。ELISA 法檢測D-二聚體不受膽紅素、血紅蛋白、纖維蛋白原和FDP 干擾，因此更精確，敏感性更高[1]。 但由于其操作費(fèi)時(shí)（約需3 h），每次均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線，因此不適合單個標(biāo)本檢測，比較適合批量的檢測。 金標(biāo)斑點(diǎn)滲濾法操作簡便，不需要自動化的儀器，又能定量，單個或成批標(biāo)本可隨時(shí)檢測[2]。 操作人員不需要進(jìn)行專門培訓(xùn)，可以進(jìn)行床旁檢測，因此很多實(shí)驗(yàn)室也采用這種方法進(jìn)行檢測。全自動血凝儀免疫比濁法具有重復(fù)性好，可定量，操作簡單，人為因素少等優(yōu)點(diǎn)。 但這個方法需要有大型自動化儀器，價(jià)格昂貴，且操作者需要進(jìn)行專門培訓(xùn)，因此在一些不具備條件的基層醫(yī)院開展有一定的難度。

現(xiàn)在國內(nèi)實(shí)驗(yàn)室檢測D-二聚體使用最廣泛的是膠體金免疫滲濾法和免疫比濁法，曾有人報(bào)道這兩種方法檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，兩種方法相關(guān)性良好[3－4]，但在實(shí)驗(yàn)室的日常工作中發(fā)現(xiàn)，2011年12月雙抗體夾心挪威Nycocard Reader 多功能全定量檢測儀法測定的2 300 例病人，陽性637 例，陽性率僅為27.69%，而2012年1月改用免疫比濁法測定了2 350 例病人陽性者760 例，陽性率達(dá)到32.34%,免疫比濁法的陽性率明顯高于膠體金斑點(diǎn)滲濾法，經(jīng)過配對χ2檢驗(yàn)，其陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。 我們所得到的結(jié)果在一定程度與夏汛生[5]，周靜[6]的研究相一致。

由于D-二聚體片段的異源性，單克隆抗體的多樣性，目前D-二聚體檢測沒有國際標(biāo)準(zhǔn)品和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品，從而造成不同檢測方法之間數(shù)據(jù)差距很大，不同檢測方法陽性率、敏感性和特異性均不同，所以不同檢驗(yàn)結(jié)果的可比性很差，即使用同一份血漿標(biāo)本用不同的方法進(jìn)行測定，結(jié)果差異也非常明顯，我們的研究結(jié)果也證實(shí)了這兩種方法的差異。 目前暫時(shí)可行的解決辦法是同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)只采取一種D-二聚體的測定方法，根據(jù)不同檢測體系制定各自的相關(guān)疾病的臨界值，并向臨床進(jìn)行說明[7]。 因此建議各家醫(yī)院根據(jù)自己的條件，選擇一種適合自己實(shí)驗(yàn)室的方法，加強(qiáng)與臨床進(jìn)行溝通，避免疾病漏診或誤診，為臨床提供可靠的依據(jù)。

[1] 彭黎明,鄧承祺.現(xiàn)代血栓與止血的實(shí)驗(yàn)室檢測及應(yīng)用[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2004:637.

[2] 張莉.檢測血漿D-二聚體的新金標(biāo)斑點(diǎn)滲濾法試劑盒的臨床適用性[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2010,25（1）：30-32.

[3] 周玉環(huán),彭和平,何文,等.D-二聚體檢測診斷肺栓塞的方法學(xué)研究與臨床意義[J].中國實(shí)用醫(yī)藥，2010,20（5）：72-73.

[4] 崔煥波,侯曉杰,榮愛紅.2 種D-二聚體檢測方法比較[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2007,11（4）：500-501.

[5] 夏汛生,唐寧,張碧玉,等.D-二聚體兩種定量方法的評價(jià)[J].血栓與止血學(xué)，2007,13（2）.

[6] 周靜,孫家瑜,孫加冠,等.5 種D-二聚體檢測方法用于排除可疑靜脈血栓栓塞癥的臨床評價(jià)[J].四川大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2009,40（6）：1078-1081.

[7] 門劍龍,任靜.D-二聚體臨床應(yīng)用及標(biāo)準(zhǔn)化分析進(jìn)展[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2010,33（8）：793-796.