趙晶晶

(山西省飼料獸藥監(jiān)察所，太原 030027)

中藥材莪術(shù)為姜科植物莪術(shù)的干燥根莖，歸肝、脾經(jīng)，有破瘀消積、行氣止痛的功效，臨床用于治療畜禽氣血瘀滯、肚腹脹痛、食積不化［1］。莪術(shù)揮發(fā)油是其發(fā)揮藥理作用的重要部分，通常多采用水蒸氣蒸餾、二氧化碳超臨界萃取和微波萃取的方法提取揮發(fā)油。微波萃取利用了微波的內(nèi)加熱特性，因此具有快速、高效、低能耗等優(yōu)點(diǎn)。然而，微波作為電磁波，在加熱提取過(guò)程中存在使揮發(fā)油成分發(fā)生變化的可能性。本研究采用微波萃取的方式提取莪術(shù)揮發(fā)油，并對(duì)揮發(fā)油成分用GC－MS的方法進(jìn)行了鑒定。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 安捷倫6890N/5973I氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀;RE－52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠);可調(diào)式電熱套(型號(hào) MH5000，容量5000 mL);Galanz WD800型微波爐;Thermo高速離心機(jī)。無(wú)水硫酸鈉、乙醚為分析純。

1.2 藥材 廣西莪術(shù)(購(gòu)于山西省藥材公司，于11月份采挖)，由山西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院生藥教研室高建平教授鑒定為Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang。

1.3 樣品制備 莪術(shù)粉碎過(guò)30目篩、稱取50 g，加入50 mL乙醚，放入微波爐中低火照射30 s后，取出，用冷水冷卻至室溫，然后倒出大部分溶劑，再重新加入50 mL乙醚，放入微波爐中低火照射30 s，冷卻，收集溶劑，重復(fù)以上步驟直至總照射時(shí)間累積到120 s［2］，溶劑共用200 mL，最后用50 mL 乙醚洗滌殘?jiān)瑢⒋巳軇┡c前幾步的溶劑合并，10000轉(zhuǎn)離心5 min。傾出上清液，用無(wú)水硫酸鈉干燥24 h，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去乙醚，得到具有特殊香味的黃色透明液體，稱定重量，收率為3.36%。用0.45 μm濾膜過(guò)濾至進(jìn)樣小瓶中。供GC－MS分析用。

1.4 測(cè)試條件 氣相色譜條件:色譜柱為HP－5彈性石英毛細(xì)管柱(25 m ×0.25 nm，0.25 μm);柱溫60℃保持0.6 min，60～100℃，程序升溫速率6℃/min，恒溫3 min，100～250℃，程序升溫速率6℃/min，恒溫5 min汽化室溫度250℃;溶劑延遲3 min;傳輸線溫度280℃;不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣體積0.2 μL;載氣 He;載氣流量 0.9 mL/min。

質(zhì)譜條件:電子轟擊源;離子源溫度230℃;四級(jí)桿溫度160℃;電子能量70 eV;發(fā)射電流34.6 μA;電子倍增器電壓1541 V;質(zhì)譜掃描范圍m/z 20～500。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法 取莪術(shù)揮發(fā)油乙醚稀釋液0.2 μL，用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用進(jìn)行分析鑒定。通過(guò)安捷倫GC－MSD5973(I/N)化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，檢索NIST02譜圖庫(kù)，與標(biāo)準(zhǔn)圖庫(kù)進(jìn)行對(duì)照匹配，再結(jié)合有關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行人工譜圖解析，確認(rèn)莪術(shù)揮發(fā)油的各化學(xué)成分。并通過(guò) GC－MSD5973(I/N)化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，按照峰面積歸一化法進(jìn)行定量分析，求的各化學(xué)成分在揮發(fā)油中的相對(duì)百分含量。

2 結(jié)果

按前述步驟對(duì)莪術(shù)揮發(fā)油成分進(jìn)行分析，給出總離子流圖(圖1)，對(duì)每個(gè)色譜峰的化合物給出特定的MS峰，經(jīng)計(jì)算機(jī)庫(kù)存信號(hào)的檢索對(duì)質(zhì)譜圖進(jìn)行解析確定化合物，其主要成分和各組分的相對(duì)百分含量，結(jié)果見表1。

圖1 莪術(shù)揮發(fā)油的化學(xué)成分分析總離子流圖

表1 莪術(shù)揮發(fā)油的化學(xué)成分及相對(duì)含量

續(xù)表

3 討論

由以上分析結(jié)果可見，用微波萃取的方式提取莪術(shù)揮發(fā)油，耗時(shí)短、得率3.36%，高于水蒸汽蒸餾法［3］。用氣質(zhì)聯(lián)用的方法共檢測(cè)出42種成分，成份以倍半萜類為主，占到77.59%以上，單一成份中含量最高的是莪術(shù)呋喃烯酮占20.14%，其次是莪術(shù)醇占18.34%。含量高于2%的倍半萜類有:三甲基洋甘菊藍(lán)、β－欖香酮、α－石竹烯、香豆酮、β－葎草烯。非倍半萜類含量高于2%的有:異喹啉－6，7－雙二醇、油酸、9，12－十八烯酸、正十六酸、2－(3氫)－萘酮，另外還有桉油精、欖香烯、谷甾醇等藥用成分。從種類來(lái)說(shuō)，酮類占38.79%;醇類占26.46%，烯類物質(zhì)占到23.28%，酸類物質(zhì)占9.16%;其他種類含量較低，總占到2.31%。

從藥用價(jià)值上來(lái)看，除9，12－十八烯酸、正十六酸、3(N，N －二甲基氨基)咔唑、二環(huán)(4，3，0)壬烷、二環(huán)(7，2，0)十一 －4－烯、3－環(huán)己烯 －1－醇無(wú)明確的藥用功效報(bào)道外，其余的揮發(fā)油成分均有不同程度的抑菌、抗病毒、抗腫瘤、抗腹瀉、調(diào)節(jié)免疫功能的作用。如:莪術(shù)呋喃烯酮具有抑菌、破血行氣止痛的功效，莪術(shù)醇有明顯的抗腫瘤細(xì)胞作用，三甲基洋甘菊藍(lán)具有抑菌和止痛的功效，桉油精具有解熱、抗菌、防腐、平喘功效等等。

從所提取莪術(shù)揮發(fā)油的成分和數(shù)量上來(lái)分析，與文獻(xiàn)［3－8］中報(bào)道的有相同之處，也有不同之處。如:不同的提取方式都可提取到莪術(shù)醇、欖香酮、欖香烯、石竹烯、桉油精等藥用成分。但在提取的速度、揮發(fā)油提取率、揮發(fā)油的成分上還是存在差別。這是由于當(dāng)被提取物和溶劑共處于快速振動(dòng)的微波電磁場(chǎng)中時(shí)，目標(biāo)組分的分子在高頻電磁波的作用下，以每秒數(shù)十億次的高速振動(dòng)產(chǎn)生熱能，導(dǎo)致細(xì)胞破裂，其中的細(xì)胞液溢出并擴(kuò)散至溶劑中，使分子得以掙脫周圍環(huán)境的束縛。當(dāng)環(huán)境存在一定的濃度差時(shí)，即可在非常短的時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)分子自內(nèi)向外的遷移，這就是微波可在短時(shí)間內(nèi)達(dá)到高提取率的原因［9］。

理論上，傳統(tǒng)的溶劑提取法如浸漬法、滲漉法、回流提取法均可加入微波進(jìn)行輔助提取而成為高效的提取方法。但目前大多數(shù)微波萃取過(guò)程還停留于實(shí)驗(yàn)室小樣品的提取及分析，所用設(shè)備較為簡(jiǎn)陋，還不能提供工業(yè)化生產(chǎn)所需的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。下一步，我們將加強(qiáng)對(duì)微波萃取過(guò)程的放大研究及對(duì)其配套設(shè)備的開發(fā)，以推動(dòng)微波萃取過(guò)程的工程化。

［1］ 中國(guó)獸藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)獸藥典二○一○年版二部［S］.

［2］ 回瑞華，侯冬巖，李鐵純.微波－萃取木香揮發(fā)性化學(xué)成分的氣相色譜 －質(zhì)譜分析［J］.質(zhì)譜學(xué)報(bào)，2003，24(4):471 －476.

［3］ 劉 娜，余德順，代明權(quán)，等.蓬莪術(shù)揮發(fā)油提取技術(shù)的研究及其化學(xué)成分分析［J］.西南師范大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，(3):430 －432.

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