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        大孔吸附樹脂純化“黑美人”土豆色素研究

        2012-11-15 02:03:20李彩霞麻貝貝王興德王秀梅
        食品工業(yè)科技 2012年2期
        關(guān)鍵詞:黑美人大孔土豆

        張 勇,李彩霞,*,麻貝貝,王興德,王秀梅

        (1.河西學院農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學院,甘肅張掖734000; 2.民樂縣農(nóng)業(yè)綜合開發(fā)辦公室,甘肅民樂734503)

        大孔吸附樹脂純化“黑美人”土豆色素研究

        張 勇1,李彩霞1,*,麻貝貝1,王興德2,王秀梅1

        (1.河西學院農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學院,甘肅張掖734000; 2.民樂縣農(nóng)業(yè)綜合開發(fā)辦公室,甘肅民樂734503)

        比較了5種大孔吸附樹脂對“黑美人”土豆色素的吸附和解吸效果,研究了AB-8樹脂對“黑美人”土豆色素的靜態(tài)吸附和解吸性能。結(jié)果表明,“黑美人”土豆色素在AB-8樹脂上吸附平衡時間為8h,解吸平衡時間為2h,在吸附液pH 3.0、溫度為40℃時吸附能力最強;以pH 3.0的90%的乙醇為洗脫液解吸效果較好。經(jīng)AB-8大孔吸附樹脂純化后的色素色價比粗品提高了8.4倍。實驗結(jié)果表明,AB-8樹脂可用于“黑美人”土豆色素的分離與純化。

        “黑美人”土豆色素,大孔吸附樹脂,純化

        當今社會,食品安全問題日益引起人們關(guān)注。由于人工色素安全性和副作用的問題,導致其產(chǎn)量大幅下降[1],而天然食用色素安全可靠,色澤自然,因此尋求和開發(fā)利用天然色素資源愈發(fā)重要[2-3]?;ㄉ貜V泛存在于各種植物中,是一類在國外已得到廣泛應(yīng)用的天然色素。目前國內(nèi)已開發(fā)出多種以植物資源為原料的花色素,如甘藍色素、蘿卜色素、紫蘇色素等,它們具有安全性高、資源廣泛等優(yōu)點?!昂诿廊恕蓖炼故怯筛拭C蘭州隴神航天育種研究所采用雜交育種育成的土豆新品種,是一種藥食兼用的特色健康食品[4]。該品種除營養(yǎng)豐富外,其富含的花青素還具有抗癌、抗衰老、抗病毒[5]、美容和防治高血壓等多種藥理和保健作用。有望用于食品或其他材料的著色、防腐,具有作為抗氧化劑使用的開發(fā)潛力。大孔吸附樹脂是一類不含交換基團的孔狀結(jié)構(gòu)高分子吸附劑,具有吸附容量大、選擇性好、易于解吸、機械強度高、再生處理速度快等優(yōu)點[6-8],同其他分離純化工藝相比,可減少有機溶劑的用量,簡化生產(chǎn)步驟,降低生產(chǎn)成本。經(jīng)大孔樹脂處理后,可有效地去除粗品中大量的糖類、蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)等成分,使色素成分高度富集而提高色素品質(zhì)。用大孔吸附樹脂精制花色素是比較有效的一種方法,國內(nèi)學者對色素的純化進行了大量的研究,Liu xueming等[9]用x-5樹脂對桑葚紅色素吸附和分離進行了研究;張國銘等[10]對幾種樹脂分離玫瑰紅色素進行了比較;桂克印等[11]對大孔樹脂純化樟樹果實紅色素的吸附性能進行了研究;趙慧芳等[12]對幾種樹脂純化黑莓果實色素進行了比較,并取得了良好的效果。然而,目前對于純化“黑美人”土豆色素的相關(guān)研究報道較少[13],尤其對色素純化方面的研究尚未見報道。本文比較了5種不同類型的大孔吸附樹脂對“黑美人”土豆色素粗品的吸附和解吸效果,其目的是篩選出較為適合“黑美人”土豆色素純化的樹脂類型,并對其吸附和解吸性能進行了研究,以期為“黑美人”土豆色素的工業(yè)化生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 材料與儀器

        “黑美人”土豆 采于張掖市民樂縣新天鋪,塊莖清洗掉塵土,置于冰箱冷凍保存;無水乙醇、檸檬酸、檸檬酸鈉、濃鹽酸、氫氧化鈉等藥品 均為國產(chǎn)分析純;X-5、AB-8、NKA-9、NKA-Ⅱ、D4020大孔吸附樹脂 天津南開大學化工廠產(chǎn)品。

        SHZ-2000型雙配套循環(huán)水式多用真空泵 河南省鞏義市英峪予華儀器廠;CR21GⅡ高速冷凍離心機 日立公司;VA1-2真空干燥箱 美國Shellab公司;760CRT雙光束紫外可見分光光度計 上海精密科學儀器有限公司;電子天平(Mettler Toledo,0.01mg/200g)、XT-5006-BF26超級恒溫水槽 杭州雪中炭恒溫技術(shù)有限公司;pHS-3C型精密pH計浙江蕭山;層析柱Φ25×30mm 上海亞榮生化儀器廠。

        1.2 實驗方法

        1.2.1 “黑美人”土豆色素的提取 “黑美人”土豆→洗凈→打漿機打碎→浸提(料液比1.0g∶10mL)至材料無色→抽濾→濾液減壓濃縮(壓力0.075MPa,溫度30~40℃)→濃縮液冷凍過夜→低溫離心10min(10000r/min)→收集色素液→乙醚洗滌多次→真空干燥→色素粘稠液冷凍備用。

        1.2.2 “黑美人”土豆色素的吸收光譜 精確稱取0.1g“黑美人”土豆色素粘稠液,分別用pH 3.0的酸性乙醇溶液和pH 3.0的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液溶解并定容至100mL,用760CRT雙光束紫外可見分光光度計在200~650nm范圍內(nèi)分別進行波長掃描,得到色素的吸收光譜圖。

        1.2.3 最佳樹脂類型的篩選

        1.2.3.1 樹脂的預處理 5種大孔樹脂分別用無水乙醇浸泡24h,充分溶脹,用無水乙醇淋洗至洗出液加適量水(1∶5)無白色渾濁為宜,用去離子水洗至無醇,吸干樹脂中水分,然后用5%HCl浸泡3h,用去離子水洗至中性,再用2%NaOH浸泡3h,用去離子水洗至中性,吸干樹脂中水分備用[14-15]。

        1.2.3.2 樹脂吸附率和解吸率的測定 分別準確稱取5種預處理大孔樹脂3份,每份2.0g,置于100mL三角瓶中,用pH 3.0檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液稀釋“黑美人”土豆色素,在波長521nm處測其吸光值A(chǔ)0。分別取其20mL加入到盛有2.0g樹脂的三角瓶中,用保鮮膜封口,在室溫避光條件下靜置24h,充分吸附后,過濾,測濾液吸光值A(chǔ)1;向濾出的樹脂中加入20mL pH 3.0的酸性乙醇溶液,用保鮮膜封口,室溫避光靜置24h,充分解吸后過濾,測濾液的吸光值A(chǔ)2,計算吸附率α和解吸率β[16]。

        1.2.4 靜態(tài)吸附實驗

        1.2.4.1 “黑美人”土豆色素在AB-8樹脂上吸附平衡時間的測定 測定“黑美人”土豆色素稀釋液吸光值A(chǔ)0,取20mL置于100mL三角瓶中,加入預處理樹脂2.0g,用保鮮膜封口,在室溫避光條件下靜置,每隔1h測定溶液的吸光度并計算吸附率,然后以吸附率對時間作圖,繪制靜態(tài)吸附曲線。

        1.2.4.2 pH對AB-8樹脂吸附的影響 分別配制pH為2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0的檸檬酸-檸檬酸鈉色素液。稱取處理好的AB-8樹脂7份,每份2.0g,分別置于三角瓶中,加入各pH色素溶液20mL,用保鮮膜封口,在室溫避光條件下靜置8h,過濾,在521nm處測濾液吸光值,繪制靜態(tài)吸附曲線。

        1.2.4.3 溫度對AB-8樹脂吸附的影響 將配制好的pH 3.0的檸檬酸-檸檬酸鈉色素溶液,分別取20mL加入置有2.0g預處理樹脂的三角瓶中,用保鮮膜封口,分別在溫度20、30、40、50、60、70℃恒溫水浴鍋中保溫8h,立即冷卻后,在521nm處測定不同溫度下色素液的吸光值,繪制靜態(tài)吸附曲線。

        1.2.5 靜態(tài)解吸實驗

        1.2.5.1 “黑美人”土豆色素在AB-8樹脂上解吸平衡時間的測定 稱取吸附色素飽和樹脂2.0g,加入pH 3.0的酸性乙醇溶液20mL,用保鮮膜封口,在室溫避光條件下靜置,每隔1h測定溶液的吸光度,并對時間作圖,繪制靜態(tài)解吸曲線。

        1.2.5.2 不同乙醇濃度(pH 3.0)對AB-8樹脂解吸效果的影響 稱取2.0g吸附飽和的AB-8樹脂5份,置于三角瓶中,依次加入20mL濃度為50%、60%、70%、80%、90%的pH 3.0乙醇溶液,用保鮮膜封口,在室溫避光條件下靜置洗脫2h,在521nm處測其吸光值,繪制靜態(tài)解吸曲線。

        1.2.6 “黑美人”土豆色素的AB-8樹脂柱層析 經(jīng)預處理的樹脂排水法裝柱,層析柱內(nèi)徑2.5cm,樹脂高10cm。根據(jù)靜態(tài)實驗結(jié)果,對色素進行上柱純化。粗色素濃度為1mg/mL,以90%酸性乙醇(pH 3.0)洗脫,1.0mL/min進行收集,每管收集5mL,取一定量的收集液,用pH 3.0的檸檬酸緩沖液稀釋后,在521nm處測定色素液的吸光度,以收集管數(shù)為橫坐標,色素的吸光度(乘以稀釋倍數(shù))為縱坐標繪制洗脫曲線,合并洗脫液,經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮冷凍干燥后測定色價。

        1.2.7 AB-8樹脂對“黑美人”土豆色素純化效果 精確稱取1.0g“黑美人”土豆色素粘稠液,用pH 3.0的酸性乙醇溶液稀釋至100mL,吸取1mL用酸性乙醇稀釋至10mL,在最大波長處測定吸光度。準確稱取1.2.6中純化的色素20mg用pH 3.0的酸性乙醇溶液稀釋至10mL,稀釋10倍后在最大波長處測定吸光度,根據(jù)文獻[17]計算純品和粗品色價。

        式中:A為吸光度,f為測定吸光度時所吸取樣品的稀釋倍數(shù),m為樣品的質(zhì)量(g)。

        以上各指標測定均重復3次,圖表中所有數(shù)據(jù)均為三次數(shù)據(jù)的平均值。使用SPSS11.5統(tǒng)計分析軟件進行分析,各樹脂間的顯著性差異采用Duncan新復極差法比較。

        表1 五種大孔樹脂對于“黑美人”土豆色素吸附及解吸特征Table 1 Chemical and physical properties of resins and their absorption and desorption properties on pigment from“Black Beauty”potato

        2 結(jié)果與分析

        2.1 色素的吸收光譜

        由圖1可知,“黑美人”土豆色素在pH 3.0的酸性乙醇溶液和pH 3.0的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液中,其最大吸收峰分別在536、521nm處,且在pH 3.0的酸性乙醇溶液中導致最大吸收波長紅移,兩種溶劑的吸收峰都在465~560nm范圍內(nèi),這表明“黑美人”土豆色素是花色苷類色素[13,18-20]。

        圖1 “黑美人”土豆色素的紫外-可見光譜圖Fig.1 UV-visible spectra of pigment from“Black Beauty”potato

        2.2 最佳樹脂類型的篩選

        不同類型的樹脂對色素的吸附程度不同,影響大孔吸附樹脂的吸附性能的因素有很多,包括樹脂的結(jié)構(gòu)、極性、比表面積、粒徑、孔徑以及與被吸附分子的極性、分子大小。一般來說,樹脂的極性與被吸附分子的極性相同或相近時吸附效果更好;樹脂有較大的比表面積時吸附量更大;樹脂孔徑是被吸附分子大小的5~6倍時吸附性能最好,因此篩選樹脂時要綜合考慮樹脂的極性、比表面積和孔徑等因素[21]。從表1可以看出,NKA-Ⅱ是極性樹脂,比表面積最小,故NKA-Ⅱ樹脂的吸附效果最差;D4020、X-5都是非極性樹脂,但D4020樹脂比表面積大于X-5樹脂,因此D4020樹脂吸附效果較好;X-5樹脂比NKA-9樹脂比表面積大,但NKA-9樹脂極性比X-5樹脂強,因此吸附率稍大一些;AB-8樹脂比表面積小于X-5樹脂,但是AB-8樹脂極性比X-5樹脂強,因此吸附率高。如圖2所示,采用Duncan新復極差法進行比較,從吸附率看,AB-8、NKA-9、X- 5、NKA-Ⅱ、D4020大孔樹脂之間差異不顯著(p<0.01);從解吸率看,NKA-Ⅱ、X-5、D4020大孔樹脂之間差異不顯著,AB-8、NKA-9和其它大孔樹脂相比較差異極顯著。綜合吸附率和解吸率兩個參數(shù),認為AB-8類型樹脂是比較好的吸附樹脂,故以下實驗重點考查AB-8大孔樹脂對“黑美人”土豆色素的純化效果。

        圖2 5種大孔樹脂對黑美人色素吸附率和解吸率的影響Fig.2 Effects of absorption and desorption of five types of macroporous resins on pigment from“Black Beauty”potato

        2.3 靜態(tài)吸附實驗

        2.3.1 “黑美人”土豆色素在AB-8樹脂上的吸附曲線 從圖3可以看出,在1h時“黑美人”土豆色素的吸附率已經(jīng)達到了70%,隨著時間的延長,吸附逐漸達到飽和,當吸附8h時,AB-8樹脂對“黑美人”土豆色素的吸附達到平衡,當吸附時間超過8h,吸附率緩慢增加,因此,后續(xù)吸附實驗采用8h作為吸附時間。

        圖3 AB-8大孔樹脂對黑美人土豆色素的吸附曲線Fig.3 Absorption curve of pigment from“Black Beauty”potato by AB-8 resin

        2.3.2 pH對AB-8樹脂吸附的影響 溶液的pH會改變色素的存在形式和溶解度,從而會影響樹脂的吸附和解吸附。從圖4可以看出,當pH為3時,吸附率較大,吸附效果較好,當pH繼續(xù)上升時吸附率明顯降低,這可能是由于花色苷的性質(zhì)受溶液pH的影響所致,從而影響吸附效果。所以在用AB-8樹脂純化“黑美人”土豆色素時,上樣液的pH應(yīng)控制在3.0左右。

        圖4 pH對黑美人土豆色素吸附率的影響Fig.4 Effects of pH value on absorption rate of pigment from“Black Beauty”potato

        2.3.3 溫度對AB-8樹脂吸附的影響 從圖5可以看出,“黑美人”土豆色素吸附率隨溫度的升高呈先上升然后下降的趨勢,在70℃時驟然升高,這是因為色素在溫度較低時相對比較穩(wěn)定,溫度升高使樹脂對色素的吸附率降低,當溫度達到70℃色素不穩(wěn)定,有部分色素性質(zhì)發(fā)生變化,使吸光值偏低,導致計算的吸附率偏高。因此,吸附時在40℃條件下效果最佳。

        圖5 溫度對黑美人土豆色素吸附率的影響Fig.5 Effect of temperature on absorption rate of pigment from“Black Beauty”potato

        2.4 靜態(tài)解吸實驗

        2.4.1 “黑美人”土豆色素在AB-8樹脂上的解吸曲線 從圖6可以看出,在起初的一段時間內(nèi),“黑美人”土豆色素的吸光值在逐漸增加,當解吸時間2h時,解吸基本達到平衡,延長至5h色素吸光值不再增加。

        2.4.2 不同濃度乙醇(pH 3.0)溶液對AB-8樹脂解吸效果的影響 從圖7可以看出,乙醇濃度越高,色素的解吸率越高,這是由于乙醇是一種極性溶劑,它的加入可以使大孔樹脂溶脹,減弱被吸附物質(zhì)與樹脂之間的吸附力,增加色素的溶解度,從而增大樹脂的解吸率。因此,宜選用高濃度的乙醇作為洗脫劑。

        2.5 “黑美人”土豆色素動態(tài)洗脫曲線

        洗脫曲線如圖8所示,以吸光度作為溶液色素含量的表征,則洗脫高峰約為40mL洗脫液洗脫了占總洗脫量90.13%的色素,當洗脫液用去2.2倍柱床體積即110mL時,洗脫液幾乎呈無色,說明色素已基本解吸完全。因此,用90%的pH 3.0乙醇溶液可以較好解析AB-8樹脂吸附的“黑美人”土豆色素,也證明AB-8樹脂對“黑美人”土豆色素的靜態(tài)實驗結(jié)果是可行的。

        圖6 AB-8大孔樹脂對黑美人土豆色素的解吸曲線Fig.6 Desorption curve of pigment from“Black Beauty”potato by AB-8 resin

        圖7 pH 3.0乙醇體積分數(shù)對黑美人土豆色素解吸的影響Fig.7 Effect of ethanol concentrations at pH 3.0 on desorption of pigment from“Black Beauty”potato

        圖8 “黑美人”土豆色素的動態(tài)洗脫曲線Fig.8 Dynamic elution curve of pigment from“Black Beauty”potato

        2.6 純化前后“黑美人”土豆色素色價的比較

        純化后的“黑美人”土豆色素經(jīng)濃縮干燥后為黑紫色粉末,測定其色價為43.15,而粗品的為4.59,純化后色素的色價明顯提高,是粗提物的9.4倍,且比粗品的提高了8.4倍。

        3 結(jié)論與討論

        3.1 5種大孔吸附樹脂對“黑美人”土豆色素的吸附和解吸效果比較表明,AB-8大孔樹脂對“黑美人”土豆色素的吸附和解吸效果較好,適合于該色素的純化?!昂诿廊恕蓖炼股卦贏B-8樹脂上吸附平衡時間為8h,解吸平衡時間為2h,在吸附液pH 3.0、溫度為40℃時吸附能力最強;以pH 3.0的90%的乙醇為洗脫液的洗脫效果較好。

        3.2 經(jīng)AB-8大孔吸附樹脂純化后的色素色價比粗品提高了8.4倍。該方法具有效率高、成本低、操作簡單等特點,易于實現(xiàn)“黑美人”土豆色素工業(yè)化生產(chǎn)。

        3.3 本實驗主要對AB-8大孔吸附樹脂對“黑美人”土豆色素的靜態(tài)吸附和解吸效果進行了研究,后續(xù)將對色素動態(tài)的吸附和解吸效果、樹脂的重復使用及色素各組分的分離和活性進行研究。

        [1]張國文.食用色素的研究現(xiàn)狀與前景[J].糧油食品科技,2004,12(6):17-19.

        [2]彭永芳,馬銀海,閻孝金.AB-8樹脂吸附和分離紅花黃色素[J].食品科學,2001,23(2):40-43.

        [3]楊玲,劉利軍,蒙春梅.紫羅蘭馬鈴薯花青素的提取及穩(wěn)定性研究[J].食品研究與開發(fā),2009,30(6):180-185.

        [4]龐杰.“黑美人”土豆的營養(yǎng)保健及烹飪加工[J].四川烹飪高等??茖W校學報,2008(4):24-25.

        [5]Zhao Chang Ling,Guo Hua Chun,Dong Zhi Yuan,et al. Pharmacological and nutritional activities of potat anthocyanins[J].African Journal of Pharmacy and Pharmacology,2009,2 (10):463-468.

        [6]李春美,鐘朝輝,竇宏亮,等.大孔樹脂分離純化柚皮黃酮的研究[J].農(nóng)業(yè)工程學報,2006,22(3):153-157.

        [7]李進,翟偉菁.大孔樹脂吸附分離黑果枸杞色素的研究[J].食品科學,2005,26(6):47-51.

        [8]張靜澤,陳虹,白淑芳.大孔吸附樹脂在中草藥活性成分研究中的應(yīng)用[J].遼寧中醫(yī)學院學報,2006,6(4):290-291.

        [9]liu xueming,xiao gengsheng,chen weidong,etal. Quantification and Purification of Mulberry Anthocyanins with Macroporous Resins[J] .Journal of Biomedicine and Biotechnology,2004(5):326-331

        [10]張國銘,高虹.DA-201吸附樹脂純化分離玫瑰茄紅色素的研究[J].廣東化工,2007,34(2):23-25.

        [11]桂克印,文赤夫,汪蘭,等.大孔樹脂純化樟樹果實紅色素的吸附性能研究[J].食品科學,2009,30(20):53-55.

        [12]趙慧芳,李維林,王小敏,等.黑莓果實色素純化及干燥工藝研究[J].食品科學,2009,30(12):35-39.

        [13]李彩霞,楊小龍,李瓊,等.“黑美人”土豆色素穩(wěn)定性的研究[J].食品科學,2010,31(9):89-94.

        [14]王穎,姜子濤,李榮.大孔樹脂對合成食用色素胭脂紅靜態(tài)吸附的研究[J].食品與機械,2007,23(4):83-87.

        [15]尹忠平,洪艷平,徐明生.大孔樹脂吸附純化粗提玫瑰茄紅色素研究[J].江西農(nóng)業(yè)大學學報,2007,29(6):1026-1030.

        [16]李穎暢,鄭鳳娥,孟憲軍.大孔樹脂純化藍莓果中花色苷的研究[J].食品與生物技術(shù)學報,2009,28(4):496-500.

        [17]王清濱,陳國良.食品著色劑及其分析方法[M].北京:化學工業(yè)出版社,2004:204.

        [18]K.R.馬卡姆,張寶琛譯.黃酮類化合物結(jié)構(gòu)鑒定技術(shù)[M].北京:科學出版社,1990.

        [19]陳炳華,劉劍秋.不同溶劑和保存條件對懸鉤子花色苷提取及穩(wěn)定性的影響[J].植物資源與環(huán)境學報,2003,12(4): 11-15.

        [20]閔鎖田,吳三橋,李新生,等.金屬離子對黑米花青苷色素吸收光譜的影響[J].氨基酸和生物資源,2001,23(4):4-7.

        [21]陳建軍,錢俊青,范長春.大孔吸附樹脂純化烏藥葉黃酮化合物研究[J].浙江工業(yè)大學學報,2009,37(5):530-534.

        Study on the preliminary purification of pigment from“Black Beauty”potato by macroporous resin

        ZHANG Yong1,LI Cai-xia1,*,MA Bei-bei1,WANG Xing-de2,WANG Xiu-mei1
        (1.College of Agriculture and Biotechnology,Hexi University,Zhangye 734000,China; 2.Agriculture Comprehensive Development Office of Minle County,Minle 734503,China)

        The absorption and desorption effects of 5 kinds of macroporous absorption resins on pigment from“Black Beauty”potato were compared,and the properties of static adsorption and desorption for AB-8 on“Black Beauty”potato pigment were further investigated.The results showed that the time of absorption and desorption equilibrium were 8h and 2h.Under the conditions of pH 3.0 and 40℃,the highest adsorpion ability for“Black Beauty”potato pigment was achieved,and elution the effect was better by using 90%ethanol solution at pH 3.0,which resulted in a 8.4-fold increase of color value.The results indicated that AB-8 resin could be used for separating and purifying for pigment from“Black Beauty”potato.

        “Black Beauty”potato pigment;macroporous absorption resin;purification

        TS255.1

        B

        1002-0306(2012)02-0345-05

        2011-01-24 *通訊聯(lián)系人

        張勇(1963-),男,教授,博士,研究方向:植物學、植物分子生物學。

        民樂縣科技局與河西學院合作項目。

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