黃 坤，梁焯華，楊 瀟，詹希美，張東京，劉 茜，陳 婧，李卓雅

廣州管圓線蟲（Angiostrongyluscantonensis）第Ⅰ期幼蟲（L1）被吞入或主動(dòng)侵入中間宿主螺類或蛞蝓體內(nèi)后，幼蟲即在宿主肺及其他內(nèi)臟、肌肉等處，在適宜溫度（25。C～26。C），約經(jīng)1w蛻皮為第Ⅱ期幼蟲，2w后經(jīng)第2次蛻皮，發(fā)育成為第Ⅲ期幼蟲，即為感染期幼蟲[1－4]。

人類因吞食含有第3期幼蟲的中間宿主、轉(zhuǎn)續(xù)宿主及被感染期幼蟲污染的食物而受感染。幼蟲進(jìn)入人體后不能發(fā)育為成蟲，往往侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)，引起嗜酸粒細(xì)胞增多性腦膜腦炎或腦膜炎。該病目前被定位為世界性的新發(fā)傳染病[5]。近年來(lái)，在臺(tái)灣、浙江、云南和福建等地因人們食用螺螄而發(fā)生多次暴發(fā)流行[6－8]，2006 年 8 月又在北京暴發(fā)，而廣州地區(qū)疑似病例和散發(fā)病例也呈上升趨勢(shì)[9－10]。目前，廣州管圓線蟲病常造成誤診，而且缺少有效的治療措施，因此預(yù)防本病的發(fā)生就成為防控的關(guān)鍵。在防治措施中，摸清與人類感染密切相關(guān)的中間宿主的感染情況就顯得至關(guān)重要。

近年來(lái)，廣州市對(duì)廣州管圓線蟲中間宿主感染情況的監(jiān)測(cè)和研究比較滯后，與國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)對(duì)水產(chǎn)食品質(zhì)量、安全的要求很不相適應(yīng)。為摸清廣州本病疫源地現(xiàn)狀，加強(qiáng)預(yù)防監(jiān)控，2011年7－8月特對(duì)全市開展一次抽樣調(diào)查，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 螺類采集 將廣州按東、西、南、北、中分為5個(gè)區(qū)域，每個(gè)區(qū)域在校園、公園、醫(yī)院、農(nóng)場(chǎng)等地的潮濕陰暗處抓取褐云瑪瑙螺、同型巴蝸牛等陸生螺，在池塘、湖泊等地抓取福壽螺、中華圓田螺等水生螺，見(jiàn)圖1。

1.2 螺類檢查 將采集的螺按不同種類及不同收集地點(diǎn)分組，逐只標(biāo)號(hào)，去殼，稱重，將螺肉剁碎，按1g螺肉20mL的比例加入人工消化液（濃鹽酸10 mL，胃蛋白酶2g，加水至1 000mL），37。C恒溫箱中消化2h后紗布過(guò)濾除去粗渣，濾液于4 000r／min離心5min，棄上清，用生理鹽水重懸沉淀，再次4 000r／min離心5min，棄上清，沉淀4。C保存待檢。

1.3 幼蟲鏡檢查 沉渣置平皿中，解剖鏡下計(jì)數(shù)廣州管圓線蟲第Ⅲ期幼蟲。計(jì)算各類樣本廣州管圓線蟲三期幼蟲檢出率和感染度。

1.4 室內(nèi)生活史循環(huán) 將分離到的幼蟲。以50條幼蟲／鼠灌胃感染SD大鼠，21d后，于肺動(dòng)脈查找成蟲，進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定。

1.5 數(shù)據(jù)分析 采用SPSS 18.0軟件統(tǒng)計(jì)分析螺的感染度、感染率。

圖1 四種中間宿主a.福壽螺；b.同型巴蝸牛；c.中華圓田螺；d.褐云瑪瑙螺Fig.1 Four intermediate hosts surveyed in this stuby a.Ampullaria gigas；b.Bradybaena similaris；c.Cipangopaludina cahayensis；d.Achatina fulica

2 結(jié) 果

2.1 中間宿主的組成 根據(jù)文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)可作為廣州管圓線蟲的中間宿主——軟體動(dòng)物多達(dá)78種[11]。在眾多中間宿主中，自然感染的中間宿主有大部分分布于國(guó)外，而我國(guó)只存在少數(shù)的幾種，主要有瑪瑙螺科的褐云瑪瑙螺，巴蝸?？频耐桶臀伵?、中華灰尖巴蝸牛和黑色真厚螺，堅(jiān)齒螺科的皺疤堅(jiān)螺，蛞蝓科的黃蛞蝓，嗜粘液蛞蝓科的雙線嗜粘液蛞蝓，足襞蛞蝓科的高突足襞蛞蝓，瓶螺科的亞馬遜瓶螺（即福壽螺），田螺科的銅銹環(huán)棱螺、中國(guó)圓田螺，椎實(shí)螺科的綠色貝克椎實(shí)螺。根據(jù)廣州的具體情況，陸生的褐云瑪瑙螺、同型巴蝸牛和水生的福壽螺、中華圓田螺比較常見(jiàn)而且較易捕獲，事實(shí)上在采集過(guò)程中也只抓到這4種中間宿主。本次調(diào)查共采集褐云瑪瑙螺226只、福壽螺161只、中華圓田螺189只、同型巴蝸牛70只。

2.2 大鼠感染情況 解剖幼蟲灌胃感染的SD大鼠，于肺動(dòng)脈發(fā)現(xiàn)一種線蟲，經(jīng)鑒定為廣州管圓線蟲成蟲，據(jù)此推及，本次調(diào)查所采用的中間宿主體內(nèi)感染的寄生蟲確為廣州管圓線蟲第Ⅲ期幼蟲。

2.3 4種中間宿主廣州管圓線蟲第Ⅲ期幼蟲感染情況檢查，見(jiàn)表1。

表1 各中間宿主廣州管圓線蟲感染情況Table.1 The infection profiles of different intermediate hosts

調(diào)查顯示褐云瑪瑙螺感染最嚴(yán)重，同屬陸生的同型巴蝸牛次之，而水生的中華圓田螺和福壽螺則未發(fā)現(xiàn)感染。褐云瑪瑙螺與同型巴蝸牛廣州管圓線蟲的感染率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2＝6.02，P＜0.05），平均感染度前者為后者的6.9倍。

2.4 各區(qū)的感染情況 各區(qū)的感染情況見(jiàn)表2。各區(qū)均有陽(yáng)性褐云瑪瑙螺檢出，且各區(qū)感染率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （χ2＝14.48，P＜0.05）。

2.5 不同大小的褐云瑪瑙螺感染度的比較 褐云瑪瑙螺大螺（＞20g）、中螺（15～20g）與小螺（＜15g）廣州管圓線蟲第Ⅲ期幼蟲的感染情況見(jiàn)表3。褐云瑪瑙螺不同重量之間感染率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異褐云瑪瑙螺的感染蟲條數(shù)的方差不齊且各組樣本數(shù)不等，故用Welch的修正值（漸近F分布）。經(jīng)統(tǒng)計(jì)軟件分析得 Welch修正值為3.965，P＜0.05。再進(jìn)一步經(jīng)過(guò)兩兩比較，可知大中螺的感染度比小螺大。

表2 各區(qū)廣州管圓線蟲感染情況Tab.2 Infection rate of A.fulica at different district of Guagzhou

3 討 論

調(diào)查發(fā)現(xiàn)廣州市褐云瑪瑙螺的廣州管圓線蟲感染率為13.27%；同型巴蝸牛感染率為2.86%，而中華圓田螺和福壽螺未查出被感染。造成這一現(xiàn)象的原因可能是由于這4種螺生活習(xí)性的差異。褐云瑪瑙螺和同型巴蝸牛同屬陸生螺，喜歡生活于陰暗潮濕的地方，具有日伏夜出的習(xí)性，白天潛伏沙泥中，夜間四處覓食。而福壽螺和中華圓田螺多集群棲息于池邊淺水區(qū)，或吸附在水生植物莖葉上，或浮于水面。各中間宿主均是接觸終宿主鼠的分泌物如糞便等而感染。相比之下，陸生的褐云瑪瑙螺和同型巴蝸牛接觸終宿主的幾率比水生的福壽螺和中華圓田螺大得多，故褐云瑪瑙螺和同型巴蝸牛的感染率比福壽螺和中華圓田螺高得多。也可能同取樣點(diǎn)是否靠近居民區(qū)鼠類經(jīng)?；顒?dòng)地點(diǎn)有關(guān)。

進(jìn)一步分析兩種陸生螺的感染情況發(fā)現(xiàn)，褐云瑪瑙螺的感染率比同型巴蝸牛高，平均感染度前者為后者的6.9倍。原因可能同兩種螺的生物學(xué)特征有關(guān)。褐云瑪瑙螺是個(gè)體較大的陸生蝸牛，最重可超過(guò)50g，外殼長(zhǎng)達(dá)12cm。褐云瑪瑙螺的壽命一般為6～7年，最長(zhǎng)的可達(dá)9年；相比之下同型巴蝸牛的體積則小很多，壽命也短。相同的環(huán)境下褐云瑪瑙螺接觸感染的機(jī)會(huì)比同型巴蝸牛大，而且積累的時(shí)間長(zhǎng)，故前者感染情況比后者嚴(yán)重。

表3 不同大小的褐云瑪瑙螺感染情況的比較Tab.3 The Comparison of the infection rate in Achatina fulica for different weights

廣州東西南北中各區(qū)的褐云瑪瑙螺感染率和感染度也不同，可能是與不同地區(qū)螺與終宿主接觸機(jī)會(huì)的多少有關(guān)。本次調(diào)查結(jié)果顯示，廣州中部地區(qū)的感染情況最嚴(yán)重，而東部則最輕。在捕螺標(biāo)本時(shí)，中部地區(qū)各點(diǎn)明顯有老鼠活動(dòng)的痕跡，而東部地區(qū)鼠跡最少。

鑒于褐云瑪瑙螺較為嚴(yán)重的感染情況，本研究進(jìn)一步分析了螺重對(duì)感染情況的影響。褐云瑪瑙螺大、中、小螺之間的感染率分別為15.19%、15.15%、9.88%，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這3者之間的感染度大、中螺比小螺的感染度高出很多?？赡苁怯捎诖舐荽婊畹臅r(shí)間長(zhǎng)，接觸幼蟲的機(jī)會(huì)相對(duì)較多，長(zhǎng)期積累的結(jié)果。

今年廣州市廣州管圓線蟲病中間宿主的感染率相比前幾年有所下降，但感染度卻有所升高。以褐云瑪瑙螺為例，今年的陽(yáng)性率為13.27%（30／226），平均感染度為794條／只，與2008年至2010年的數(shù)據(jù)相近[感染率為13.96%（111／795），平均感染度為840條／只]。而2000年為44.2%（57／129），平均感染度401條／只，2004年為27.3%（33／121），平均感染度為72條／只[9，12－13]。雖然感染率比前幾年有所下降，但是考慮到感染度仍處高位，總體的感染情況未必好轉(zhuǎn)。

由于愛(ài)國(guó)衛(wèi)生運(yùn)動(dòng)的開展以及亞運(yùn)會(huì)期間環(huán)境的整治，廣州野鼠數(shù)量較之前幾年有所減少，然而中間宿主的高感染率則提示個(gè)別地方鼠類感染情況仍然相當(dāng)嚴(yán)重，因此滅螺滅鼠的工作仍需進(jìn)一步加強(qiáng)。此外，由于人們飲食習(xí)慣和食物構(gòu)成的改變，不少?gòu)V州市民對(duì)螺肉十分喜愛(ài)，調(diào)查發(fā)現(xiàn)有不少餐館和個(gè)人收購(gòu)褐云瑪瑙螺，這樣大大增加了廣州管圓線蟲在本市的暴發(fā)流行的隱患。雖然這幾年廣州市沒(méi)有暴發(fā)廣州管圓線蟲病，但監(jiān)督管理部門仍應(yīng)加強(qiáng)監(jiān)管、宣教，防患于未然。

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