曲桂娟，王延卓，裴志花，董曉慶，劉楠楠

(1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，長(zhǎng)春 130118;2.烏蘭察布職業(yè)學(xué)院生物技術(shù)系，內(nèi)蒙古烏蘭察布 012000;3.吉林省養(yǎng)蜂科學(xué)研究所，吉林吉林 132108)

白細(xì)胞介素(Interleukin，IL)又稱白細(xì)胞間素，它是一組由活化的單核－巨噬細(xì)胞或淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的一類(lèi)細(xì)胞因子。其作用是作用于淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞或其他細(xì)胞，負(fù)責(zé)信號(hào)的傳遞，聯(lián)絡(luò)白細(xì)胞群的相互作用，在細(xì)胞的活化、增殖和分化中起調(diào)節(jié)作用。白細(xì)胞介素的種類(lèi)很多，其中白細(xì)胞介素－2(IL－2)是由激活的T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的具有廣泛生物活性的細(xì)胞因子，能激活T淋巴細(xì)胞，刺激細(xì)胞分泌IFN－γ等細(xì)胞因子，促進(jìn)機(jī)體的細(xì)胞免疫反應(yīng)，同時(shí)也能激活B淋巴細(xì)胞，參與機(jī)體的體液免疫反應(yīng)［1－2］。本試驗(yàn)探討了對(duì)犬注射免疫增強(qiáng)劑后，通過(guò)測(cè)定IL－2的分泌情況，以確定苷肽注射液對(duì)犬免疫功能的影響。

1 材料和方法

1.1 苷肽注射液與疫苗 苷肽注射液:吉林省天達(dá)動(dòng)物藥業(yè)有限責(zé)任公司提供，批號(hào)20030601。犬五聯(lián)苗:吉林大學(xué)犬病中心提供，批號(hào)22611202。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與分組 選自吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)翀?chǎng)，2月齡體重3 kg左右，20只健康雄性犬。將犬隨機(jī)分為四個(gè)處理組，每組5只。A組注射苷肽注射液(0.25 mL/kg體重)，B 組注射苷肽注射液(0.25 mL/kg體重)和一頭份犬五聯(lián)疫苗，C組注射一頭份犬五聯(lián)疫苗，D組注射生理鹽水(2 mL)作為對(duì)照組，分組飼養(yǎng)。

1.3 血液的采集 分別于注射當(dāng)天、注射后2、7、15、2l d無(wú)菌采集犬靜脈血，分離血清。

1.4 IL－2的檢測(cè) 采用上海研吉生物科技有限公司購(gòu)買(mǎi)的犬IL－Ⅱ－ELISA試劑盒檢測(cè)。

1.5 數(shù)據(jù)處理 應(yīng)用SPSS17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，差異顯著性采用多重比較方法進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

圖1 犬注射苷肽注射液和犬五聯(lián)苗IL－2水平的變化

結(jié)果如圖1所示。從圖1可以看出，犬注射免疫增強(qiáng)劑和犬五聯(lián)苗之后，與對(duì)照組相比均可使機(jī)體產(chǎn)生一定量的IL－2，并且單獨(dú)注射免疫增強(qiáng)劑組和注射免疫增強(qiáng)劑加犬五聯(lián)苗組在注射后2 d，IL－2的分泌量均顯著高于對(duì)照組和犬五聯(lián)苗組(P＜0.05)，并且可以持續(xù)到注射后15 d，注射后21 d恢復(fù)到正常水平。

3 討論

苷肽注射液是將從動(dòng)物脾臟中提取的胸腺肽、轉(zhuǎn)移因子按照一定比例配制而成的新型動(dòng)物免疫制劑，已應(yīng)用于臨床，并且取得顯著效果。該免疫增強(qiáng)劑可激活機(jī)體的免疫器官，使其產(chǎn)生免疫活性物質(zhì)，促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的分化增殖及B淋巴細(xì)胞的活性［3－6］;還可提高動(dòng)物的抗病能力，促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)［7］。本試驗(yàn)中該免疫增強(qiáng)劑單獨(dú)應(yīng)用和其與疫苗聯(lián)合應(yīng)用，在注射后2 d就可以顯著提高犬IL－2的水平，并且可持續(xù)到注射后15 d，21 d時(shí)恢復(fù)到正常水平，說(shuō)明免疫增強(qiáng)劑具有提高機(jī)體細(xì)胞免疫的作用，尤其與疫苗合用可以增強(qiáng)機(jī)體對(duì)疫苗的免疫應(yīng)答，提高疫苗的免疫效果，降低犬傳染病的發(fā)病率。由于該免疫增強(qiáng)劑是復(fù)方生物制劑，可以減少耐藥性的產(chǎn)生、藥物的殘留，而且能夠全面提高機(jī)體免疫力、疾病治療效果。因此，該免疫增強(qiáng)劑克服了抗生素及其他制劑的不足。

IL－2是由T淋巴細(xì)胞分泌的一種淋巴因子，主要作用是誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞的增殖和分化，對(duì)自然殺傷細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞的增殖分化也有促進(jìn)作用，還能刺激已活化的B細(xì)胞的增殖、分化和抗體分泌，具有廣譜的免疫增強(qiáng)活性。因此，IL－2分泌水平的高低可以反映機(jī)體的免疫機(jī)能，特別是細(xì)胞免疫水平。肖嘯等［8］研究表明，IL－2可明顯提高幼犬對(duì)犬細(xì)小病毒疫苗的抗體應(yīng)答能力，是一種良好的犬細(xì)小病毒疫苗候選佐劑。哺乳動(dòng)物的IL－2能提高機(jī)體免疫應(yīng)答水平，其佐劑效應(yīng)已被多項(xiàng)研究所證實(shí)［9－10］。本試驗(yàn)中，該免疫增強(qiáng)劑在注射后2 d就可以顯著提高犬IL－2的水平，說(shuō)明其具有提高犬免疫機(jī)能的作用。

［1］ 于康震，鄭永輝，王永錄，等.白細(xì)胞介素－2免疫增強(qiáng)作用的研究［J］.中國(guó)畜禽傳染病，1991，(6):41 －43.

［2］ 楊林富，莫發(fā)云，肖 嘯，等.白細(xì)胞介素－2對(duì)犬瘟熱疫苗免疫效果的影響［J］.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2008，(8):89 －90.

［3］ 薛掌林，張述斌，劉瑞生，等.單味免疫增強(qiáng)劑對(duì)雛雞免疫功能各項(xiàng)指標(biāo)的影響研究［J］.甘肅畜牧獸醫(yī)，2006，36(6):5 －7.

［4］ 董曉慶，曲桂娟，程培英.苷肽注射液對(duì)豬免疫器官及血液指標(biāo)的影響研究［J］.中國(guó)獸藥雜志，2010，44(1):35 －37.

［5］ 曲桂娟，董曉慶，王延卓，等.苷肽注射液對(duì)犬淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)［J］.中國(guó)獸藥雜志，2010，44(12):12 －13.

［6］ 王 湧.豬轉(zhuǎn)移因子注射液對(duì)生長(zhǎng)豬免疫功能影響的研究［D］.雅安:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2006.

［7］ 曲桂娟，程培英，董曉慶，等.苷肽注射液對(duì)豬生產(chǎn)性能的影響［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，37(26):12575 －12588.

［8］ 肖 嘯，楊繼生，李松彪，等.白細(xì)胞介素－2對(duì)犬細(xì)小病毒疫苗免疫效果的影響［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2008，35(7):83 －84.

［9］ 張書(shū)松，劉忠虎，康相濤，等.白細(xì)胞介素2對(duì)固始雞十二指腸黏膜免疫增強(qiáng)作用［J］.中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2009，29(7):909 －913.

［10］楊明凡，張 鋒，唐湛偉，等.白細(xì)胞介素IL－2的研究進(jìn)展及在獸醫(yī)中的應(yīng)用［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2007，34(8):69 －71.