李居劍 劉建生 王艷

·短篇論著·

胰腺癌組織Skp2與C-myc的表達(dá)及意義

李居劍 劉建生 王艷

細(xì)胞周期調(diào)節(jié)失控是腫瘤發(fā)生、發(fā)展的重要分子事件。S期激酶相關(guān)蛋白2(S-phase kinase associated protein 2,Skp2)是在細(xì)胞周期研究中發(fā)現(xiàn)的一種F-box蛋白，它通過調(diào)節(jié)泛素-蛋白酶途徑，參與細(xì)胞周期的調(diào)控[1]。而C-myc是一種原癌基因，是細(xì)胞從G0/G1期進(jìn)入S期的“開關(guān)”，參與調(diào)控細(xì)胞增殖、分化及凋亡等[2]。有研究表明[3]，Skp2可活化C-myc靶基因，引起S期轉(zhuǎn)換，而C-myc也可通過激活cullin基因，導(dǎo)致Skp2基因表達(dá)增高，二者協(xié)同作用參與腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。本研究檢測Skp2、C-myc蛋白在胰腺癌組織中的表達(dá)，探討其與臨床病理特征的關(guān)系。

一、資料與方法

1．病例資料：收集山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院2003年1月至2010年12月間行手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)的胰腺癌標(biāo)本48例。患者術(shù)前均未行放化療治療，其中男26例，女22例，年齡31～77歲，平均(59±11)歲。取20例同期手術(shù)切除的癌旁胰腺組織作為對照。

2．免疫組化染色：鼠抗人Skp2單抗、鼠抗人C-myc蛋白單抗及二抗PV-6002均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。應(yīng)用Envision免疫組化二步法檢測Skp2和C-myc蛋白表達(dá)。以PBS液代替一抗作陰性對照。

Skp2陽性染色主要位于胞核，C-myc陽性染色則位于胞質(zhì)或胞核，陽性著色均為出現(xiàn)棕黃色顆粒。隨機(jī)觀察10個高倍鏡視野，參照Takeuchi等[4]方法，以陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)和染色強(qiáng)度評分。陽性細(xì)胞<10%為0分，10%～29%為1分，30%～59%為2分，60%～74%為3分，≥75%為4分。無染色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，深棕黃色為3分。兩分值相乘，>1為陽性，≤1為陰性。

3．統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。顯著性差異采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman等級相關(guān)分析。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

二、結(jié)果

1．Skp2和C-myc蛋白在胰腺癌和癌旁胰腺組織中的表達(dá)：48例胰腺癌組織中Skp2的陽性表達(dá)率為79.2%(38/48)，顯著高于癌旁胰腺組織的20.0%(4/20)(χ2=20.927，P<0.01)。48例胰腺癌組織中C-myc的陽性表達(dá)率為77.1%(37/48)，顯著高于癌旁胰腺組織中的15.0%(3/20)(χ2=22.465，P<0.01，圖1)。

圖1Skp2(a)、C-myc(b)在胰腺癌組織中的表達(dá)(免疫組化 ×400)

2．Skp2和C-myc蛋白表達(dá)與胰腺癌臨床病理特征的關(guān)系：胰腺癌Skp2和C-myc表達(dá)均與性別、年齡、腫瘤大小及部位無關(guān)(P值均>0.05)，而與癌組織的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期有關(guān)(P值均<0.05，表1)。

表1 Skp2、C-myc的表達(dá)與胰腺癌臨床病理特征的關(guān)系

3．胰腺癌Skp2和C-myc蛋白表達(dá)的相關(guān)性：38例Skp2表達(dá)陽性的胰腺癌組織中，33例C-myc陽性表達(dá)；10例Skp2陰性表達(dá)的胰腺癌組織中，6例C-myc表達(dá)陰性，Skp2與C-myc的表達(dá)呈顯著正相關(guān)(r=0.453，P<0.01)。

討論Skp2是泛素連接酶復(fù)合物(Skp1-Cullin-F-box,SCF)中的一種F-box蛋白，其作為SCF的底物識別亞基，特異性識別底物并誘導(dǎo)其泛素化降解來調(diào)控細(xì)胞周期。p27kip1蛋白是其主要的靶物質(zhì)，對細(xì)胞G1～S期轉(zhuǎn)換具有抑制作用，p27kip1的降解可導(dǎo)致細(xì)胞惡性增殖[5]。Skp2蛋白在許多惡性腫瘤中均有異常升高，包括口腔鱗狀細(xì)胞癌、非小細(xì)胞肺癌、胃癌和肝癌等，且Skp2高表達(dá)患者較低表達(dá)者預(yù)后更差[6-8]。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，Skp2在胰腺癌組織顯著高表達(dá)，且Skp2的表達(dá)與腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期有關(guān)。提示Skp2與胰腺癌的侵襲、轉(zhuǎn)移能力具有一定的相關(guān)性。

C-myc是一種與細(xì)胞周期關(guān)系密切的原癌基因，其表達(dá)可使細(xì)胞獲能進(jìn)入S期。C-myc對細(xì)胞具有雙重作用，既可刺激細(xì)胞增殖，也可促進(jìn)細(xì)胞凋亡，同時C-myc的高表達(dá)還抑制細(xì)胞的分化，從而參與腫瘤的形成[9-10]。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，胰腺癌組織C-myc蛋白高表達(dá)，其表達(dá)與腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期相關(guān)，提示C-myc與胰腺癌的發(fā)生發(fā)展亦有密切關(guān)系。

本研究結(jié)果還顯示，Skp2與C-myc在胰腺癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)性，提示二者的協(xié)同作用參與了胰腺癌的發(fā)生與發(fā)展，與Kim等11的結(jié)果一致。

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10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2012.05.018

030001 山西省太原市，山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院普外科

劉建生，Email:syyyljs@126.com

2011-11-04)

(本文編輯：呂芳萍)