高存帥，劉煥奇，劉萌萌

（青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東 青島266109）

2011年夏天，山東省即墨市某豬場(chǎng)育肥豬相繼發(fā)病，發(fā)病率約為30%，死亡率20%。主要癥狀為呼吸困難，發(fā)熱，糞便干稀交替，后肢跗關(guān)節(jié)腫脹。綜合臨床癥狀、病理剖檢及實(shí)驗(yàn)室診斷確診為豬瘟繼發(fā)副豬嗜血桿菌病，采取防治措施后有效控制了疫情的蔓延。

1 發(fā)病情況

經(jīng)場(chǎng)長(zhǎng)介紹：該豬場(chǎng)存欄母豬40多頭，育肥豬300多頭，保育豬60頭，飼料為成品全價(jià)料，免疫譜為PR、HC、FMD、PCV－2及PRRS。2011年6月中旬開始發(fā)病，發(fā)病育肥豬均在60～100日齡，主要表現(xiàn)為精神沉郁，消瘦，發(fā)抖，體溫升高到41℃，呼吸困難，5d內(nèi)陸續(xù)死亡50多頭，病豬多數(shù)出現(xiàn)糞干稀交替，后肢跗關(guān)節(jié)腫脹，耳朵發(fā)紫，個(gè)別臀部和后肢皮下有出血斑等癥狀。采用氨芐西林配合安乃近注射治療，癥狀緩解，2d后再次復(fù)發(fā)，多數(shù)病豬發(fā)病3～5d內(nèi)死亡。母豬、保育豬及其他日齡育肥豬均未見發(fā)病。

2 臨床癥狀

發(fā)病初期，病豬精神沉郁，食欲廢絕，扎堆，體溫升高，呼吸困難，氣喘，消瘦；后來(lái)表現(xiàn)為眼分泌物增多，流鼻涕，糞便干稀交替，關(guān)節(jié)腫脹，尿液發(fā)黃，有的發(fā)紅，耳朵發(fā)紫及皮下有出血斑等癥狀；后期因呼吸衰竭死亡。

3 剖檢病變

送檢4頭病死豬，剖檢表現(xiàn)為肺臟廣泛性出血，表面有纖維素性滲出物附著；心包與胸膜粘連，心包膜增厚，典型“絨毛心”；肝臟腫大，漿膜有纖維素性滲出物；脾臟腫大不明顯，邊緣有出血，紅色梗死灶；腎臟皮質(zhì)底色蒼白，表面有散在針尖大出血點(diǎn)；腹腔內(nèi)臟器官與腹膜粘連，小腸被纖維素滲出物粘連；腸系膜淋巴結(jié)腫大有出血，切面濕潤(rùn)；膀胱有個(gè)別散在針尖狀出血點(diǎn)；關(guān)節(jié)腔積液增多。

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

4.1 HC、PRRS及PCV抗原檢測(cè) 無(wú)菌采集4頭送檢豬的血液，靜置一段時(shí)間后離心，取血清。提取核酸后，運(yùn)用本實(shí)驗(yàn)室建立的多重PCR方法檢測(cè)抗原。多重PCR擴(kuò)增HC、PRRS及PCV抗原片段大小分別為800bp，263bp，402bp，結(jié)果4頭送檢豬均為HC陽(yáng)性，PRRS陰性，PCV陰性（見圖1）。

圖1 多重PCR擴(kuò)增

4.2 病料抹片鏡檢 取肺臟、肝臟、脾臟抹片，革蘭染色鏡檢。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，肺臟內(nèi)白細(xì)胞增多，可見大量?jī)蓸O濃染的革蘭陰性短桿菌；肝臟細(xì)胞腫大，有少量革蘭陰性桿菌；脾內(nèi)淋巴細(xì)胞增多，淋巴細(xì)胞腫大不明顯。

4.3 細(xì)菌分離培養(yǎng)及生化試驗(yàn) 采集病死豬的肺臟、血液及肝臟等病料分別劃線接種于TSA培養(yǎng)基、兔鮮血瓊脂和巧克力瓊脂平板，置于CO2培養(yǎng)箱，37℃培養(yǎng)24～36h，觀察細(xì)菌生長(zhǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在兔鮮血瓊脂平板上未見生長(zhǎng)；巧克力瓊脂平板上生長(zhǎng)緩慢；TSA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)較好，有灰白、光滑呈露珠樣的菌落。挑取菌落經(jīng)革蘭染色鏡檢，細(xì)菌形態(tài)與組織病料抹片基本一致。

將分離菌株接種到微量生化鑒定管，37℃培養(yǎng)24h。結(jié)果為觸酶陽(yáng)性，可分解葡萄糖、蔗糖、果糖、半乳糖和麥芽糖；氧化酶、脲酶、鳥氨酸脫羧酶和吲哚試驗(yàn)均為陰性；不能發(fā)酵甘露醇、木糖、乳糖。符合副豬嗜血桿菌生化特性。

4.4 藥敏試驗(yàn) 挑取分離菌株接種TSA培養(yǎng)基上，采用紙片法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。結(jié)果顯示，該菌株對(duì)頭孢噻肟、頭孢噻呋、阿莫西林、慶大霉素高度敏感；氟苯尼考、氨芐西林、丁胺卡那霉素中度敏感；對(duì)恩諾沙星、環(huán)丙沙星、克林霉素不敏感。

5 防治措施

對(duì)發(fā)病豬進(jìn)行隔離，對(duì)病死豬無(wú)公害化處理。采用含氯消毒劑對(duì)豬舍和用具進(jìn)行消毒，每天1～2次。加強(qiáng)通風(fēng)，注意飼養(yǎng)密度。大群緊急接種豬瘟弱毒苗2頭份／只，飼料中添加電解多維提高大群豬的抵抗力。

發(fā)病豬肌肉注射頭孢噻肟鈉40mg／kg體重，慶大霉素20mg／kg體重，每天兩次，連用3～5d，重癥者最好采用耳靜脈注射；同時(shí)配合注射大劑量豬瘟弱毒苗20～30頭份，3d后再用1次，對(duì)于病程長(zhǎng)無(wú)治療價(jià)值的病豬予以淘汰。

6 小結(jié)

HCV主要通過(guò)呼吸道傳播，在扁桃體復(fù)制后傳遞到各級(jí)淋巴結(jié)，然后通過(guò)血液到達(dá)骨髓、臟器淋巴結(jié)和脾臟淋巴組織等，6d內(nèi)完成在豬體內(nèi)傳播。HCV在單核巨噬細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞復(fù)制，雖不引起免疫抑制，但會(huì)引起B(yǎng)淋巴細(xì)胞、輔助T細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞數(shù)量減少。干擾素是臨床上應(yīng)用較多的廣譜抗病毒藥，對(duì)于細(xì)胞外的病毒有殺滅作用，但對(duì)于細(xì)胞內(nèi)病毒無(wú)作用。外源性的干擾素半衰期短，需每天給藥1次且價(jià)格昂貴。臨床實(shí)踐證明，大劑量豬瘟疫苗可在豬體內(nèi)誘導(dǎo)干擾素的形成，并可持續(xù)形成干擾素抵抗HCV的感染。對(duì)于HC病程較長(zhǎng)的病例雖可勉強(qiáng)存活，但長(zhǎng)期的病損導(dǎo)致育肥豬生長(zhǎng)遲緩，應(yīng)及早淘汰。副豬嗜血桿菌是一種條件致病菌，機(jī)體抵抗力下降往往導(dǎo)致發(fā)病，由于發(fā)病后豬體內(nèi)大量的纖維蛋白滲出影響藥物到達(dá)病灶，導(dǎo)致療效不佳。因此，發(fā)病后應(yīng)盡早大劑量注射抗生素，通常采用兩種抗生素合理配伍，重癥病例采用靜脈注射可有效提高治愈率。

在豬病橫行的今天，只有通過(guò)合理的飼養(yǎng)管理，改善豬的惡劣生存環(huán)境，及時(shí)做好各種疫病的預(yù)防才能有效避免和降低疫病的發(fā)生。該場(chǎng)雖接種過(guò)HC疫苗卻仍出現(xiàn)疫情，究其原因發(fā)人深省。