白 雪，石 搏，王元春，黃可欣＊

（1.吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院 形態(tài)學(xué)中心，吉林 長春130021；2.中國解放軍第二零二醫(yī)院；3.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院）

我國有悠久的大豆栽培歷史，大豆產(chǎn)品是我國人民日常生活不可缺少的食品。大豆不僅富含優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)和油脂，且還含有大量具有生理活性的物質(zhì)，包括大豆皂甙、大豆磷脂、低聚糖類等［1］；其中對大豆皂甙的研究，近年來有資料表明大豆皂甙能降低血糖、保護(hù)心血管系統(tǒng)、抗癌癥以及抗衰老作用［2］，但大豆皂甙對糖尿病大鼠心、肝、腎組織細(xì)胞酶活性的研究在國內(nèi)外尚未見相關(guān)報道，本實驗旨在觀察大豆皂甙對糖尿病大鼠心、肝、腎的作用，為大豆皂甙廣泛應(yīng)用于臨床和預(yù)防保健提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物和主要試劑 190－210g健康雄性Wistar大鼠45只，由吉林省藥品檢驗所提供（合格證號960101032）；大豆皂甙（SS）由吉林省中醫(yī)中藥研究所提供；實驗用大豆皂甙用生理鹽水稀釋；鏈脲佐菌 素 （STZ）購 于 Sigma 公 司、GOT、GPT、GLDH、ICDH、CK、LDH、HBDH、LAP、AKP試劑盒購于南京建成生物有限公司。

1.2 糖尿病模型制備 在實驗分組前，首先制備糖尿病模型，隨機取實驗動物35只，腹腔注射STZ（用新配制的枸櫞酸緩沖液溶解）50mg／Kg；48小時后采尾血測空腹血糖，濃度大于16.7mmol／L為模型復(fù)制成功［3］，該模型成功30只。

1.3 實驗分組及給藥 取未造模的10只動物做正常對照組，造模成功的30只動物隨機分為糖尿病對照組（15只）、大豆皂甙給藥組（15只），大豆皂甙給藥組每日灌胃大豆皂甙10mg／Kg，正常對照組及糖尿病對照組均每日給與等劑量生理鹽水，連續(xù)給藥3個月。在實驗過程中糖尿病對照組動物死亡4只、大豆皂甙給藥組動物死亡1只。

1.4 實驗后的處理 各組均取10只動物取材，實驗結(jié)束次日清晨處死，稱量體重。取心、肝、腎組織50mg，加2.0ml pH7.4PBS，手動勻漿，2000g離心，留上清待測［4］；測試儀器為日本日立牌7150型生化自動分析儀檢測。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析 大鼠體重及心、肝、腎組織的各指標(biāo)（GOT、GPT、GLDH、ICDH、CK、LDH、HBDH、LAP、AKP）均以表示，應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，多個樣本均數(shù)間比較采用方差分析。

2 結(jié)果

2.1 大鼠的體重 對照組：大鼠精神狀態(tài)好、皮毛光滑、體重明顯增加、反應(yīng)靈敏；糖尿病組：大鼠明顯消瘦，精神萎靡，毛皮無光澤，反應(yīng)遲鈍。大豆皂甙給藥組：大鼠體重、精神狀態(tài)、毛皮光澤和反應(yīng)度較對照組差，但明顯好于糖尿病組。

2.2 大鼠心肌組織酶活力的變化檢測 檢測心肌組織可見GOT、GPT、GLDH、ICDH、CK值在對照組、大豆皂甙給藥組和糖尿病模型組呈遞減趨勢（P＜0.01），LDH、HBDH、LAP、AKP在組間無顯著性差異（P＞0.01）。見表1。

表1 各組心肌組織各指標(biāo)的比較（n＝10，，U／g）

表1 各組心肌組織各指標(biāo)的比較（n＝10，，U／g）

＊P＜0.01compared with control group；＃P＜0.01compared with ss treatment group

Group Control Diabetic model ss treatment GOT 46.32±3.14 20.19±2.85＃ 32.47±5.31＊GPT 8.62±1.74 4.31±1.28＃ 6.13±2.08＊LDH 348.23±4.86 320.17±5.46 314.52±4.29 HBDH 287.19±2.37 293.44±3.56 290.37±2.95 LAP 0.72±0.08 0.69±0.11 0.67±0.14 GLDH 3.45±0.98 1.77±0.48＃ 1.41±0.72＊ICDH 28.26±1.38 11.47±2.31＃ 20.13±1.55＊CK 569.75±4.39 328.71±3.22＃ 526.93±4.76 AKP 1.34±0.07 1.28±0.13 1.31±0.08

2.3 大鼠肝臟組織酶活力的變化檢測 檢測肝組織糖尿病模型組與對照組、大豆皂甙給藥組比較GOT、GPT顯著升高（P＜0.01），對照組與大豆皂甙給藥組無顯著差異（P＞0.01）；大豆皂甙給藥組與對照組、糖尿病模型組比較LDH、HBDH、LAP和ICDH明顯降低（P＜0.01），對照組與糖尿病模型組無顯著差異（P＞0.01）；GLDH、CK、AKP在組間無顯著性差異（P＞0.01）。見表2。

表2 各組肝臟組織各指標(biāo)的比較（n＝10，，U／g）

表2 各組肝臟組織各指標(biāo)的比較（n＝10，，U／g）

＊P ＜0.01compared with Diabetic model group；＃P ＜0.01 compared with ss treatment group

Group Control Diabetic model ss treatment GOT 70.36±2.43＊ 121.18±3.91 71.28±2.39＊GPT 65.71±3.65＊ 135.74±2.58 71.69±3.17＊LDH 452.15±5.63＃ 446.92±5.81＃ 357.13±6.21 HBDH 172.34±4.19＃ 178.81±3.67＃ 127.36±5.22 LAP 0.62±0.11＃ 0.58±0.13＃ 0.36±0.09 GLDH 10.17±0.86 9.65±0.34 9.32±0.87 ICDH 33.38±1.06＃ 31.42±2.07＃ 22.09±1.31 CK 12.36±2.51 11.09±1.83 13.09±2.59 AKP 0.33±0.01 0.37±0.04 0.31±0.03

2.4 大鼠腎組織酶活力的變化檢測 檢測腎組織可見GOT、LAP、ICDH、CK值在對照組、大豆皂甙給藥組和糖尿病模型組呈遞減趨勢（P＜0.01），GPT、GLDH、LDH、HBDH、AKP在組間無顯著性差異（P＞0.01）。見表3。

表3 各組腎臟組織各指標(biāo)的比較（n＝10，，U／g）

表3 各組腎臟組織各指標(biāo)的比較（n＝10，，U／g）

＊P＜0.01compared with control group；＃P＜0.01compared with ss treatment group

Group Control Diabetic model ss treatment GOT 21.35±2.35 6.58±1.16＃ 12.26±1.74＊GPT 2.46±0.37 2.35±0.61 2.42±0.53 LDH 95.34±3.21 89.35±2.41 98.26±3.54 HBDH 115.31±1.12 108.34±1.68 100.86±3.52 LAP 18.89±1.67 11.26±2.48＃ 13.19±1.56＊GLDH 12.39±2.15 11.88±2.24 12.05±3.01 ICDH 13.56±1.82 8.53±1.39＊ 8.11±2.08＊CK 23.83±2.47 13.25±2.17＃ 15.38±1.61＊AKP 70.15±2.36 67.27±3.14 68.81±2.73

3 討論

大豆皂甙有降血脂、抗氧化、抑制腫瘤、抗血栓、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、減肥、調(diào)節(jié)糖代謝等多種生物活性［5－8］。以往研究還表明大豆皂甙具有降血糖及促進(jìn)胰島素分泌的作用［9］。本實驗在這些研究的基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究大豆皂甙對糖尿病大鼠心、肝和腎組織細(xì)胞酶活性的變化，觀察大豆皂甙對糖尿病時心、肝和腎的損傷具有一定的保護(hù)作用。糖尿病時它的繼發(fā)損傷多見于心、腎，而肝臟也是它的累及器官，主要是因為它們與多種酶的合成有關(guān)［10］。本實驗所檢測的九種酶：GOT（谷草轉(zhuǎn)氨酶）、GPT（谷丙轉(zhuǎn)氨酶）、GLDH（谷氨酸脫氫酶）、ICDH（異檸檬酸脫氫酶）、CK（細(xì)胞角蛋白）、LDH（乳酸脫氫酶）、HBDH（羥丁酸脫氫酶）、LAP（肽水解酶）、AKP（磷酸單酯水解酶）都主要存在于心、肝、腎組織中。通過對心肌組織的檢測可見GOT、GPT、GLDH、ICDH、CK值在對照組、大豆皂甙給藥組和糖尿病模型組呈遞減趨勢（P＜0.01），LDH、HBDH、LAP、AKP在組間無顯著性差異（P＞0.01），說明大豆皂甙能調(diào)節(jié)糖尿病大鼠心肌組織中GOT、GPT、GLDH、ICDH、CK酶的代謝而對LDH、HBDH、LAP、AKP沒有顯著作用（P＞0.01）；通過對肝組織的檢測可見糖尿病模型組與對照組、大豆皂甙給藥組比較GOT、GPT顯著升高（P＜0.01），對照組與大豆皂甙給藥組無顯著差異（P＞0.01），大豆皂甙給藥組與對照組、糖尿病模型組比較LDH、HBDH、LAP和ICDH明顯降低（P＜0.01），對照組與糖尿病模型組無顯著差異（P＞0.01），GLDH、CK、AKP在組間無顯著性差異（P＞0.01），說明大豆皂甙能調(diào)節(jié)糖尿病大鼠肝組織中GOT、GPT、LDH、HBDH、LAP、ICDH、CK酶的代謝而對GLDH、AKP沒有顯著作用（P＞0.01）；通過對腎組織的檢測可見GOT、LAP、ICDH、CK值在對照組、大豆皂甙給藥組和糖尿病模型組呈遞減趨勢（P＜0.01），GPT、GLDH、LDH、HBDH、AKP在組間無顯著性差異（P＞0.01），說明大豆皂甙能調(diào)節(jié)糖尿病大鼠腎組織中GOT、LAP、ICDH、CK酶的代謝而對 GPT、GLDH、LDH、HBDH、AKP沒有顯著作用（P＞0.01）。總之，大豆皂甙能夠調(diào)節(jié)糖尿病大鼠心、肝和腎組織的細(xì)胞酶代謝，并對糖尿病時心、肝和腎的損傷具有一定的保護(hù)作用，其具體的調(diào)節(jié)機制、保護(hù)機理及各組織之間的調(diào)節(jié)是否具有相關(guān)性還有待于進(jìn)一步的研究。

［1］李艷青，王 濤.大豆皂甙功能特性及應(yīng)用前景［J］.糧食與油脂，2004，6：17.

［2］王銀萍，吳家祥，張鳳蘭，等.大豆皂甙和人參莖葉皂甙對糖尿病大鼠血SOD和LPO的影響［J］.白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，1993，19（2）：122.

［3］楊懷中，王 莉，廖國清，等.鏈尿佐菌素致糖尿病大鼠骨髓EPO、SCF濃度［J］.中國老年學(xué)雜志，2008，16（2）：101.

［4］王忠山，王弘珺，許宗革，等.青春期糖尿病雄鼠血清和心、肝、腎組織細(xì)胞酶活力變化的比較［J］.白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2000，26（4）：347.

［5］管偉舉，谷克仁.大豆皂甙研究概況［J］.糧油食品科技，2007，23（5）：120.

［6］王忠霞，杜麗潔，李秀花.大豆皂甙對大鼠血脂及血液流變學(xué)影響［J］.中國公共衛(wèi)生，2011，27（11）：1444.

［7］尹學(xué)哲，李 天，汪 霞.大豆皂醇抗脂質(zhì)過氧化作用的研究［J］.食品工業(yè)科技，2010，31（7）：143.

［8］袁曉潔，郭 英，孫維琦，等.大豆異黃酮與大豆皂甙抗疲勞作用［J］.中國公共衛(wèi)生，2007，23（3）：137.

［9］馬洪喜，李冬梅，汪 軍.大豆皂甙對糖尿病大鼠血清激素水平的影響［J］.長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2003，19（2）：35.

［10］谷浩華，賈春華.糖尿病中醫(yī)病機及治法研究進(jìn)展［J］.上海中醫(yī)藥雜志，2011，45（1）：83.