查登峰

·實驗研究·

TLC法快速檢測補腎壯陽類中成藥中非法添加酚妥拉明

查登峰

近年來，一些不法分子在補腎壯陽類中成藥中非法添加化學(xué)藥品(如西地那非、他達那非和酚妥拉明等)，夸大療效，給人民群眾的身體健康造成了嚴重危害。本文研究的內(nèi)容是采用TLC法［1］對補腎壯陽類中成藥中非法添加酚妥拉明的快速初篩。

1 儀器、試劑

1.1 儀器 電熱恒溫干燥箱DH64

1.2 試劑 甲醇、乙醇、三氯甲烷和二乙胺等均為分析純

1.3 薄層板 MERCK硅膠G 60鋁基片薄層板20 cm×20 cm

2 樣品、對照品

2.1 樣品 收集了不同的市售補腎壯陽類中成藥膠囊劑9批、片劑2批、丸劑7批、糖漿劑1批和合劑1批，共20批。

2.2 對照品 甲磺酸酚妥拉明(原料藥)。

3 實驗部分

3.1 樣品溶液的制備 片劑、丸劑、膠囊劑:取樣品(一次最大服用量)，研細，加乙醇10 m l，振搖，超聲提取10 min，濾過，即得;合劑、糖漿劑:取樣品(一次最大服用量)蒸干至稠膏狀，加乙醇10 ml，攪拌，超聲提取10 min，濾過，即得。

3.2 陽性樣品溶液的制備 取樣品(一次最大服用量)和甲磺酸酚妥拉明(一次有效劑量:甲磺酸酚妥拉明40 mg)，混合，照樣品溶液的制備法制備。

3.3 提取溶劑的優(yōu)化選擇 文獻報道［1］是以甲醇為溶劑，

考慮到甲醇對人身體有一定的傷害，故在甲醇、乙醇、無水乙醇三種溶劑中做了比較實驗，結(jié)果三種溶劑實驗結(jié)果基本一致。本著安全、環(huán)保及經(jīng)濟的原則，選擇了乙醇作為提取及稀釋的溶劑。

見圖1。T:28℃，R:65%。

3.4 展開劑 選用三氯甲烷-二乙胺-甲醇(15∶3∶2)為展開劑。

3.5 顯色 噴顯色劑(5%鐵氰化鉀溶液與9.5%三氯化鐵溶液，臨用前等量混合)。

3.6 最低檢出限 取甲磺酸酚妥拉明40 mg，加乙醇溶解并稀釋為:5.0 mg/ml、2.5 mg/m l、0.83 mg/m l、0.6 mg/m l、0.5 mg/ml。點樣量:3μl。見圖2。T:28℃，R:65%。

圖2 1、2:甲磺酸酚妥拉明的濃度為5.0 mg/ml;3、4:甲磺酸酚妥拉明的濃度為2.5 mg/ml;5、6:甲磺酸酚妥拉明的濃度為0.83 mg/ml; 7、8:甲磺酸酚妥拉明的濃度為0.6 mg/ml;9、10:甲磺酸酚妥拉明的濃度為0.5 mg/ml。結(jié)果:甲磺酸酚妥拉明的最低檢出限為0.5 mg/ml

圖1 1甲醇2乙醇3無水乙醇

3.7 20批樣品、陽性藥品篩查結(jié)果 見圖3、圖4。T:28℃，R:65%。

3.8 討論

3.8.1 在本文研究中，由于收集的補腎壯陽類中成藥中均不含酚妥拉明，因此，我們以中成藥的一次最大服用量與甲磺酸酚妥拉明的一次有效劑量作為陽性樣品，再分別進行TLC法的研究。

［1］ 美國藥典委員會．美國藥典．2000．

333000景德鎮(zhèn)市第二人民醫(yī)院

圖3

圖4 1～20為陽性樣品，a～t為樣品

結(jié)果 a～t樣品未見疑似斑點，1～20可見清晰的斑點，故可作疑似非法添加進一步確認。

3.8.2 我們試用自制板進行了薄層色譜研究，詳見圖五。效果也很理想。為適應(yīng)快檢需要，我們選用了便于攜帶的高效板。

圖5 甲磺酸酚妥拉明自制板

3.8.3 圖五是按照美國藥典第28版的方法試驗，斑點的顏色呈紅紫色，原因是美國藥典第28版的方法中，薄層板展開、取出、晾干后于100℃干燥1 h再顯色而致。為適應(yīng)快檢，本法進行了簡化，不在100℃干燥1 h即顯色。