何方洋

(北京勤邦生物技術(shù)有限公司，北京 102206)

獸藥殘留檢測技術(shù)研究

何方洋

(北京勤邦生物技術(shù)有限公司，北京 102206)

從國內(nèi)外食品安全獸藥殘留現(xiàn)狀、制約食品安全的因素、獸藥毒理性分析以及建立具有中國特色的食品安全快速檢測體系4個方面論述了獸藥殘留對食品安全的危害以及應(yīng)對措施，并對食品安全快速檢測技術(shù)在未來的發(fā)展趨勢進行了展望．

獸藥殘留;食品安全;快速檢測技術(shù)

中國是畜產(chǎn)品的生產(chǎn)和消費大國，2010年我國肉類總產(chǎn)量達(dá)7925萬噸，比上年增長了3.6%［1］，畜牧業(yè)的發(fā)展促進了肉類工業(yè)的快速發(fā)展．獸藥作為發(fā)展現(xiàn)代牧業(yè)的物質(zhì)基礎(chǔ)，對于預(yù)防動物疾病、促進動物生長、改善動物產(chǎn)品品質(zhì)和提高飼料利用率等方面起到重要的作用，但濫用獸藥往往會造成動物組織中的藥物殘留，對公眾健康造成潛在危害，也成為制約養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)健康發(fā)展的重要因素．所以提高獸藥殘留對食品安全危害問題的認(rèn)識，并提出相應(yīng)的應(yīng)對措施是當(dāng)前勢在必行的任務(wù)．

1 國內(nèi)外食品中獸藥殘留現(xiàn)狀

西方發(fā)達(dá)國家對于食品安全問題非常重視，從20世紀(jì)80年代起即開始討論食品中的獸藥殘留問題，并開始對生產(chǎn)食品的動物限制使用獸藥的品種．如歐盟在1997年開始討論動物長期使用抗菌藥會導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性滋生的問題，1999年開始禁止使用喹乙醇和卡巴氧．我國從20世紀(jì)90年代初開始制定藥物在動物食品中的最高殘留限量標(biāo)準(zhǔn)和檢測方法，到20世紀(jì)90年代末已制定了許多符合國際標(biāo)準(zhǔn)的藥物殘留指標(biāo)．

由于我國的畜禽養(yǎng)殖和屠宰是以個體分散為主，生產(chǎn)加工設(shè)備簡陋、生產(chǎn)環(huán)境差，缺少檢驗設(shè)備和人員，更沒有建立生產(chǎn)管理制度，致使一部分人置法律、道德和人民群眾的生命健康于不顧，制造出不少成本廉價、品質(zhì)低劣的有毒有害食品，而且手段不斷翻新，使檢測和監(jiān)控難以落實到位，實際技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)和安全指標(biāo)與國際標(biāo)準(zhǔn)還有較大的差距．對于消費者，由于經(jīng)濟收入和購買力有限，相當(dāng)一些人消費層次低，他們在選擇食品方面主要考慮價格便宜，而忽視了食品安全．消費者食品安全意識的提高可以牽引食品生產(chǎn)者、經(jīng)營者朝著健康、穩(wěn)定方向發(fā)展，并且消費者對食品的監(jiān)督是食品安全監(jiān)督體系中的重要組成部分和有生力量．故要想使動物源性食品中獸藥殘留問題從根本上進行改善，需要國家政府、食品生產(chǎn)企業(yè)和消費者三方共同努力得以實現(xiàn)．

2 獸藥殘留的毒理性分析

食品中獸藥殘留問題早在20世紀(jì)70年代就引起國際關(guān)注，并于80年代在WHO和FAO成立的CAC下設(shè)立了CCRVDF，負(fù)責(zé)制定食品中獸藥允許殘留限量標(biāo)準(zhǔn)［2］．食品中獸藥殘留所產(chǎn)生的危害是多方面的，可以包括以下幾個方面．

2.1 中毒反應(yīng)

一些抗菌抗生素類藥物如青霉素類、磺胺類、四環(huán)素類及某些氨基糖苷類抗生素，由于具有抗原性，可刺激機體內(nèi)抗體的形成，一些過敏性個體在接觸這些藥物的殘留后，容易引發(fā)過敏反應(yīng)或變態(tài)反應(yīng)，表現(xiàn)為瘙癢、紅疹、頭痛等癥狀．磺胺類藥物還可能引起造血系統(tǒng)紊亂，出現(xiàn)急性溶血性貧血，粒細(xì)胞缺乏癥，再生障礙性貧血，血小板減少和嗜酸性白細(xì)胞增多癥等;還可能引起腎損害，特別是乙?；前吩谒嵝阅蛑腥芙舛冉档停龀鼋Y(jié)晶后損害腎臟．近幾年發(fā)生的“瘦肉精”中毒事件，是由一種β-受體激動劑——克倫特羅藥物引起的，可引起交感神經(jīng)興奮．如果在動物肌肉和內(nèi)臟含有較高濃度的克倫特羅，人體在食入時，則很快會引起心悸、頭痛、頭暈眼花、肌肉震顫和四肢發(fā)麻無力等急性毒性作用［3］．

2.2 誘導(dǎo)產(chǎn)生耐藥菌株

動物經(jīng)常反復(fù)接觸某一種抗菌藥物后，其體內(nèi)敏感菌株將受到選擇性的抑制，從而使耐藥菌株大量繁殖．而抗生素飼料添加劑長期、低濃度使用是耐藥菌株增加的主要原因．人體經(jīng)常使用含抗生素藥物殘留的動物性食品，一方面可能引起人畜共患病耐藥性的病原菌大量增加，另一方面帶有藥物抗性的耐藥因子可傳遞給人類病原菌，由此導(dǎo)致人體產(chǎn)生耐藥致病菌，如沙門氏菌和大腸桿菌，會出現(xiàn)抗生素?zé)o法控制人類細(xì)菌感染性疾病情況［2］．據(jù)美國新聞周刊報道，僅1992年全美就有13300名患者死于抗生素耐藥性細(xì)菌感染［4］．

2.3 “三致”作用

苯并咪唑類藥物是獸藥臨床上常用的廣譜抗蠕蟲病的藥物，可持久地殘留于肝臟內(nèi)，并對動物具有潛在的致畸性和致突變性．另外，殘留于食品中的丁苯咪唑、苯咪唑、丙硫咪唑和苯硫氨酯具有致畸作用，克球粉和雌激素、硝基呋喃類等違禁藥物則具有致癌作用．近來發(fā)現(xiàn)一些抗生素類藥物如四環(huán)素類、氨基糖苷類和β-內(nèi)酰胺類等抗生素均被懷疑具有“三致”作用［5］．

2.4 引起激素樣作用

人經(jīng)常食用含有激素殘留的食品，會干擾人體內(nèi)的激素平衡，產(chǎn)生一系列激素樣作用．當(dāng)人體攝入了激素殘留的食品后它就蓄積在脂肪組織中，然后通過胎盤傳遞給胎兒，人的生殖系統(tǒng)障礙、發(fā)育異常及某些癌癥如乳腺癌、睪丸癌等均與激素樣作用有關(guān)［2］．

3 獸藥殘留快速檢測技術(shù)

面對層出不窮的食品安全問題和我國為數(shù)眾多的食品經(jīng)營企業(yè)小而亂，溯源管理難等問題．對于中小型食品企業(yè)單靠實驗室檢測方法和儀器難以即時、快速、全面地從源頭進行監(jiān)控，因此，快速檢測技術(shù)和儀器及試劑的研發(fā)有著特殊的意義．在檢測方法體系的構(gòu)建上，從我國實際情況出發(fā)，也形成了“快速篩查方法”與“確證檢測方法”相結(jié)合的體系．目前針對動物性食品中獸藥殘留的快速檢測技術(shù)主要有酶聯(lián)免疫檢測技術(shù)、膠體金免疫層析技術(shù)、微生物抑制法檢測技術(shù)、化學(xué)發(fā)光酶免疫檢測技術(shù)等．上述快速檢測技術(shù)可以滿足對大量樣品檢測、縮短檢測周期、降低檢測費用的需求，也是未來快速檢測技術(shù)的發(fā)展趨勢．

3.1 微生物抑制法快速檢測試劑盒

抗生素在奶牛飼養(yǎng)過程中是醫(yī)治乳房炎等疾病的高效獸藥，牛奶中抗生素殘留問題日益受到消費者的重視，已成為乳業(yè)管理和技術(shù)的難題之一．抑制法測定抗生素殘留方法開發(fā)于20世紀(jì)70年代，可測定β-內(nèi)酰胺類抗生素．目前的微生物抑制法快速檢測試劑盒多采用微孔形式，可同時測定96個樣品．樣品在64℃下培養(yǎng)25 h后，可見結(jié)果，陰性的樣品由于微生物產(chǎn)酸，培養(yǎng)基從紫色變黃色，陽性則不變色．該方法操作簡單，檢測成本低，無需配套儀器設(shè)備．最近開發(fā)的微生物抑制法快速檢測試劑盒能檢測更廣的抗生素藥物，特別是磺胺類，并且對泰樂菌素、紅霉素、新霉素、慶大霉素、甲氧芐氨嘧啶等抗生素類藥物亦有較好的敏感度［6－7］．

3.2 膠體金免疫層析試紙條

目前，我國畜牧業(yè)中使用的抗生素等各類獸藥種類繁多，這不僅增加了動物源性食品中藥物殘留的幾率，對消費者具有潛在的危害，而且加大了執(zhí)法機關(guān)檢測的難度．而現(xiàn)有的膠體金試紙條大多只能檢測同一樣本中的一種藥物，如果開發(fā)出可采用在同一膜上作多類藥物測定的方式，將對檢測某些具有聯(lián)檢意義的物質(zhì)具有很大的應(yīng)用價值．

目前已開發(fā)出針對動物源性食品中多種抗生素殘留的同步檢測產(chǎn)品(如圖1)，如β-內(nèi)酰胺類和四環(huán)素類抗生素快速檢測試紙條、β-內(nèi)酰胺類和三聚氰胺快速檢測試紙條、磺胺類和氟喹諾酮類藥物快速檢測試紙條等，大大節(jié)省了檢測的時間和成本．未來要將這種技術(shù)進一步改進，實現(xiàn)針對更多的樣本基質(zhì)和檢測藥物的目的，達(dá)到“一卡多用”的效果．

3.3 化學(xué)發(fā)光酶免疫檢測試劑盒

從標(biāo)記免疫測定來看，化學(xué)發(fā)光酶免疫測定應(yīng)屬于酶免疫測定．酶反應(yīng)所用底物為發(fā)光劑，通過化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光在特定的儀器上進行測定，經(jīng)過酶和發(fā)光兩級放大，具有很高的靈敏度．由于其具有超過放射免疫的高靈敏度，又具有酶免疫操作簡便、快速的特點，并且檢測過程中不使用有害試劑，試劑保存期長，該方法已成為放射免疫分析與普通酶免疫分析的取代者，是免疫學(xué)檢測重要發(fā)展方向［8］．目前已經(jīng)開發(fā)出間接競爭化學(xué)發(fā)光酶免疫檢測試劑盒，能夠檢測動物組織中的克倫特羅、磺胺類藥物、氯霉素等藥物，比常規(guī)酶聯(lián)免疫檢測方法靈敏度提高10倍．化學(xué)發(fā)光酶免疫測定技術(shù)廣泛應(yīng)用于抗原、抗體和半抗原的免疫測定，將多種功能的蛋白基因構(gòu)建在一起成為多功能抗體，可實現(xiàn)真正意義上的多項標(biāo)志物同時檢測［8－9］，因此食品中多組分有毒有害物質(zhì)的協(xié)同檢測也是化學(xué)發(fā)光酶免疫測定技術(shù)未來的發(fā)展趨勢．

圖1 能夠同時檢測多種藥物的快速檢測試紙條及其結(jié)果說明Fig．1 A rapid diagnosis strip for detecting multiple animal drugs in foods and its results

隨著獸藥產(chǎn)業(yè)技術(shù)的不斷發(fā)展，新獸藥品種還會不斷出現(xiàn)，因此需要國家不斷地制定和修訂在動物源性食品中的獸藥最高殘留限量規(guī)定及相應(yīng)的檢測方法．此外，目前建立的標(biāo)準(zhǔn)方法中以儀器檢測方法為主，缺少快速篩選和確認(rèn)相結(jié)合的檢測方法，嚴(yán)重制約了獸藥殘留監(jiān)管工作的全面開展．因此，建立起適合我國國情并與國際接軌的獸藥殘留監(jiān)控體系是當(dāng)前勢在必行的任務(wù)．針對我國國情的特殊性，目前我國很多基層單位對快速檢測技術(shù)的應(yīng)用還處于定性或半定量水平，開發(fā)便攜、易用的小型化快速檢測產(chǎn)品，應(yīng)是目前和今后快速檢測技術(shù)發(fā)展的趨勢．

［1］2010年我國肉類總產(chǎn)量達(dá) 7925萬噸［EB/OL］．(2011-05-05)［2012-01-02］．http://www．cqn．com．cn/news/wqpd/zfxd/407209．html．

［2］陳一資，胡濱．動物性食品中獸藥殘留的危害及其原因分析［J］．食品與生物技術(shù)學(xué)報，2009，28(2):162-166．

［3］徐士新，汪明．關(guān)注獸藥殘留危害 重視食品安全［J］．農(nóng)村養(yǎng)殖技術(shù):新獸醫(yī)，2006(2):7-9．

［4］王俊菊，劉金財．對我國動物源性食品安全問題的思考［J］．動物科學(xué)與動物醫(yī)學(xué)．2004，21(1):18-19．

［5］賀家亮．動物性食品中獸藥殘留現(xiàn)狀及對策［J］．食品研究與開發(fā)，2006(6):176-178．

［6］葉興乾，劉東紅，陳健初．牛奶抗生素殘留快速檢測技術(shù)進展及應(yīng)用現(xiàn)狀［J］．農(nóng)業(yè)工程學(xué)報，2005，21(4):181-185．

［7］Scannella D，Neaves P，Keedy K，et al．An evaluation of the delvo X-Press β-L test for detecting β-L actams in exfarm raw milks［J］．International Dairy Journal，1997，7:93-96．

［8］Jimenez A M，Nzvas M J．Chemilumines methods(present and future) ［J］．Grasas Aceites．2002，53:64-75．

［9］邱云青，李鳳琴．化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)在食品有害因素檢測中的應(yīng)用［J］．國外醫(yī)學(xué):衛(wèi)生學(xué)分冊，2009，36(6):373．

(責(zé)任編輯:檀彩蓮)

Research on Detection Technology of Veterinary Drugs Residue

HE Fang-yang
(Beijing Kwinbon Biotechnology Co．Ltd．，Beijing 102206，China)

Food safety hazard caused by veterinary drugs residue and coping strategy were discussed from four aspects，which include the present situation of veterinary drugs residue in food at home and abroad，constraint elements of food safety，toxicological analysis of veterinary drugs and how to establish rapid detection techniques in food safety having Chinese characteristics．Finally the development tendency of rapid detection techniques in food safety was presented．

veterinary drugs residue;food safety;fast detection techniques

TS251.7

A

1671-1513(2012)01-0017-03

2012-01-02

何方洋，男，研究員，博士，主要從事食品安全藥物殘留檢測技術(shù)方面的研究．