自俊青，王基偉，黃畢生

（大理學(xué)院，云南大理 671003）

微波法制備木犀草素

自俊青，王基偉，黃畢生

（大理學(xué)院，云南大理 671003）

報(bào)道了在堿性水溶液中，利用微波輻射，以保險(xiǎn)粉（Na2S2O4）還原蘆丁制備木犀草素的反應(yīng)。采用功率為250 W條件下，加熱回流1 h（20 min×3），收率67%。與已知方法相比，本法原料易得，操作簡單，工藝穩(wěn)定，反應(yīng)時(shí)間短，收率較好。同時(shí)，對(duì)微波加熱的機(jī)制和優(yōu)點(diǎn)進(jìn)行了分析和總結(jié)。

制備；蘆??；木犀草素；微波加熱

木犀草素（luteolin），又名藤黃菌素，是從白毛夏枯草、菊花、全葉青蘭等藥用植物中分離出的有效成分，其結(jié)構(gòu)為5，7，3′，4′-四羥基黃酮，見圖1。

圖1 木犀草素的結(jié)構(gòu)

木犀草素具有抗菌、抗炎、抗癌作用，其天然品已在臨床上用于止咳、祛痰、消炎，有較好的療效。也有人報(bào)道木犀草素有降低粥樣動(dòng)脈硬化和膽固醇、增強(qiáng)毛細(xì)管通透性的作用〔1〕。由于其具有抗氧化性而用于抑制含油食品的酸敗，可作為食品保鮮劑〔2〕。木犀草素在植物中的含量不高，如菊花中含量為0.02～0.07%〔3〕，而且資源有限、提取率低，因而大大影響了其在臨床和其它方面的應(yīng)用。以下將用微波加熱法，在堿性條件下，用保險(xiǎn)粉（Na2S2O4）將蘆?。╮utin）還原，得到了木犀草素，反應(yīng)一步完成，收率較好。與其它文獻(xiàn)報(bào)道〔4〕相比，該法具有反應(yīng)時(shí)間短、原料價(jià)格低廉且易得、步驟簡單、操作簡便、收率較高的優(yōu)點(diǎn)。反應(yīng)式見圖2。

圖2 微波加熱法制備木犀草素

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑 WHL07S-01型微波加熱反應(yīng)器（南京三樂微波技術(shù)發(fā)展有限公司），Agilent 1200高效液相色譜儀（包括G1314C/D VWD檢測(cè)器，G1329 AALS自動(dòng)進(jìn)樣器，Agilent 1200色譜工作站）；梅特勒AE240型電子天平；KQ2200DB型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），ZFQ-85A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海安亭電子儀器廠），顯微熔點(diǎn)儀（日本），便攜式pH測(cè)定儀（pH-SCAN-2，馬來西亞），木犀草素對(duì)照品（四川省維克奇生物科技有限公司），蘆?。ㄋ拇▍f(xié)力制藥有限公司），硫代硫酸鈉（Na2S2O4）、甲醇（CH3OH）、乙醇（CH3CH2OH）、氫氧化鈉（NaOH）均為分析純；乙腈（色譜純，上?；瘜W(xué)試劑研究所）。

HPLC色譜條件為：Diamonsil ODS C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流動(dòng)相：乙腈（V）∶1%乙酸（V）=35∶65（pH=2.6），流速1.0 mL/min，進(jìn)樣量20 μL，柱溫：室溫，檢測(cè)波長：254 nm。

1.2 木犀草素的制備

1.2.1 原料的純化 在1 000 mL水中，加入30 g蘆丁，在加熱和攪拌下，緩緩加入30%的NaOH溶液至蘆丁完全溶解，過濾后冷卻至室溫，用濃鹽酸調(diào)pH= 3.8，析出黃色結(jié)晶，過濾，用去離子水洗滌，100℃真空干燥，得蘆丁精制品。

1.2.2 木犀草素的制備 在2 000 mL燒瓶中加入500 mL去離子水、20 g NaOH，待其溶解后，加入18 g蘆丁，攪拌，得暗紅色溶液。加入90 g保險(xiǎn)粉（Na2S2O4）后，將燒瓶放入微波反應(yīng)器內(nèi)，接好回流裝置，調(diào)功率為250 W，加熱回流1 h（20 min×3），冷卻至室溫，反應(yīng)液用稀鹽酸中和至pH=2.4，再冷至5℃，過濾，用去離子水洗滌，85℃真空干燥，得木犀草素粗產(chǎn)品。

1.2.3 木犀草素產(chǎn)品的純化 木犀草素粗產(chǎn)品加入到20倍量的乙醇中，加熱溶解，趁熱過濾，濾液濃縮至1/6體積，冷卻、靜置24 h后過濾，得淡黃色結(jié)晶；再于母液中加入等量的去離子水，靜置、過濾，合并兩次過濾得到的固體結(jié)晶，用去離子水洗滌、過濾，85～90℃真空干燥，得木犀草素黃綠色晶體。

2 結(jié)果與討論

用高效液相色譜法測(cè)定產(chǎn)品的純度。稱取5 mg樣品，用甲醇定容于50 mL容量瓶中，吸取20 μL進(jìn)樣，測(cè)定結(jié)果表明所得產(chǎn)品純度均在98%以上，木犀草素對(duì)照品和合成樣品的HPLC色譜圖。見圖3、圖4。

圖3 對(duì)照品（木犀草素）

圖4 樣品（木犀草素）

本次實(shí)驗(yàn)用18 g蘆丁在堿性溶液中與90 g Na2S2O4反應(yīng)1 h，得到產(chǎn)品6.4 g，經(jīng)高效液相色譜法測(cè)定其含量為92.2%，收率為67%。按上述純化方法提純后，得到產(chǎn)品5.2 g，純度99.4%。

有報(bào)道用保險(xiǎn)粉將高位阻的酮基還原為羥基〔5〕，而將糖基還原為氫的反應(yīng)尚未見報(bào)道過，以上的實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，在堿性環(huán)境中和加熱條件下，用它還原蘆丁制備木犀草素得到了令人滿意的效果。

我們?cè)贸Ｒ?guī)加熱回流的方法，用TLC跟蹤〔6〕，以期找到反應(yīng)時(shí)間與轉(zhuǎn)化率的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，到一定時(shí)間以后，反應(yīng)就不再進(jìn)行了。見表1。

表1 用常規(guī)加熱回流法制備反應(yīng)所需時(shí)間及收率

這是由于制備反應(yīng)需要較長時(shí)間加熱，而還原劑Na2S2O4在水溶液中又容易氧化分解〔7〕，并與制備反應(yīng)形成競爭所致。為了解決這一矛盾，我們采用了微波加熱來減少和抑制副反應(yīng)。微波是頻率介于300 MHz～300 GHz之間的電磁波，具有熱效應(yīng)，微波致熱是物質(zhì)在電磁場中介質(zhì)偶極轉(zhuǎn)向極化和界面極化的時(shí)間正好與微波的頻率吻合，促使介質(zhì)轉(zhuǎn)動(dòng)摩擦而引起體系內(nèi)部產(chǎn)生熱量，是一種內(nèi)加熱方式，它能穿透到物質(zhì)內(nèi)部，使物質(zhì)內(nèi)部和表面同時(shí)被加熱，所以微波加熱具有致熱速度快，穿透性強(qiáng)，操作斷時(shí)間短，從而抑制副反應(yīng)的優(yōu)點(diǎn)；也有觀點(diǎn)認(rèn)為微波通過非致熱效應(yīng)改變了反應(yīng)途徑〔8〕。但微波加熱的溫度不好控制，也容易引起反應(yīng)液暴沸，最好采用間歇式加熱。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，用微波加熱來實(shí)現(xiàn)Na2S2O4還原蘆丁制備木犀草素的反應(yīng)，是非常有效的。

〔1〕韓煒，邢燕，康延國.木犀草素生物活性研究進(jìn)展〔J〕.云南中醫(yī)中藥雜志，2010，31（4）：60-61.

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〔3〕朱麗，盧化.HPLC法測(cè)定藥用菊花中含量〔J〕.湖北中醫(yī)雜志，2010，3（2）：74-75.

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Preparation of Luteolin by Microwave Irradiation

ZI Junqing,WANG Jiwei,HUANG Bisheng
（Dali University,Dali,Yunnan 671003,China）

Rutin was reduced to luteolin by dithionite with microwave irradiation in aqueous sodium hydroxide solution.The yield of luteolin was 67%when the mixture was refluxed for twenty minutes under 250 W for three times.The method of preparation of luteolin is convenient and timesaving with high yield.At the same time,the advantage and mechanism of heating have also been discussed.

preparation;rutin;luteolin;microwave irradiation

O62［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］A［文章編號(hào)］1672-2345（2012）04-0045-03

大理學(xué)院應(yīng)用開發(fā)研究基金項(xiàng)目（KYYY200903）

2011-09-15

2012-02-27

自俊青，教授，主要從事應(yīng)用化學(xué)和化學(xué)教育研究.

（責(zé)任編輯 袁 霞）