許保海，臧琛，張宏偉，潘旭，魏娜，聶其霞#（.北京積水潭醫(yī)院，北京00035；.中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所，北京 00700）

煎劑是中藥應(yīng)用最廣泛、最能體現(xiàn)中醫(yī)辨證論治的劑型，傳統(tǒng)制備方法多為患者自己煎煮，但因程序復(fù)雜、費(fèi)時(shí)費(fèi)力、攜帶不便等缺點(diǎn)，臨床應(yīng)用受到限制。使用煎藥機(jī)煎藥，其封閉式煎煮有效地減少了揮發(fā)性成分的損失[1]；容量大，可節(jié)時(shí)、節(jié)能，特別適合藥量多的處方；采取真空包裝，方便患者攜帶與貯藏。煎藥機(jī)的出現(xiàn)，由此而產(chǎn)生了煎劑的“傳統(tǒng)單劑煎煮法”和“煎藥機(jī)多劑煎煮法”2種不同制備方法。此外，中藥配方顆粒經(jīng)過多年的發(fā)展，在全國部分地區(qū)和醫(yī)院逐漸應(yīng)用起來。

煎劑質(zhì)量的好壞直接影響到臨床療效，而煎劑發(fā)揮療效的物質(zhì)基礎(chǔ)主要是煎劑中煎出有效成分的多少[2]。上述3種方法制備出來的中藥制劑在有效成分的含量、藥理、藥效方面是否相同，孰優(yōu)孰劣還缺乏系統(tǒng)研究。

胃腸復(fù)原湯由黃芪、太子參、枳殼等9味中藥組成，具有補(bǔ)益腸胃、行氣導(dǎo)滯的功效，臨床常用于腸胃功能紊亂的治療和腹腔手術(shù)后的排氣。在我院應(yīng)用多年，因療效顯著，深受患者歡迎。本試驗(yàn)即以有效處方胃腸復(fù)原湯作為研究對(duì)象，以其君藥黃芪中黃芪甲苷的含量為指標(biāo)，考察上述3種制備方法制備出來的樣品中有效成分含量的變化。

1 儀器與試藥

CK-38陶瓷煎藥壺（佛山市捷達(dá)家用電器廠）；TKD 2000 W-3 D自動(dòng)煎藥包裝機(jī)（天津市康德新技術(shù)發(fā)展有限公司）；1200 series高效液相色譜（HPLC）儀（美國安捷倫公司）；Alltech 2000 ES蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（美國奧泰公司）；KQ-250超聲清洗器（功率：250 W，工作頻率：40 kHz，昆山市超聲儀器有限公司）。

黃芪甲苷對(duì)照品（中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)：110781-200512）；乙腈為色譜純，水為重蒸水，其余試劑均為分析純。制備胃腸復(fù)原湯2種煎劑所使用的飲片均來源于安國市一方中藥材有限公司：黃芪（批號(hào)：11040077）、太子參（批號(hào)：11040078）、枳殼（批號(hào)：11040083）、大黃（批號(hào)：11040079）、桃仁（批號(hào)：11040080）、赤芍（批號(hào)：11040081）、木香（批號(hào)：1104082）、萊菔子（批號(hào)：11040084）、蒲公英（批號(hào)：11040085）；配方顆粒由廣東一方制藥有限公司提供：黃芪配方顆粒（批號(hào)：J1103010）、太子參配方顆粒（批號(hào)：J1103011）、枳殼配方顆粒（批號(hào)：J1103018）、大黃配方顆粒（批號(hào)：J1103013）、桃仁配方顆粒（批號(hào)：J1103014）、赤芍配方顆粒（批號(hào)：J1103015）、木香配方顆粒（批號(hào)：J1103016）、萊菔子配方顆粒（批號(hào)：1103112）、蒲公英配方顆粒（批號(hào)：1102017）。

2 方法與結(jié)果

2.1 供試品的制備

2.1.1 傳統(tǒng)單劑煎煮法（批號(hào)：110704、110718、110719） 取胃腸復(fù)原湯1劑所需各飲片，冷水浸泡30 min，常規(guī)煎煮，水沸后20min濾出藥液；殘?jiān)訜崴逯?，水沸?5min濾出藥液；合并藥液量共計(jì)400 mL，減壓干燥成干膏。本文中將此方法所制煎劑簡稱“傳統(tǒng)煎劑”。

2.1.2 煎藥機(jī)多劑煎煮法（批號(hào)：110704、110711、110718）取胃腸復(fù)原湯10劑所需各飲片，冷水浸泡30 min，放入煎藥機(jī)內(nèi)自動(dòng)煎煮，待煎藥機(jī)提示完成，濾出藥液；得藥液量4000 mL，減壓干燥成干膏。本文中將此方法所制煎劑簡稱“機(jī)制煎劑”。

2.1.3 配方顆粒溶解法（批號(hào)：1101003、1103065、1104145）取各單味藥配方顆粒，直接按比例混合溶解，即得。本文中將此方法所制樣品簡稱“配方顆?！?。

2.2 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：Kromasil C18（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈-水（31∶69）；流速：1.0mL·min－1；柱溫：30℃；檢測(cè)器：Alltech 2000 ES蒸發(fā)光散射檢測(cè)器；漂移管溫度：105℃；氣體流速：2.0 mL·min－1。理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計(jì)算應(yīng)不低于4000；在此條件下，黃芪甲苷達(dá)到基線分離，分離度為1.5。

2.3 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取黃芪甲苷對(duì)照品適量，加甲醇制成濃度為120.8 μg·mL－1的溶液，即得。

2.4 供試品溶液的制備

取供試品約0.5 g，精密稱定，精密加甲醇40 mL，密塞，稱重，超聲處理30 min，放至室溫，再稱重，補(bǔ)加甲醇至原重，搖勻，濾過。準(zhǔn)確吸取續(xù)濾液20 mL，蒸干，殘?jiān)铀?0 mL使溶解，以水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次30 mL。合并正丁醇液，以氨試液洗滌2次，每次20 mL，棄去氨試液，正丁醇液濃縮至干，殘?jiān)舆m量甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至10 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，0.22 μm微孔濾膜濾過，即得。

2.5 專屬性試驗(yàn)

分別取對(duì)照品溶液、供試品溶液與空白對(duì)照溶液（溶劑）各10 μL，注入HPLC儀，按上述色譜條件測(cè)定。結(jié)果，在上述色譜條件下，雜質(zhì)對(duì)黃芪甲苷的測(cè)定無干擾。色譜見圖1。

2.6 線性關(guān)系考察

圖1 高效液相色譜圖Fig 1 HPLC chromatograms

分別吸取對(duì)照品溶液4、6、8、10、12 μL，注入HPLC儀，按上述色譜條件測(cè)定，記錄峰面積。以峰面積積分值（Y）的自然對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，黃芪甲苷進(jìn)樣量（X）的自然對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為lnY＝1.5939×lnX+6.7595（r＝0.9993，n＝5）。結(jié)果表明，黃芪甲苷進(jìn)樣量在0.4832～1.4496 μg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好線性關(guān)系。

2.7 精密度試驗(yàn)

精密吸取對(duì)照品溶液10 μL，注入HPLC儀，按上述色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積。結(jié)果，RSD＝1.46%（n＝6），表明儀器精密度良好。

2.8 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批樣品適量，共6份，精密稱定，分別按“2.4”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，照上述色譜條件進(jìn)樣20μL，測(cè)定含量。結(jié)果，RSD＝1.86%（n＝6），表明本方法重復(fù)性良好。

2.9 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、12、24 h進(jìn)樣20 μL，測(cè)定峰面積。結(jié)果，RSD＝0.88%（n＝7），表明供試品溶液中黃芪甲苷在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.10 加樣回收率試驗(yàn)

取同一批樣品6份，每份約0.25 g，精密稱定，分別精密加入黃芪甲苷對(duì)照品0.27mg，按“2.4”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，照上述色譜條件進(jìn)樣20 μL，測(cè)定樣品含量，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）Tab 1 Results of recovery test（n＝6）

2.11 樣品含量測(cè)定

分別取傳統(tǒng)煎劑、機(jī)制煎劑和配方顆粒各3個(gè)批號(hào)樣品，分別按“2.4”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，照上述色譜條件進(jìn)樣20 μL，測(cè)定黃芪甲苷含量，結(jié)果見表2。

由表2可見，黃芪甲苷含量配方顆粒稍高于傳統(tǒng)煎劑，二者均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于機(jī)制煎劑。批間差異配方顆粒與傳統(tǒng)煎劑接近，而機(jī)制煎劑批間差異較大。因此，以黃芪甲苷含量論，配方顆粒和傳統(tǒng)煎劑為好；機(jī)制煎劑含量較低，且批間差異大，質(zhì)量不穩(wěn)定。

表2 傳統(tǒng)煎劑、機(jī)制煎劑和配方顆粒中黃芪甲苷含量測(cè)定結(jié)果（n＝3）Tab 2 Results of content determination of astragalosideⅣin traditional decoction，decoction prepared by machine and magistral granule（n＝3）

3 討論

煎藥機(jī)多劑煎煮法，煎煮、分裝一次完成，不能完全按照傳統(tǒng)的煎藥方法進(jìn)行二次煎煮，對(duì)于先煎、后下等特殊要求也無法滿足；且由于機(jī)器管道內(nèi)和藥材殘?jiān)袝?huì)存留藥液，不可避免地使藥液受到一定損失；另外，受操作人員的技術(shù)影響，導(dǎo)致不同批次含量差異較大。因此，煎藥機(jī)生產(chǎn)廠家應(yīng)完善煎藥機(jī)的功能，使其更加符合傳統(tǒng)煎藥的程序。有研究表明，中藥煎藥機(jī)在115℃、0.7 kg·cm－2壓力下煎煮效果好、煎出率高[3]，但又不符合“煎劑應(yīng)常溫常壓煎煮”的要求。故煎藥機(jī)多劑煎煮法還有待于進(jìn)一步研究改進(jìn)。

雖然配方顆粒中黃芪甲苷含量較高，但配方顆粒沒有了合煎的程序，而中藥的藥效是一個(gè)復(fù)雜的過程，某種化學(xué)成分在合煎時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)或消失，所以不能簡單地以某一種或幾種成分的含量高低作為判斷依據(jù)。關(guān)于傳統(tǒng)煎劑與機(jī)制煎劑、配方顆粒的比較，應(yīng)繼續(xù)進(jìn)行藥效、藥理及臨床方面的研究，以全面評(píng)估其優(yōu)劣。

[1]唐進(jìn)法，李學(xué)林.煎藥器具對(duì)肉桂中桂皮醛煎出量的影響研究[J].中國藥房，2010，21（31）：2900.

[2]楊璐璐，秦興衛(wèi)，田梅蘭，等.3種方法制備中藥煎劑的對(duì)比研究[J].中國藥房，2000，11（1）：47.

[3]宋小勇，應(yīng)裕國，張樹堯，等.中藥煎藥機(jī)的煎煮條件研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2000，11（9）：782.