?；搓?，熊 瑜

山東省胸科醫(yī)院腫瘤綜合科濟(jì)南 250013

△男，1976年9月生，碩士研究生，主治醫(yī)師，研究方向:胸部腫瘤的外科治療，E-mail:zhyxkyy@163.com

術(shù)前熱療聯(lián)合灌注化療對非小細(xì)胞肺癌患者T淋巴細(xì)胞亞群及血清P53抗體水平的影響

?；搓枴?，熊 瑜

山東省胸科醫(yī)院腫瘤綜合科濟(jì)南 250013

△男，1976年9月生，碩士研究生，主治醫(yī)師，研究方向:胸部腫瘤的外科治療，E-mail:zhyxkyy@163.com

灌注化療;熱療;非小細(xì)胞肺癌;免疫功能

目的:評估術(shù)前熱療聯(lián)合灌注化療對非小細(xì)胞肺癌患者免疫功能的影響。方法:選取中晚期非小細(xì)胞肺癌患者68例，31例(A組)術(shù)前給予單純順鉑和絲裂霉素動(dòng)脈灌注化療;余37例(B組)灌注化療前1 h和注藥24 h后，用體外高頻熱療機(jī)熱療1次。2組分別于灌注化療前、術(shù)前1天、術(shù)后第10天采集靜脈血，應(yīng)用間接免疫熒光法測定T淋巴細(xì)胞亞群;分別于灌注化療前，術(shù)前1天，術(shù)后第10、30、60和90天抽取清晨空腹靜脈血，應(yīng)用ELISA法檢測P53抗體水平。結(jié)果:A組術(shù)前CD3、CD4水平較灌注化療前降低，CD8、CD4/CD8輕微升高;術(shù)后CD3、CD4及CD4/CD8水平升高，CD8降低。B組術(shù)前CD3、CD4水平較灌注化療前明顯增高，CD8降低，CD4/CD8升高;術(shù)后上述指標(biāo)變化趨勢未發(fā)生改變(P均＜0.001)。2組術(shù)后血清P53抗體水平均逐漸降低，B組較A組降低明顯(F組間=52.735，F(xiàn)時(shí)間=9.297，F(xiàn)交互=4.219，P＜0.001)。結(jié)論:術(shù)前熱療聯(lián)合灌注化療可以改善晚期非小細(xì)胞肺癌患者的免疫力。

肺癌是一種嚴(yán)重危害人類健康的惡性疾病，其發(fā)病率和死亡率在世界范圍內(nèi)居所有惡性腫瘤之首。介入灌注化療以其特有的優(yōu)越性在臨床上日益受到重視，但介入治療會(huì)損害機(jī)體免疫功能。動(dòng)物及臨床實(shí)驗(yàn)［1］已證明，熱療有促進(jìn)體液和細(xì)胞免疫作用。研究［2-3］表明，非小細(xì)胞肺癌治療中，化療聯(lián)合熱療具有明確的協(xié)同作用。作者觀察了術(shù)前熱療聯(lián)合灌注化療對非小細(xì)胞肺癌患者T淋巴細(xì)胞亞群及血清P53抗體水平的動(dòng)態(tài)變化，探討術(shù)前熱療聯(lián)合灌注化療的臨床價(jià)值。

1 對象與方法

1.1 病例選擇 術(shù)前胸部X線片及CT、纖維支氣管鏡檢查并活檢(包括刷片)病理診斷結(jié)果及術(shù)后病理學(xué)診斷結(jié)果完整，符合標(biāo)準(zhǔn)的原發(fā)性肺癌患者，年齡≤70歲;術(shù)前3周內(nèi)未用過免疫抑制性和免疫激活性藥物;術(shù)前1個(gè)月內(nèi)無明顯感染性疾病，如有由腫瘤所致的阻塞性肺炎存在，須無明顯發(fā)熱(體溫不超過37.5℃);術(shù)中無大出血，術(shù)中術(shù)后未輸血或輸血總量≤400 mL;術(shù)后無感染或其他并發(fā)癥。排除年齡＞70歲或合并其他臟器系統(tǒng)疾病(如糖尿病、肝腎病、久治未愈的皮膚病等)，有與自身免疫有關(guān)的病史(如重癥肌無力等)者。依據(jù)上述標(biāo)準(zhǔn)共選擇68例該院住院且依從性較好的患者。術(shù)后TNM分期采用2009年國際抗癌聯(lián)盟(UICC)修訂標(biāo)準(zhǔn)，均為ⅢA期和ⅢB期，或Ⅱb期且術(shù)中發(fā)現(xiàn)肺門淋巴結(jié)融合固定而不能徹底清掃。又無條件行全肺切除，達(dá)不到根治性手術(shù)要求者。

1.2 研究對象分組 ①術(shù)前灌注化療組(A組):患者共31例，其中男21例，女10例，年齡41～70 (56.7±4.3)歲;TNM分期ⅡB期3例，ⅢA期25例，ⅢB期3例;鱗癌24例，腺癌3例，未分化癌4例;行根治性肺癌切除26例，未達(dá)到根治手術(shù)標(biāo)準(zhǔn)共5例。②術(shù)前熱療聯(lián)合灌注化療組(B組):患者共37例，其中男 24例，女 13例，年齡 39～70 (55.4±3.9)歲;TNM分期ⅡB期8例，ⅢA期21例，ⅢB期8例;鱗癌26例，腺癌8例，未分化癌3例;行根治性肺癌切除31例，未達(dá)到根治手術(shù)標(biāo)準(zhǔn)共6例。

1.3 熱療方法 使用珠海市和佳醫(yī)療設(shè)備有限公司HG-2000體外高頻熱療機(jī)，頻率為13.56 MHz，上下電極直徑均為17 cm，電壓200 V，功率3 000 W;測溫系統(tǒng)由測溫傳感器和計(jì)算機(jī)組成，深度可達(dá)17～25 cm，溫度控制在41～44℃，機(jī)控輸出功率90%～95%。B組行介入灌注化療前1 h治療1次，溫度控制在41～44℃;注藥24 h后再次熱療1次，每次治療時(shí)間60 min。

1.4 灌注化療方法 2組術(shù)前1周均先經(jīng)股動(dòng)脈穿刺插管至支氣管動(dòng)脈、鎖骨下動(dòng)脈或肋間動(dòng)脈造影，根據(jù)造影結(jié)果將導(dǎo)管超選擇性插入腫瘤供血?jiǎng)用}，注入化療藥物順鉑和絲裂霉素。根據(jù)患者一般情況及體表面積決定用藥量，一般順鉑80～100 mg/次，絲裂霉素14～20 mg/次。

1.5 觀測指標(biāo) 2組分別于灌注化療前、術(shù)前1天、術(shù)后第10天采集空腹靜脈血，采用間接免疫熒光法測定T淋巴細(xì)胞亞群。2組分別于灌注化療前，手術(shù)前1天，術(shù)后第10、30、60和90天時(shí)抽取清晨空腹靜脈血，進(jìn)行P53抗體檢測，ELISA檢測試劑盒購自天津宜安泰公司。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 17.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，2組外周血T淋巴細(xì)胞亞群和血清P53抗體水平的比較應(yīng)用重復(fù)測量數(shù)據(jù)的方差分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α= 0.05。

2 結(jié)果

2.1 2組外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平比較 見表1。

表1 2組外周血T淋巴細(xì)胞亞群測定結(jié)果

2.2 2組血清P53抗體水平比較 見表2。

表22 組血清P53抗體水平測定結(jié)果 μg/L

3 討論

現(xiàn)代生物學(xué)研究進(jìn)展為加熱治療腫瘤提供了理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)，加熱治療已成為腫瘤治療的重要輔助方法之一［4］。研究證實(shí)，組織受熱達(dá)40～45℃時(shí)，細(xì)胞穩(wěn)定性降低，對放射線和化學(xué)藥物的敏感性增加［5］，聯(lián)合化療可進(jìn)一步提高化療藥物在腫瘤組織內(nèi)的濃度［6］，二者具有明確的協(xié)同作用［2-3］。已有研究［7］證實(shí)熱療有促進(jìn)體液和細(xì)胞免疫的作用。T淋巴細(xì)胞是最重要的抗腫瘤免疫細(xì)胞［8］，其水平的變化可反映機(jī)體免疫功能的狀況。T細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞的比例及功能變化與腫瘤發(fā)展有明顯的相關(guān)性［1］。p53基因突變與許多人類腫瘤的發(fā)生有關(guān)，其主要的生物學(xué)功能是引起細(xì)胞周期阻滯，誘導(dǎo)凋亡和促進(jìn)分化［8］。外周血P53作為一種腫瘤標(biāo)志物，其生物學(xué)意義與p53基因相似，其表達(dá)與腫瘤的分期、化療療效、腫瘤復(fù)發(fā)及預(yù)后等密切相關(guān)［9-10］。

作者對行常規(guī)肺葉(全肺)切除前或局部晚期肺癌患者術(shù)前1周先行腫瘤區(qū)域性熱療聯(lián)合支氣管動(dòng)脈灌注化療，結(jié)果顯示，術(shù)前熱療聯(lián)合灌注化療組CD3、CD4水平較灌注化療前明顯增高，CD8降低，CD4/CD8升高;術(shù)后第10天上述指標(biāo)變化趨勢未發(fā)生改變。術(shù)前單純灌注化療組術(shù)前CD3、CD4水平較灌注化療前降低，CD8、CD4/CD8輕微升高;術(shù)后第10天CD3、CD4及CD4/CD8水平升高，CD8降低。研究中2組血清P53抗體水平灌注化療前差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，術(shù)后第30、60和90天逐漸降低，且B組較A組降低更明顯。上述研究結(jié)果說明術(shù)前熱療聯(lián)合灌注化療可以改善患者機(jī)體的免疫抑制狀況，免疫功能有所恢復(fù)，在一定程度上較單純灌注化療對于腫瘤的殺傷效應(yīng)也更明顯，有效降低了瘤體負(fù)荷，從而減少了術(shù)中轉(zhuǎn)移和術(shù)后復(fù)發(fā)的可能。

綜上所述，術(shù)前熱療聯(lián)合灌注化療可以有效改善中晚期非小細(xì)胞肺癌患者的免疫力。但該研究中的患者均為中晚期，血清P53抗體水平的持續(xù)下降是不是預(yù)示對腫瘤的持續(xù)作用，術(shù)前熱療聯(lián)合灌注化療是否可以提高手術(shù)根治率，還需要進(jìn)一步的隨訪資料證實(shí)。

［1］李彩霞，曹弛.經(jīng)肝動(dòng)脈栓塞化療對細(xì)胞免疫狀態(tài)的影響［J］.中國腫瘤臨床，2003，30(9):683

［2］Ohguri T，Imada H，Yahara K，et al.Radiotherapy with 8-MHz radiofrequency-capacitive regional hyperthermia for stageⅢ non-small-cell lung cancer:the radiofrequencyoutput power correlates with the intraesophageal temperature and clinical outcomes［J］.Int J Radiat Oncol Biol Phys，2009，73(1):128

［3］Ohguri T，Imada H，Narisada H，et al.Systemic chemotherapy using paclitaxel and carboplatin plus regional hyperthermia and hyperbaric oxygen treatment for non-small cell lung cancer with multiple pulmonary metastases:preliminary results［J］.Int J Hyperthermia，2009，25(2):160

［4］王穎.淺談臨床腫瘤熱療中若干問題［J］.中華放射腫瘤學(xué)雜志，2004，13(1):25

［5］蔣衛(wèi)紅.高頻熱療治療前列腺疾病的護(hù)理體會(huì)［J］.中國健康月刊A，2011，30(3):211

［6］Ren D，Kim H，Tu HC，et al.The VDAC2-BAK rheostat controls thymocyte survival［J］.Sci Signal，2009，2(85): ra48

［7］Blazichova S，Rorersky J，Koska J，et al.Effect of hyperthermia water bath on parameters of cellular immunity［J］.Int J Clin Pharmocol Res，2000，20(1):41

［8］Agarwal ML，Taylor WR，Chernov MV，et al.The p53 network［J］.J Biol Chem，1998，273(1):1

［9］韓毅，許紹發(fā).血清p53抗體與肺癌的研究進(jìn)展［J］.中國肺癌雜志，2003，6(5):406

［10］Shih CM，Chen K，Wang YC，et al.Elevated p53 and p21waf1 mRNA expression in blood lymphocytes from lung cancer patients with chemoresistance［J］.Cancer Detect Prev，2007，31(5):366

Effects of preoperative infusion chemotherapy combined with hyperthermia on T lymphocyte subsets and serum P53 antibody level of non-small cell lung cancer patients

ZHU Huaiyang，XIONG YuDepartment of Comprehensive Oncology，Shandong Chest Hospital，Jinan 250013

infusion chemotherapy;hyperthermia;non-small cell lung cancer;immunity

Aim:To study the effect of preoperative infusion chemotherapy combined with hyperthermia on the immunity of non-small cell lung cancer(NSCLC)patients.Methods:A total of 68 patients with intermediate and advanced NSCLC were divided into two groups.Group A(n=31)was treated with interventional arterial infusion chemotherapy alone.Group B(n= 37)was treated with transcatheter arterial infusion chemotherapy combined with hyperthermia.The levels of the subsets of the peripheral blood T lymphocytes(CD3，CD4，CD8)and the P53 antibody were detected by indirect immunofluorescence technique and ELISA，respectively.Results:The CD3 and CD4 levels before operation were significantly lower than those before infusion chemotherapy in group A，CD8 and CD4/CD8 were higher;but CD3，CD4 level and CD4/CD8 increased，and CD8 level decreased after operation.As to group B，CD3，CD4 and CD4/CD8 levels before operation were significantly higher than those before infusion chemotherapy，CD8 were lower;and the trend didn’t change after operation when compared with those before operation(P＜0.001).The level of serum P53 antibodies decreased gradually postoperation in the two groups，especially in group B(Fgroup=52.735，F(xiàn)time=9.297，F(xiàn)interaction=4.219，P＜0.001).Conclusion:The combination of preoperation infusion chemotherapy and hyperthermia could enhance the intermediate and advanced NSCLC patients’immunity.

R734.1

10.3969/j.issn.1671-6825.2012.06.030

(2012-01-05收稿 責(zé)任編輯王 曼)