單楊楊 姚反修

現(xiàn)代腫瘤免疫學(xué)研究表明，惡性腫瘤的發(fā)生往往伴隨有機(jī)體免疫功能的低下和紊亂，流式細(xì)胞儀檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群具有快速、多參數(shù)、可定量、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，國(guó)外已有較多報(bào)道［1、2］。本研究應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)，檢測(cè)184例老年肺癌患者外周血T淋巴細(xì)胞抗原(CD3+，CD4+，CD8+，CD4+/CD8+)及NK細(xì)胞的免疫學(xué)指標(biāo)，分析不同分期肺癌患者細(xì)胞免疫狀態(tài)的改變及對(duì)臨床診斷、嚴(yán)重程度分析的指導(dǎo)意義，從而在細(xì)胞水平認(rèn)識(shí)腫瘤患者的免疫狀態(tài)以及進(jìn)一步指導(dǎo)治療。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2008年1月至2012年1月在我院治療的184例老年肺癌患者為觀察組，其中男106例，女78例，年齡61～91歲，平均78.4歲。所有病例均經(jīng)胸部SCT、支氣管鏡或肺穿刺活檢確診，所有病例在抽血檢測(cè)前均未行放、化療。肺癌患者采用UICC的TNM腫瘤分期標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ+Ⅱ期33例，Ⅲ期82例，Ⅳ期69例。對(duì)照組取自同期住院的166例老年肺部良性疾病患者，包括肺炎、哮喘、COPD等，其中男94例，女72例，年齡61～91歲，平均76.5歲。

1.2 檢測(cè)方法 所有患者于入院時(shí)空腹抽血送檢。應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)淋巴細(xì)胞及其亞群:CD3+、CD4+、CD8+、NK細(xì)胞。儀器采用Epics XL型流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果采用Expo32系統(tǒng)軟件分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 檢測(cè)結(jié)果以百分?jǐn)?shù)或比值來(lái)表示，應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以()表示，并采用方差分析和t檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

老年肺癌患者與老年肺部良性疾病相比，淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值下降，CD8+升高，NK 細(xì)胞百分比下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表1。且隨著腫瘤TNM分期增高，上述變化越顯著，3組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均＜0.05)。見(jiàn)表2。

3 討論

腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與人體免疫功能關(guān)系密切，特別是與T淋巴細(xì)胞功能的關(guān)系更加密切［3］。腫瘤發(fā)生后機(jī)體抗腫瘤免疫主要以T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫為主，根據(jù)表達(dá)CD分子的不同，T細(xì)胞又分為CD4+和CD8+兩大亞群，不同的T細(xì)胞亞群具有不同的免疫功能。CD3+T細(xì)胞數(shù)量通常代表機(jī)體總T細(xì)胞數(shù)量，CD4+T細(xì)胞代表T輔助細(xì)胞，CD8+T細(xì)胞則代表T抑制細(xì)胞，CD4+/CD8+比值反映了機(jī)體細(xì)胞免疫功能狀態(tài)是否穩(wěn)定，比值降低代表了細(xì)胞免疫功能降低［4］。NK細(xì)胞是一組大顆粒的淋巴細(xì)胞，在抗腫瘤的免疫過(guò)程中，NK細(xì)胞對(duì)腫瘤靶細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞毒性殺傷效應(yīng)，致靶細(xì)胞死亡，也可通過(guò)ADCC效應(yīng)，殺傷溶解被特異性IgG包被的腫瘤細(xì)胞，對(duì)抑制腫瘤的生長(zhǎng)起到重要作用。此外，在腫瘤的發(fā)展過(guò)程中，腫瘤細(xì)胞本身可分泌多種免疫抑制因子，誘導(dǎo)和激發(fā)了抑制性T淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生增多，導(dǎo)致CD4+細(xì)胞表達(dá)減少，CD8+細(xì)胞增高，導(dǎo)致其比例失衡，免疫功能紊亂［5］。而且CD4+/CD8+比值還與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，即CD4+/CD8+比值越低，轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)率越高［6，7］，表明預(yù)后越差。

表1 2組患者(觀察組和對(duì)照組)T淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞水平的比較(，%)

表1 2組患者(觀察組和對(duì)照組)T淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞水平的比較(，%)

注:觀察組與對(duì)照組相比，*P＜0.05。

NK觀察組 184 46.52±9.13* 22.56±8.06* 40.87±8.75* 0.69±0.26* 4.25±1.35組別 例數(shù) CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+*對(duì)照組 166 68.04±8.49 34.05±5.81 25.16±6.17 1.57±0.45 13.45±2.00

表2 3組不同TNM分期老年肺癌患者T淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞水平的比較(，%)

表2 3組不同TNM分期老年肺癌患者T淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞水平的比較(，%)

注:與Ⅰ+Ⅱ期組相比，#P＜0.05;與Ⅲ期組相比，△P＜0.05。

NKⅠ+Ⅱ期組 33 55.03±1.38 30.79±3.87 32.16±1.35 0.85±0.組別 例數(shù) CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+15 5.10±0.45Ⅲ期組 82 43.47±1.96# 20.36±2.37# 41.96±2.52# 0.65±0.09# 4.15±0.32#Ⅳ期組 69 32.14±4.66△ 14.50±2.15△ 52.75±4.35△ 0.43±0.07△ 3.30±0.41△

本實(shí)驗(yàn)中老年肺癌患者T淋巴細(xì)胞亞群中CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比值下降，CD8+升高，NK細(xì)胞百分比下降，T淋巴細(xì)胞亞群比例失調(diào)，說(shuō)明惡性腫瘤患者的細(xì)胞免疫在一定程度上受到明顯抑制，與相關(guān)報(bào)道一致［8］。尤其在Ⅲ～Ⅳ期老年肺癌晚期患者中這一比例失調(diào)更加明顯，表明隨著腫瘤臨床分期的增加，淋巴細(xì)胞亞群受抑制的程度也增加，機(jī)體通過(guò)T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答效應(yīng)減弱及NK細(xì)胞發(fā)揮殺傷腫瘤靶細(xì)胞的活性也減弱，是臨床老年肺癌患者預(yù)后不良的標(biāo)志之一。

因此，淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)對(duì)老年肺癌的早期診斷及預(yù)后判斷有一定的臨床指導(dǎo)意義，此外，還為老年肺癌的免疫治療提供了有效的指導(dǎo)價(jià)值，通常老年肺癌患者一般情況較差，對(duì)手術(shù)、放療、化療的耐受性差，臨床上可以通過(guò)改善患者的細(xì)胞免疫功能狀態(tài)來(lái)影響腫瘤的發(fā)展進(jìn)程及預(yù)后。

綜上所述，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)老年肺癌患者外周血淋巴細(xì)胞亞群各項(xiàng)指標(biāo)的變化，不僅有利于對(duì)患者的免疫功能狀態(tài)進(jìn)行有效檢測(cè)，而且為臨床免疫治療提出了重要的指導(dǎo)意義。

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