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        痛瀉藥方配伍風(fēng)藥的作用研究

        2012-10-31 05:27:32胡旭光劉莎莎王槾
        關(guān)鍵詞:小鼠實(shí)驗(yàn)模型

        胡旭光 劉莎莎 王槾

        前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):痛瀉藥方具有止痛止瀉作用[1],風(fēng)藥可勝濕止瀉,疏肝止痛[2],為明確防風(fēng)在方中的作用,本實(shí)驗(yàn)采用D-IBS大鼠模型和小鼠腹瀉模型,觀察痛瀉藥方與痛瀉藥方去防風(fēng)方、痛瀉藥方倍防風(fēng)方的作用。

        1 材料

        1.1 藥物與試劑 阿洛司瓊SIGMA,Lot29F0438;地芬諾酯片,江蘇揚(yáng)子江藥業(yè),批號(hào):10021。

        1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD大鼠和NIH小鼠,SPF級(jí),廣州省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,合格證號(hào):SCXK(粵)2008-0002。

        1.3 中藥的制備 痛瀉藥方原方的制備方法:按照原方6∶4∶4∶3的比例,取藥材360 g按1∶8加入自來(lái)水煎煮,煮沸后30 min后過(guò)濾,再按1∶5加入清水,煮沸30 min后過(guò)濾上清液,將兩次所得的上清液混合攪均,用水浴濃縮到所需濃度。痛瀉藥方倍防風(fēng)方取白術(shù)120 g:白芍90 g:陳皮90 g防風(fēng)120 g,制備方法同痛瀉藥方原方。

        2 方法

        2.1 對(duì)D-IBS模型大鼠的治療作用

        2.1.1 母鼠幼鼠分離應(yīng)激[3]新生雄性SD大鼠分為6組,分別是正常組、蒸餾水組、痛瀉藥方與痛瀉藥方去防風(fēng)方、痛瀉藥方倍防風(fēng)方、阿洛司瓊組,后五組從出生后第2~14天,每天母子分離3 h。

        2.1.2 給藥及復(fù)合應(yīng)激 從第8周開(kāi)始給藥,灌胃1次/d,共2周,隨后進(jìn)行復(fù)合避水應(yīng)激:將動(dòng)物放于周邊有水的8×6×6 cm的平臺(tái)上(水面低于平臺(tái)1 cm),大鼠為了避免接觸水,站立于平臺(tái)上,記錄1小時(shí)內(nèi)的排便粒數(shù)。

        2.1.3 腹部回縮反射評(píng)價(jià)腹痛反應(yīng)[4]將血壓計(jì)、針管與自制氣囊連接。大鼠在乙醚麻醉下,將石蠟油潤(rùn)滑后的氣囊經(jīng)肛門(mén)插入約5cm,用膠布把導(dǎo)管和大鼠尾巴根部纏在一起,固定氣囊。15 min后待大鼠適應(yīng)環(huán)境,逐漸打氣擴(kuò)張腸道,觀察引起大鼠腹部抬起和背部拱起的壓力閾值。

        2.2 對(duì)番瀉葉引起小鼠腹瀉的影響 取小鼠50只,隨機(jī)分為5組,分別為痛瀉藥方與痛瀉藥方去防風(fēng)方、痛瀉藥方倍防風(fēng)方,蒸餾水組和地芬諾酯組,每組10只。給藥3 d,實(shí)驗(yàn)前禁食不禁水12 h,于末次給藥后1小時(shí)各組小鼠均給番瀉葉(100%,每只0.5 ml),隨后將小鼠置墊濾紙單籠中觀察稀便點(diǎn)數(shù)。每隔2小時(shí)記錄1次腹瀉便次數(shù)(軟便、水樣便、粘液便稱(chēng)為腹瀉便),觀察6 h,計(jì)算累積腹瀉次數(shù)。

        3 結(jié)果

        3.1 對(duì)D-IBS模型大鼠的影響 痛瀉藥方與痛瀉藥方倍防風(fēng)方均提高大鼠腹部收縮抬腹和拱背的壓力閾值、減少排便次數(shù),痛瀉藥方去防風(fēng)方對(duì)上述指標(biāo)無(wú)顯著影響。結(jié)果見(jiàn)表1。

        表1 對(duì)復(fù)合應(yīng)激IBS模型大鼠腹部疼痛和排便的影響(±s)

        表1 對(duì)復(fù)合應(yīng)激IBS模型大鼠腹部疼痛和排便的影響(±s)

        注:與正常組相比:**P<0.01,與蒸餾水組相比△P<0.05,△△P<0.01

        組別 劑量(g/kg) 樣本數(shù)(只) 排便數(shù)(粒/小時(shí)) 抬腹(mm Hg) 拱背(mm Hg)10 6.4±3.1 53.3±6.7 65.4±7.1蒸餾水組 - 10 14.9±4.8** 30.5±4.3** 39.6±4.5**痛瀉藥方原方組 7.8 10 7.3±4.3△△ 49.5±5.4△ 59.2±5.6△痛瀉藥方倍防風(fēng)組 9.2 10 8.1±3.8△△ 45.7±3.8△ 52.2±4.7△痛瀉藥方去防風(fēng)組 6.4 10 10.8±4.5 40.8±4.5 46.4±7.3阿洛司瓊組 4×10-3 10 6.8±3.2△△ 51.5±5.8△△ 62.4±6.7正常組 -△△

        3.2 止瀉作用 痛瀉藥方原方和痛瀉藥方倍防風(fēng)方的腹瀉次數(shù)均較蒸餾水組減少,痛瀉藥方去防風(fēng)方可一定程度減少腹瀉次數(shù),但未顯示出顯著差異。結(jié)果見(jiàn)表2。

        表2 對(duì)小鼠番瀉葉引起小鼠腹瀉的影響

        4 討論

        痛瀉要方為《景岳全書(shū)》所載,具有舒肝健脾的功效,主治肝旺脾虛、腸鳴腹痛、大便泄瀉癥。該癥與D-IBS臨床癥狀極其相似,痛瀉要方臨床治療腹瀉型IBS療效滿意[5]。

        風(fēng)藥是指柴胡、防風(fēng)、升麻等一類(lèi)氣味辛薄,藥性升浮,具有發(fā)散祛風(fēng)作用的藥物。痛瀉要方由白術(shù)、白芍、防風(fēng)、陳皮組成,其中白術(shù)為君藥,益氣健脾燥濕;芍藥為臣藥,緩急止痛柔肝;防風(fēng)(風(fēng)藥)為佐藥,勝濕助白術(shù)以止瀉,助芍藥以柔肝止痛[6]。本次實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):痛瀉藥方原方、痛瀉藥方倍防風(fēng)方對(duì)D-IBS大鼠和小鼠腹瀉均有顯著的治療作用,痛瀉藥方減防風(fēng)則作用消失,從而證明防風(fēng)在痛瀉藥方止痛止瀉療效中發(fā)揮了重要作用,也驗(yàn)證了中醫(yī)“風(fēng)能勝濕止瀉,風(fēng)藥疏肝解郁行氣止痛”的理論。

        [1]胡旭光,楊全,王汝俊.慢性內(nèi)臟痛覺(jué)超敏大鼠及熱板法疼痛小鼠模型對(duì)痛瀉要方的鎮(zhèn)痛反應(yīng).中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù),2007,16(6):1256-1258.

        [2]張曉峰.風(fēng)藥在脾胃病中的配伍應(yīng)用.四川中醫(yī),2002,20(6):30-31.

        [3]AL-Chaer ED,Kawasaki M,Pasricha PJ,et al.A new model of chronic visceral hypersensitivity in adult rats induced by colon irritation during post- natal development.Gastroenterolgoy,2000,119(5):12762-12851.

        [4]謝健群,李國(guó)霞,馬貴同,等.疏肝健脾法防治腸易激綜合征的臨床及實(shí)驗(yàn)研究.上海中醫(yī)藥雜志,1999,(5):26-27.

        [5]錢(qián)峰,卜平.痛瀉要方治療腸道疾病的藥理及臨床研究進(jìn)展.中國(guó)臨床保健雜志,2011,(2):35-36.

        [6]王瑩.淺談痛瀉要方方證及其防風(fēng)的使用.天津中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),1992,(4):30-31.

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