李玉寶,胡 奎,李俊凱(長(zhǎng)江大學(xué)農(nóng)學(xué)院， 湖北 荊州434025)

石榴果皮粗提物的生物活性初步研究

李玉寶,胡 奎,李俊凱(長(zhǎng)江大學(xué)農(nóng)學(xué)院， 湖北 荊州434025)

利用70%(v/v)甲醇浸提石榴(PunicagranatumL．)果皮，分別用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到4種萃取物浸膏。試驗(yàn)了4種萃取物浸膏對(duì)黃瓜和蘿卜種子發(fā)芽和生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明，除高濃度石油醚萃取物浸膏對(duì)黃瓜種子發(fā)芽有抑制作用外，其他萃取物浸膏對(duì)黃瓜種子發(fā)芽表現(xiàn)出促進(jìn)作用；氯仿萃取物浸膏對(duì)蘿卜發(fā)芽抑制作用較強(qiáng)；乙酸乙酯和正丁醇萃取物浸膏對(duì)黃瓜根長(zhǎng)表現(xiàn)出促進(jìn)作用，但根重的促進(jìn)作用不明顯；其他萃取物浸膏對(duì)種芽的生長(zhǎng)和根的生長(zhǎng)總體上表現(xiàn)為抑制作用。

石榴(PunicagranatumL．)果皮；粗提物；生物活性

植物是生物活性化合物的天然寶庫(kù)，從植物體中尋找有生物活性的化合物是農(nóng)藥研究的重要手段[1]。植物性農(nóng)藥與化學(xué)合成農(nóng)藥相比具有易降解、無(wú)藥害、作用方式多、不產(chǎn)生抗藥性、原料易得、生態(tài)效益顯著等多種優(yōu)點(diǎn)[2]，因此長(zhǎng)期以來(lái)人們致力于從植物中尋求活性化合物。石榴(PunicagranatumL．)是分布于我國(guó)絕大部分地區(qū)的果樹(shù)，其果實(shí)的果皮在醫(yī)藥領(lǐng)域的研究已經(jīng)有了一些報(bào)道[3-4]，但在農(nóng)業(yè)方面僅有抑菌活性方面的報(bào)道[5]。本研究以黃瓜、蘿卜等植物的種子為作用對(duì)象，初步探討了石榴果皮的粗提物對(duì)植物種子發(fā)芽及生長(zhǎng)的影響。

1 材料與方法

1.1 材料、儀器與試劑

試驗(yàn)所用甲醇、石油醚、正丁醇、乙酸乙酯、三氯甲烷等試劑均為市售分析純。石榴果皮采摘于湖北省荊州市沙市區(qū)岑河鎮(zhèn)，品種為“紅如意軟籽石榴”。供試蘿卜品種為鄭州891，黃瓜品種為津研四號(hào)。

試驗(yàn)主要儀器包括：RZ-52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠生產(chǎn))、JA12002型電子天平(上海天平儀器廠生產(chǎn))、SHB-B型循環(huán)水式真空泵(鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司生產(chǎn))。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 石榴果皮甲醇粗提物的制備

將新鮮的石榴果皮粉碎，用70%甲醇浸提24h，過(guò)濾，濾渣繼續(xù)用70%甲醇浸提2次，收集濾液，減壓濃縮，得甲醇浸提物。分別用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇溶劑對(duì)所得到的甲醇浸提物進(jìn)行連續(xù)萃取，減壓濃縮后得石油醚萃取物浸膏、氯仿萃取物浸膏、乙酸乙酯萃取物浸膏和正丁醇萃取物浸膏。

1.2.2 抑制植物生長(zhǎng)活性的測(cè)定

分別準(zhǔn)確稱(chēng)取上述4種萃取物浸膏用水溶解，定容，為供試萃取物母液。在直徑為9cm的培養(yǎng)皿中先加入供試萃取物母液，再倒入1.25%水-瓊脂培養(yǎng)基并混合均勻，使培養(yǎng)皿中供試萃取物濃度分別為10.000、5.000、2.500、1.250、0.625mg/ml，待其冷卻凝固后將10粒催芽露白的黃瓜種子均勻放置其上，每處理設(shè)3次重復(fù)。置于28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4d后取出，測(cè)量根長(zhǎng)、芽長(zhǎng)、根重、芽重，按照下式計(jì)算抑制率。同時(shí)按照該方法測(cè)定各萃取物浸膏對(duì)蘿卜的生物活性。

抑制率=[(對(duì)照組測(cè)量值—處理組測(cè)量值)/對(duì)照組測(cè)量值]×100%

2 結(jié)果與分析

各浸提組分對(duì)黃瓜和蘿卜種子發(fā)芽及生長(zhǎng)的影響詳見(jiàn)表1。

表1 不同萃取物對(duì)黃瓜和蘿卜種子發(fā)芽及生長(zhǎng)的影響

由表1可知，石榴果皮不同溶劑萃取物對(duì)黃瓜和蘿卜種子的發(fā)芽均有一定的影響，其中氯仿萃取物對(duì)蘿卜種子發(fā)芽率影響較大，當(dāng)最高濃度為10mg/ml時(shí)，其抑制率為20%；對(duì)黃瓜和蘿卜的芽和根的生長(zhǎng)有一定的抑制作用；其中石油醚萃取物對(duì)黃瓜和蘿卜種子的芽和根的生長(zhǎng)有抑制作用，尤其對(duì)根的生長(zhǎng)抑制效果更明顯，當(dāng)石油醚萃取物最高濃度為10mg/ml時(shí)，對(duì)黃瓜根的抑制率達(dá)到81%；同一濃度下，各種溶劑萃取物對(duì)根的生長(zhǎng)發(fā)育影響較大，根重抑制率大于芽重抑制率，根長(zhǎng)抑制率大于芽長(zhǎng)抑制率。

3 小結(jié)

石榴果皮粗提物不同溶劑萃取物對(duì)黃瓜和蘿卜的發(fā)芽和生長(zhǎng)表現(xiàn)出不同的生物活性，說(shuō)明粗提物中存在著大量的生物活性物質(zhì)，這些物質(zhì)能作為植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑或者除草劑的前體化合物。而化合物的分離、結(jié)構(gòu)鑒定還有待于進(jìn)一步深入研究。

[1] 王甘樹(shù)，陳洪國(guó).我國(guó)植物源農(nóng)藥的研究和應(yīng)用綜述[J].咸寧學(xué)院學(xué)報(bào),2004，(4)：123-125.

[2] 李俊凱，徐漢虹.植物性農(nóng)藥在媒介生物控制中的應(yīng)用[J].中國(guó)媒介生物學(xué)及控制雜志,2004,15(6)：492-495.

[3] 李云峰，郭長(zhǎng)江，楊繼軍，等.石榴皮抗氧化物質(zhì)提取及其體外抗氧化作用研究[J].營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2004,26(2)：144-147.

[4] 楊麗平，楊永紅.石榴皮的研究進(jìn)展[J].云南中醫(yī)中藥雜志,2004,25(3)：45-46.

[5] 董周永,郭松年,趙國(guó)建,等.石榴果皮提取物抑菌活性研究[J].西北植物學(xué)報(bào),2008,28(3):582-587.

S665.4

A

1673-1409(2012)05-S023-02

2012-04-12

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30971948)；湖北省教育廳資助項(xiàng)目(Q200712002)；國(guó)家大學(xué)生創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)計(jì)劃項(xiàng)目(101048913)。

李玉寶(1988-)，男，寧夏中寧人，現(xiàn)從事新農(nóng)藥開(kāi)發(fā)研究。

李俊凱，E-mailjunkaili@sina.com。

10.3969/j.issn.1673-1409(S).2012.05.007