章 袁，朱立勤，劉 晶，王 浩，孫秀娟

（1.天津醫(yī)科大學(xué)第一中心臨床學(xué)院，天津300192；2.天津市民政局老年病醫(yī)院，天津 300110）

辛伐他汀在老年高血脂患者中的群體藥動(dòng)學(xué)研究

章 袁1＊，朱立勤1#，劉 晶1，王 浩1，孫秀娟2

（1.天津醫(yī)科大學(xué)第一中心臨床學(xué)院，天津300192；2.天津市民政局老年病醫(yī)院，天津 300110）

目的：考察老年高血脂患者口服辛伐他汀的藥動(dòng)學(xué)模型，為臨床制訂個(gè)體化給藥方案提供參考。方法：以30例服用辛伐他汀降血脂的老年高血脂患者為研究對(duì)象，于服藥前與服藥后20、62 d 3個(gè)時(shí)間點(diǎn)采血，以高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定血藥濃度，以生化法測(cè)定肌酐（Cr）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）等實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)；運(yùn)用非線性混合效應(yīng)模型（NONMEM）建立辛伐他汀的藥動(dòng)學(xué)模型；考察年齡、體重、肌酐清除率（CLcr）、ALT和AST等對(duì)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的影響，并以Bootstrap法進(jìn)行模型驗(yàn)證。結(jié)果：本研究建立了口服辛伐他汀一級(jí)吸收和消除的一房室群體藥動(dòng)學(xué)模型；年齡、體重、CLcr等因素加入模型之后，基本模型并未改變（P＞0.05）。辛伐他汀表觀清除率和表觀分布容積的群體典型值分別為1 020 L·h－1和2 350 L。結(jié)論：本研究建立了老年高血脂患者口服辛伐他汀的群體藥動(dòng)學(xué)模型，為臨床合理使用該藥提供了依據(jù)。

辛伐他??；老年患者；高血脂；群體藥動(dòng)學(xué)

辛伐他汀為新型調(diào)血脂藥，屬于3-羥基3-甲基戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶抑制劑[1，2]，目前在臨床上廣泛用于高脂血癥、冠心病等的治療[3～5]。辛伐他汀為前體藥物，在人體內(nèi)的血藥濃度低[6]，口服生物利用度為5%[7]；口服吸收后對(duì)肝臟有高度選擇性，通過(guò)細(xì)胞色素P450酶（CYP）3A4代謝，大部分在肝臟進(jìn)行首關(guān)吸收。其主要作用在肝臟，隨后經(jīng)膽汁排泄。雖然國(guó)內(nèi)、外有文獻(xiàn)[8～12]報(bào)道了辛伐他汀的藥動(dòng)學(xué)特點(diǎn)，但由于種族差異等原因，國(guó)外的研究結(jié)果并不能直接應(yīng)用于中國(guó)人群；而國(guó)內(nèi)研究的對(duì)象大多數(shù)是年輕的健康受試者。為此，本研究采用非線性混合效應(yīng)模型（NONMEM）法對(duì)30例老年高血脂患者的辛伐他汀數(shù)據(jù)進(jìn)行考察，建立群體藥動(dòng)學(xué)模型，為老年患者合理使用該藥物提供參考。

1 材料

1.1 儀器

島津LC-10AVP高效液相色譜儀，包括LC-10AVP輸液泵、SPD-10AVP紫外檢測(cè)器、ANASTAR色譜工作站（日本島津公司）；NONMEM軟件VersionⅥ，Level 1.1（Globomax Corp MD，USA）。

1.2 試藥

辛伐他汀片（浙江海正藥業(yè)集團(tuán)有限公司，規(guī)格：每片20 mg，批號(hào)：091208）；內(nèi)標(biāo)洛伐他?。ㄖ袊?guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：090402，含量≥99.4%）；乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 方法

2.1 研究對(duì)象

本文以2009年10月－2010年10月天津市民政局老年病醫(yī)院老年高脂血癥患者30例作為研究對(duì)象。

2.2 方法學(xué)驗(yàn)證

2.2.1 色譜條件：色譜柱：Kromasil C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；流動(dòng)相：乙腈-水（60∶40）；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)：237 nm；柱溫：室溫；流速：1.0 mL·min－1；靈敏度：0.002AUFS；進(jìn)樣量：20μL。

2.2.2 血漿樣品預(yù)處理：血漿樣品室溫自然解凍后，精密吸取血漿樣品0.5 mL，置離心管中，再精密加入內(nèi)標(biāo)供試液（200 ng·mL－1洛伐他?。?.5 mL，置于渦旋混合器上充分混勻5 min，用高速離心機(jī)（13 000 r·min－1）離心5 min，取出上清液，置于60℃水浴上用氮?dú)獯蹈桑?00μL流動(dòng)相復(fù)溶后，高速離心，取上清液20μL進(jìn)樣。

2.2.3 血漿標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：精密吸取空白血漿500μL，置于具塞刻度試管中，分別精密加入辛伐他汀貯備液（40μg·mL－1）適量，再精密加入內(nèi)標(biāo)供試液（200 ng·mL－1洛伐他?。?00μL，制成濃度為5、10、50、100、200、500、1 000 ng·mL－1的系列標(biāo)準(zhǔn)血樣，按照“2.2.2”項(xiàng)下方法操作，進(jìn)樣。以辛伐他汀與洛伐他汀的峰面積比（Y）對(duì)辛伐他汀濃度（X）進(jìn)行直線回歸，得血漿標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.3 給藥方法與血樣采集

給予30例患者口服辛伐他汀片20 mg（qn，20：00），然后分別在服藥前（0 d）與服藥后第20天（20 d）、第62天（62 d）晨8：00時(shí)在空腹患者右側(cè)肘正中靜脈取血（抽血時(shí)間5 s，取血量3 mL），注入含1 mol·L－1磷酸二氫鈉0.5 mL的肝素試管中。將患者血樣置B320A型離心機(jī)離心（3 000 r·min－1）10 min，取血漿1 mL，置于－20℃條件下保存，待測(cè)。

2.4 群體藥動(dòng)學(xué)模型的建立

2.4.1 基礎(chǔ)藥動(dòng)學(xué)模型：本研究以NONMEM法進(jìn)行模擬，根據(jù)文獻(xiàn)[10]選擇一級(jí)吸收和消除的一房室開放模型對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合。

2.4.2 固定效應(yīng)模型：采用逐步回歸法建立群體藥動(dòng)學(xué)模型，考察年齡（Age）、性別（Gender）、體重（Weight）、肌酐清除率（CLcr）等固定效應(yīng)對(duì)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的影響。若將某一個(gè)相關(guān)因素引入模型后目標(biāo)函數(shù)（OFV）的下降值＞3.8，表示該因素的加入使模型擬合優(yōu)度顯著改善（χ2，df＝1，P＜0.05），模型中保留該因素；再在此基礎(chǔ)上引入下一因素。將有顯著性影響者保留在模型中，建立全量回歸模型。從全量回歸模型中每次剔除一個(gè)固定效應(yīng)因素，以考察因素存在的必要性。此時(shí)用更嚴(yán)格的統(tǒng)計(jì)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn)（χ2，df＝1，P＜0.01）。若OFV增加值＞7.88，則該因素的存在具有極顯著意義，應(yīng)該留在模型中，否則應(yīng)從模型中剔除，得到最終回歸模型。

2.4.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)模型：個(gè)體間變異模型和殘差模型分別用加法模型、乘法模型和指數(shù)模型進(jìn)行擬合，取函數(shù)目標(biāo)值和變異值最小的模型為最終統(tǒng)計(jì)學(xué)模型。殘差指?jìng)€(gè)體間變異以外的變異，包括取樣、分析方法、模型等造成的誤差。

2.4.4 模型的驗(yàn)證：Bootstrap是一種數(shù)據(jù)重采樣技術(shù)。該法依據(jù)樣本經(jīng)驗(yàn)分布，對(duì)總體的分布形式不作任何假定，且能充分利用樣本提供的信息，1999年被美國(guó)FDA推薦作為群體藥動(dòng)學(xué)模型的驗(yàn)證方法[13]。一次Bootstrap的基本過(guò)程是從n個(gè)觀察值中有放回的隨機(jī)抽樣n個(gè)觀察值，組成一個(gè)新樣本，然后求算模型的參數(shù)值[14]。本研究采用500次Bootstrap對(duì)最終模型進(jìn)行驗(yàn)證，對(duì)驗(yàn)證成功所得的參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算，得到的最終模型參數(shù)平均值和95%的置信區(qū)間（CI）與最終模型的群體參數(shù)進(jìn)行比較。

3 結(jié)果

3.1 患者基本資料

研究對(duì)象的Age、Sex、Weight等個(gè)體資料以及CLcr、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)詳見表1。

表1 30例老年患者統(tǒng)計(jì)學(xué)資料Tab 1 Demographic information of 30 elderly patients

3.2 HPLC法測(cè)定血藥濃度結(jié)果

辛伐他汀和內(nèi)標(biāo)洛伐他汀保留時(shí)間分別為8.9 min和6.7 min，最低檢測(cè)濃度為2 ng·mL－1；標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y＝0.004 6X+0.122（r＝0.999 7），檢測(cè)濃度在5～1 000 ng·mL－1之間線性關(guān)系良好；低、中、高（10、100、500 ng·mL－1）3種濃度的方法回收率分別為（92.52±0.02）%、（100.95±0.03）%、（100.52±0.03）%；日內(nèi)RSD值分別為0.84%、2.04%、1.31%，日間RSD值分別為0.40%、0.34%、3.33%；重復(fù)性RSD值為0.69%。

3.3 藥動(dòng)學(xué)模型的建立

因?yàn)楸狙芯咳鄙倏诜障嗟难帞?shù)據(jù)且樣本量少，故參考文獻(xiàn)[15]報(bào)道的口服吸收系數(shù)1.3 h－1，同時(shí)嘗試用0.2～3 h－1對(duì)模型進(jìn)行擬合。結(jié)果當(dāng)Ka值為0.8 h－1時(shí)模型穩(wěn)定，所以固定Ka的值為0.8 h－1。

實(shí)驗(yàn)考察了不同誤差模型對(duì)數(shù)據(jù)的擬合優(yōu)度，結(jié)果表明當(dāng)個(gè)體間隨機(jī)效應(yīng)和殘留隨機(jī)效應(yīng)皆為加法模型時(shí)（見式①、式②）擬合效果最好。

θi是第i個(gè)個(gè)體的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，θ是該參數(shù)的群體典型值，ηi是該參數(shù)個(gè)體值與群體值之間的差異（即參數(shù)的個(gè)體間變異），符合以0為中心、方差為ω2的正態(tài)分布。Cobs為觀察值，Cpred為模型預(yù)測(cè)值，εij表示殘留隨機(jī)效應(yīng)中的加和型誤差，符合均值為0、方差為σ12的正態(tài)分布。

將Age、Weight、CLcr、ALT、AST作為協(xié)變量加入模型中考察對(duì)結(jié)果的影響。當(dāng)上述固定效應(yīng)按ΔOFV從大到小有序遞加后，各固定效應(yīng)對(duì)CL/F及V/F均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。最終將基礎(chǔ)模型作為最終模型，藥動(dòng)學(xué)參數(shù)見表2。

表2 辛伐他汀藥動(dòng)學(xué)參數(shù)及Bootstrap驗(yàn)證結(jié)果Tab 2 Pharmacokinetic parameters of simvastatin and results of Bootstrap validation

3.4 最終模型的評(píng)價(jià)

繪制最終模型的個(gè)體預(yù)測(cè)值與觀測(cè)值散點(diǎn)圖（見圖1），評(píng)價(jià)擬合結(jié)果。由圖1可知，個(gè)體預(yù)測(cè)值與觀測(cè)值有較好的相關(guān)性，趨勢(shì)線同對(duì)角線接近，模型能很好地?cái)M合觀測(cè)值。繪制最終模型個(gè)體加權(quán)殘差（IWRE）與個(gè)體預(yù)測(cè)值散點(diǎn)圖（見圖2）。由圖2可知，IWRE值絕大部分分布于±2之間，均勻分布于坐標(biāo)上下兩側(cè)，未見特別異常的點(diǎn)，模型擬合效果理想。

圖1 濃度觀測(cè)值對(duì)模型個(gè)體預(yù)測(cè)值的散點(diǎn)圖Fig 1 Scatter plots of observed simvastatin concentration vs.individual predictiveconcentration（IPRED）

圖2 個(gè)體加權(quán)殘差對(duì)模型個(gè)體預(yù)測(cè)值的散點(diǎn)圖Fig 2 Scatter plots of individual weighted residual（IWRE）vs.individual predictiveconcentration（IPRED）

3.5 模型驗(yàn)證結(jié)果

Bootstrap內(nèi)部驗(yàn)證結(jié)果顯示，500次Bootstrap中，418次成功運(yùn)行，成功率為83.6%，獲得的參數(shù)均值與最終模型參數(shù)比較差異無(wú)顯著性。最終模型參數(shù)值在418組Bootstrap相應(yīng)參數(shù)值的95%CI中，證明模型穩(wěn)定可靠。

4 討論

針對(duì)臨床特殊患者的藥動(dòng)學(xué)研究表明，不同患者人群對(duì)于藥物的體內(nèi)處置過(guò)程存在很大差異，臨床用藥過(guò)程中需要全面地了解這些特征才能保證藥物的安全、有效。因此，針對(duì)臨床特殊患者的藥動(dòng)學(xué)研究就顯得尤其重要。目前辛伐他汀在老年高血脂患者中廣泛應(yīng)用，本研究針對(duì)此類患者探討藥物體內(nèi)處置規(guī)律具有臨床適用性，可提供可靠的藥物體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)特征，促進(jìn)合理安全用藥，減少不良反應(yīng)的發(fā)生。

本研究結(jié)果顯示，辛伐他汀在老年高血脂患者體內(nèi)的CL/F的群體典型值為1 020 L·h－1，與歐陽(yáng)冬生等[16]報(bào)道的辛伐他汀在10名健康男性受試者體內(nèi)的CL/F值為2 170 L·h－1相比明顯下降，與O’Brien SG等[17]報(bào)道的辛伐他汀在中老年患者體內(nèi)的CL/F值為2 000 L·h－1相比較為一致，均比年輕受試者低。本研究中老年患者表觀分布容積V/F的群體典型值為2 350 L，與文獻(xiàn)報(bào)道[16]的3 116 L有差別，明顯低于文獻(xiàn)報(bào)道，說(shuō)明臨床患者中的老年人群的辛伐他汀藥動(dòng)學(xué)特點(diǎn)與健康年輕受試者有區(qū)別。因此，在臨床給藥中需要特別注意，不能僅僅依靠健康人的藥動(dòng)學(xué)數(shù)據(jù)來(lái)進(jìn)行給藥方案的制訂。

鑒于本研究中老年患者的自身因素、試驗(yàn)條件等方面的限制，試驗(yàn)病例數(shù)相對(duì)較少，缺乏更多樣本的數(shù)據(jù)支持；同時(shí)，老年患者自身生理機(jī)能的退化，合并癥較多，身體條件虛弱，因此試驗(yàn)取血點(diǎn)僅限于3個(gè)。如能增加樣本含量和取血點(diǎn)，并進(jìn)一步完善血藥濃度及血脂等各項(xiàng)指標(biāo)數(shù)據(jù)，將有助于建立更完善的老年患者藥動(dòng)學(xué)模型。

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Population Pharmacokinetics Research of Simvastatin in Elderly Patients with Hyperlipidemia

ZHANG Yuan，ZHU Li-qin，LIU Jing，WANG Hao
（The First Central Clinical College of Tianjin Medical University，Tianjin 300192，China）
SUN Xiu-juan
（Geriatric Hospital，Civil Affairs Bureau of Tianjin，Tianjin 300110，China）

OBJECTIVE：To explore the pharmacokinetics（PK）model of oral simvastatin in elderly patients with hyperlipidemia and provide reference for individualized medication scheme in clinical practice.METHODS：30 elderly patients with hyperlipidemia，who were orally administered with simvastatin，were enrolled in this study.Blood samples were collected before medication，and 20 days and 62 days after medication.The plasma concentration was determined by HPLC.The laboratory parameters，such as Cr，ALT，AST，and so on，were determined by biochemical method.Nonlinear mixed effect modeling（NONMEM）was employed to establish the PK model of simvastatin.The effects of age，body weight，CLcr，ALT，AST on parameters of PK were estimated.The final PK model was validated by Bootstrap method.RESULTS：A one-compartment model with first-order absorption and elimination was built.The model，which fixed effects were added into，did not improve the basic model（P＞0.05）.The typical population values of apparent clearance and apparent volume were：1 020 L·h－1and 2 350 L respectively.CONCLUSION：The PK model of oral simvastatin in elderly patients with hyperlipidemia has been established in the study，to provide reference for rational use of simvastatin in the clinic.

Simvastatin；Elderly patients；Hyperlipidemia；Population pharmacokinetics

R969.1

A

1001-0408（2012）46-4360-04

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2012.46.15

2012-06-04

2012-08-24）

＊副主任藥師。研究方向：臨床藥學(xué)。電話：0595-22277279。E-mail：lin-zhiqiang@163.com