盧燕 蘆 惠

杭州市第一人民醫(yī)院，浙江杭州 310006

新生兒敗血癥病原菌及其藥物敏感試驗分析

盧燕 蘆 惠

杭州市第一人民醫(yī)院，浙江杭州 310006

目的了解杭州地區(qū)新生兒敗血癥病原菌的分布及藥物敏感性，以指導臨床合理應用抗生素。 方法 回顧性分析2009年1月～2011年5月我院新生兒病房臨床診斷新生兒敗血癥97例，共分離出病原菌97株。 結果97株細菌中其中G+菌86株（88.7%），G-菌9株（9.2%），真菌2株（2.1%）。 主要致病菌為表皮葡萄球菌49例（50.5%），其次是溶血葡萄球菌7例（7.2%）；G-菌中大腸埃希菌占首位。G+菌對慶大霉素、莫西沙星、利福平、萬古霉素敏感度較好；G-菌中大腸埃希菌對哌拉西林/舒巴坦、頭孢西丁、萬古霉素、亞胺培南/西司他丁敏感度較好。 結論 新生兒敗血癥主要病原菌為革蘭陽性菌，葡萄球菌尤其是凝固酶陰性葡萄球菌是其重要致病菌。

敗血癥；新生兒；病原學；藥敏試驗

新生兒敗血癥是新生兒期嚴重的感染性疾病，是造成新生兒死亡的主要原因之一。新生兒敗血癥病原菌隨著時間和地域的不同而有所不同。國內(nèi)新生兒敗血癥的病原菌多年以來一直以金黃色葡萄球菌最多，其次為大腸埃希菌。近年來國內(nèi)文獻報道，條件致病菌如凝固酶陰性葡萄球菌感染有所增加。因此了解各地區(qū)各家醫(yī)院新生兒病房中常見的致病菌及藥敏情況對指導抗生素的合理用藥非常重要?，F(xiàn)回顧分析我院近一年多來新生兒敗血癥致病菌及藥敏實驗結果，以期對臨床診治提供借鑒。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2009年1月～2011年5月我院新生兒病房共收治經(jīng)臨床及血培養(yǎng)證實的97例敗血癥患兒。其中，男50例，女47例；胎齡＜37周 26例；37～42周 71例；出生體重＜2 500 g 16例；2 500～3 999 g 75例；≥4 000 g 6例；發(fā)病日齡≤7 d 57例，＞7 d 40例。 臨床表現(xiàn)：羊水早破25例；皮膚黃染64例，其中合并ABO溶血病15例；咳嗽氣促22例；嘔吐腹脹4例；腹瀉7例；臍部分泌物伴臍輪紅腫25例；皮膚紅斑皮疹23例；眼部分泌物8例；口腔黏膜白斑4例；體溫不升4例；發(fā)熱3例；反應差拒乳5例。

1.2 診斷標準

參照2003年全國新生兒感染暨危重病學術研討會上制訂的《新生兒敗血癥診療方案》[1]。確診：具有臨床表現(xiàn)并符合下列任一條：①血培養(yǎng)或無菌體腔內(nèi)培養(yǎng)出致病菌；②如果血培養(yǎng)出條件致病菌，則必須與另次血、或無菌體腔內(nèi)、或?qū)Ч茴^培養(yǎng)出同種細菌。臨床診斷：具有臨床表現(xiàn)且具備以下任一條：①非特異性檢查≥2項；②血標本病原菌抗原或DNA檢測陽性。

1.3 方法

1.3.1 細菌學檢查 入院后應用抗生素前嚴格消毒下采血1～2 mL注入樹脂兒童血培養(yǎng)瓶并立即送細菌室培養(yǎng)。全部病例均采用BACTEC 9240全自動血培養(yǎng)系統(tǒng)，血培養(yǎng)瓶為美國B-D公司生產(chǎn)，BACTEC為專用含樹脂小兒增菌培養(yǎng)瓶?？梢申栃跃M一步做血瓊脂平板培養(yǎng)分離菌株，采用VITEK-AMS全自動微生物鑒定系統(tǒng)鑒定菌種（法國生物梅里埃公司產(chǎn)品）。采用紙片擴散（K-B）法作抗生素敏感試驗。

1.3.2 細菌鑒定 產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLS）的檢測，應用美國國家臨床實驗室標準委員會（2009年CLSI K-B法）推薦的標準紙片擴散法進行篩選和確證試驗。藥物敏感試驗采用K-B法進行判讀，K-B紙片由英國OXOID公司提供。質(zhì)控每周測定一次，均控制在CLSI要求范圍內(nèi)。

2 結果

2.1 病原菌分布

97例血培養(yǎng)陽性患兒中7例培養(yǎng)出兩種細菌，1例培養(yǎng)出三種細菌，89例培養(yǎng)出單一細菌。其中 G+菌 86株（88.7%），G-菌 9株（9.2%）；真菌 2株（2.1%）。見表 1。主要致病菌包括表皮葡萄球菌49株 （50.5%），溶血葡萄球菌7株（7.2%），人葡萄球菌 6株（6.2%），大腸埃希菌 4株（4.1%），金黃色葡萄球菌4株（4.1%），沃氏葡萄球菌3株（3.1%），緩癥鏈球菌3株（3.1%），模仿葡萄球菌3株（3.1%），屎腸球菌3株（3.1%）。其中凝固酶陰性葡萄球菌75株；耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌60株。

表1 97例新生兒敗血癥病原菌分析

2.2 主要病原菌的藥敏試驗結果

通過藥敏試驗分析顯示，排在前五位的主要致病菌對青霉素、苯唑西林、紅霉素的敏感度普遍較低，敏感度均＜50%；頭孢唑林、頭孢西丁對表皮葡萄球菌敏感度分別為55.6%和57.1%，處于中間水平；主要革蘭陽性菌對慶大霉素、莫西沙星、利福平、萬古霉素敏感度較好；革蘭陰性菌中的大腸埃希菌對哌拉西林/舒巴坦、頭孢西丁、萬古霉素、亞胺培南/西司他丁敏感度較好，均達到100%。2例真菌對兩性霉素B、氟康唑等抗真菌藥物均敏感。見表2。

3 討論

新生兒敗血癥是新生兒期細菌侵入血液循環(huán)并在其中生長繁殖，產(chǎn)生毒素所造成的全身性感染。臨床表現(xiàn)無特異性，可表現(xiàn)呼吸暫停、呼吸窘迫、發(fā)熱或體溫不升、喂養(yǎng)不耐受、腹脹、黃疸、循環(huán)欠佳和反應差等[2]。病死率高可達10%～50%，且存活者有相當一部分發(fā)生后遺癥，所以應該高度重視。

國內(nèi)報道新生兒敗血癥的病原菌以革蘭陽性菌為主，葡萄球菌是其重要致病菌。臺灣報道新生兒敗血癥中革蘭陽性菌占（65.1%），其次是革蘭陰性菌（25.3%）和真菌（9.6%）。 革蘭陽性菌中，凝固酶陰性葡萄球最高，達51.5%；其次是金黃色葡萄球菌和腸球菌屬細菌[3]。凝固酶陰性葡萄球菌已成為新生兒血液感染的第一位病原菌。表皮葡萄球菌上升到第一位，耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌有多重耐藥趨勢[4]。在新生兒監(jiān)護病房一項回顧性研究發(fā)現(xiàn)：凝固酶陰性葡萄球菌、腸桿菌和非溶血性鏈球菌是血培養(yǎng)的常見細菌[5]。本文97例陽性標本中表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌分別占56.8%和6.3%，凝固酶陰性葡萄球菌占75株，提示葡萄球菌,尤其是凝固酶陰性葡萄球菌是新生兒敗血癥的主要病原菌。

表2 主要病原菌藥敏試驗結果（%）

真菌性敗血癥是一種高死亡率的疾病。隨著新生兒救治技術的進步，存活早產(chǎn)兒的體重和胎齡越來越低，真菌性敗血癥的發(fā)生率呈現(xiàn)明顯增高趨勢。西班牙通過多中心臨床研究發(fā)現(xiàn)在新生兒重癥監(jiān)護室病房最常見的真菌感染是白色念珠菌，常見的危險因素包括之前使用抗生素和皮質(zhì)類固醇類免疫抑制劑、中央靜脈置管、手術、早產(chǎn)、全腸外營養(yǎng)、機械通氣和血液透析、中性粒細胞減少癥。大多數(shù)念珠菌對抗真菌藥物敏感[6]。本組2例真菌性敗血癥患兒均為早產(chǎn)兒，血培養(yǎng)確診為白色念珠菌，住院時間較長，通過積極抗真菌治療均治愈出院。早期診斷和治療對改善真菌性敗血癥預后有重要意義。

印度的一項回顧性流行病學調(diào)查顯示在早發(fā)型新生兒敗血癥中，革蘭陽性菌對紅霉素敏感率為42.9%，環(huán)丙沙星為47.6%，氨基糖苷類大于50%；革蘭陰性菌對阿米卡星敏感度為74.5%，其次是氨基糖苷類，環(huán)丙沙星和頭孢噻肟。氨芐青霉素的敏感性非常低，只有8.4%[7]。本研究顯示主要革蘭陽性菌對慶大霉素、莫西沙星、利福平、萬古霉素敏感度較好而對青霉素的敏感度較低，表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌對青霉素的藥敏結果分別為16.4%和14.3%，提示葡萄球菌對青霉素耐藥率普遍較高。在革蘭陰性菌中大腸埃希菌占首位，對哌拉西林/舒巴坦、頭孢西丁、萬古霉素、亞胺培南敏感度較好而對青霉素和紅霉素普遍耐藥，與報道結果基本一致。本組結果共發(fā)現(xiàn)有60株耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌。耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌有多重耐藥趨勢。一項英國和愛爾蘭研究報道1 448株金黃色葡萄球菌和1 214株凝固酶陰性葡萄球菌中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌占42%，耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌菌株占67%，這些菌株多數(shù)報道對氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、喹諾酮類和四環(huán)素類藥物耐藥[8]。

由于臨床對抗生素使用的情況不同，細菌耐藥性變異不同地區(qū)、不同醫(yī)院的報道有一定差別，但其檢出率和多重耐藥性呈增加趨勢，應該引起臨床高度重視[5,9-10]。

本組結果提示新生兒敗血癥的病原菌以革蘭陽性菌為主，葡萄球菌尤其是凝固酶陰性葡萄球菌是其重要致病菌。臨床上細菌培養(yǎng)結果一般在24～72 h才能得到，臨床醫(yī)師應根據(jù)經(jīng)驗選擇抗生素，一旦藥敏結果出來，則應盡量選擇敏感抗生素，避免抗生素的廣泛性耐藥。

[1]中華醫(yī)學會兒科學分會新生兒組.新生兒敗血癥診療方案[J].中華兒科雜志，2003，41（12）：897-899.

[2]劉志偉，唐征，丁艷，等.新生兒早發(fā)型與晚發(fā)型敗血癥臨床特征[J].臨床兒科雜志，2011，29（5）：446-449.

[3]Ho TS，Wang SM，Wu YH，et al.Long-term characteristics of healthcare-associated infections in a neonatal intensive care unit[J].J Microbiol Immunol Infect，2010，43（5）：407-415.

[4]張申，沈波，王春新.新生兒凝固酶陰性葡萄球菌敗血癥病原菌分布及耐藥性分析[J].臨床兒科雜志，2009，27（11）：1061-1063.

[5]Shrestha S，Adhikari N，Rai BK，et al.Antibiotic resistance pattern of bacterial isolates in neonatal care unit[J].J Nepal Med Assoc，2010，50（180）：277-281.

[6]Pemán J，Cantón E，Linares-Sicilia MJ，et al.Epidemiology and antifungal susceptibility of bloodstream fungal isolates in pediatric patients：a Spanish multicenter prospective survey [J].J Clin Microbiol，2011，49（12）：4158-4163.

[7]Bhat YR，Lewis LE.Bacterial isolates of early-onset neonatal sepsis and their antibiotic susceptibility pattern between 1998 and 2004：an audit from a center in India[J].Ital J Pediatr，2011，37：32.

[8]Hope R，Livermore DM，Brick G，et al.Non-susceptibility trends among staphylococci from bacteraemias in the UK and Ireland，2001-06 [J].J Antimicrob Chemother，2008，62（Suppl 2）：65-74.

[9]畢綺麗，唐栩.我院圍手術期患者抗菌藥物應用調(diào)查分析[J].現(xiàn)代醫(yī)院，2006，6（11）：51-52.

[10]曾峰，潘桂常，林雅，等.內(nèi)科ICU和呼吸科病房臨床分離菌的變遷及耐藥性監(jiān)測[J].現(xiàn)代醫(yī)院，2008，8（11）：10-13.

Analysis of neonatal sepsis pathogens and their drug sensitivity test

LU Yan LU Hui
The First People's Hospital of Hangzhou City,Zhejiang Province,Hangzhou 310006,China

Objective To understand the distribution and drug sensitivity of neonatal sepsis pathogens in Hangzhou area in order to guide the rational clinical application of antibiotics.Methods A total of 97 patients diagnosed with neonatal sepsis in the neonatal ward of our hospital from January 2009 to May 2011 were analyzed retrospectively.A total of 97 strains of pathogens were separated.Results Of the 97 strains of pathogens,86 strains(88.7%)were G+bacteria,9 strains(9.2%)were G-bacteria and 2 strains(2.1%)were fungi.The main pathogen was staphylococcus epidermidis,found in 49 patients(50.5%),and followed by staphylococcus haemolyticus,found in 7 patients(7.2%).Escherichia coli accounted for the majority of G-bacteria.G+bacteria were sensitive to Gentamicin,Moxifloxacin,Rifampicin and Vancomycin;Escherichia coli of G-bacteria were sensitive to Piperacillin/Sulbactam,Cefoxitin,Vancomycin and Imipenem/Cilastatin.Conclusion The main pathogens of neonatal sepsis are Gram-positive bacteria,of which staphylococcus,especially coagulase-negative staphylococci is the important pathogen.

Sepsis;Neonatal;Rtiology;Susceptibility testing

R722.131

A

1673-7210（2012）08（b）-0093-03

盧燕（1982.4-），女，浙江建德人，碩士，住院醫(yī)師。

蘆惠（1966-），女，山東濰坊人，主任醫(yī)師，副教授，博士；研究方向：新生兒疾病。

2012-03-16 本文編輯：谷俊英）