左軍 孔繁軍 丁旭
全血或血漿測定dimer的研究
左軍 孔繁軍 丁旭
目的全血或血漿測定dimen的研究。方法目前測定D-二聚體多數(shù)采用109 mmol/L或105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑,全血與抗凝劑的比例為9∶1分離血漿來測定,離心、測試時間長,我們采用瑞萊生物工程(深圳)有限公司提供的ReLIA多功能免疫檢測系統(tǒng)及其試劑,用抗凝全血(105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑)和(EDTA2 k抗凝劑)全血及血漿分別測定D-二聚體。結(jié)果三者結(jié)果有顯著的差異,用105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑全血測定結(jié)果最低。EDTA2 k抗凝劑的全血測定高于前者,而用105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑的血漿結(jié)果最高。結(jié)論用抗凝全血檢測D-二聚體可以作為一種快速篩查手段。
全血D-二聚體ReLIA;免疫檢測
1.1 材料瑞萊生物工程(深圳)有限公司提供的ReLIA多功能免疫檢測系統(tǒng)試劑批號20111001023。凝血常規(guī)檢測抗凝管(105 mmol/L枸櫞酸鈉)、EDTA2K抗凝劑采血管
1.2 方法分別選取30分兩種抗凝全血和105 mmol/L枸櫞酸鈉抗凝血漿來測定第二聚體含量觀察測試結(jié)果
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法使用SPSSl3.0軟件系統(tǒng),兩樣本均數(shù)比較,用配對資料t檢驗(yàn)。
抗凝全血和抗凝血漿檢測D-二聚體兩種方法T=2.8452 (P<0.01)有顯著差異用105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑全血和EDTA2 k抗凝劑的全血兩者比較T=0.7656(P>0.05)無顯著差異。用枸櫞酸鈉作為抗凝劑分離血漿樣本和EDTA2 k抗凝劑的全血兩者比較T=2.2088(P<0.05)顯著差異。見表1。
表1
ReLIA多功能免疫檢測系統(tǒng)采用的是專利雙向免疫測流技術(shù)[1]。人體纖維蛋白溶解系統(tǒng),是人體最重要的抗凝系統(tǒng),對保持血管壁的正常通透性,維持血液流動狀態(tài)和組織修復(fù)起到極為重要的作用,纖溶系統(tǒng)有4個主要成分,纖溶酶原纖溶酶原激活劑(如tpa)纖溶酶和纖溶酶抑制物,當(dāng)血液凝固時,纖維蛋白形成結(jié)塊,tpa激活后,使纖溶酶原轉(zhuǎn)化為纖溶酶,其可以溶解凝血中的纖維蛋白凝塊其降解產(chǎn)物即各種可溶性蛋白片段組成為X-寡聚體、第二聚體、中間片段和片段E.D-二聚體來源于纖溶酶溶解的交聯(lián)纖維蛋白凝塊,因此D-二聚體與靜脈血栓的診斷、肺栓塞、DIC心肌梗死及腦血栓、白血病、妊娠、組織損傷惡性實(shí)體腫瘤、外科手術(shù)以及纖溶亢進(jìn)等多種疾病有著密切的關(guān)系??桌?,木克代斯[2],因此D-二聚體的檢測對臨床有著重要的輔助診斷價值。為了能夠快速檢測D-二聚體含量[3]。夏訊生。我們嘗試用全血法來測定該項(xiàng)目,以便為臨床快速提供參考依據(jù)。
從表中數(shù)據(jù)可以看出105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑的全血結(jié)果最低、EDTA2 k抗凝劑的全血結(jié)果高些,而用105 mmol/L枸櫞酸鈉抗凝血漿結(jié)果最高(其參考值范圍為0-2400 ng/ml)經(jīng)過統(tǒng)計(jì)學(xué)比較三者有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明D-二聚體可以用全血法來檢測,也可以用血漿來檢測,但是全血法的穩(wěn)定性和血漿法比較穩(wěn)定性略差,特別是對于D-二聚體含量較低的樣本檢測結(jié)果不是很理想當(dāng)?shù)陀?0 ng/ml時候不能呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,這可能與全血中的有形成分的干擾有一定的關(guān)系,其正常參考范圍還有待進(jìn)一步的測試統(tǒng)計(jì),但也是某一地域性的范圍,如果作為過篩檢測初步判斷D-二聚體的含量便于臨床快速診斷還是有很大的幫助的。
由于D-二聚體測定方法很多。崔樹明[4],沒有一個統(tǒng)一的或者說一種金方法來衡量,因此其正常參考范圍也由很大區(qū)別,ReLIA法的參考范圍為0-2400 ng/ml很大,而ACL9000則為0-255ng/ml兩種方法無法進(jìn)行比較,這也給臨床診斷帶來一定的差異,對于ReLIA多功能免疫檢測系統(tǒng)測定D-二聚體是一項(xiàng)比較快速(<20 min)簡單的檢測手段,它的優(yōu)勢在于可以用全血來檢測,免去了由于長時間離心而延遲的檢測機(jī)會。盡管全血法檢測D-二聚體還有待進(jìn)一步的探討,但是作為一種快速檢測手段還是值得參考。
[1]瑞萊生物工程(深圳)有限公司試劑儀器使用指南.
[2]卡米拉.木克代斯D-二聚體檢測的意義.血栓與止血,2009,4 (4):100-101.
[3]夏訊生,唐寧,張碧玉,等.D-二聚體兩種定量檢測方法的檢測與評價.血栓與止血,2007,2:82-85.
[4]崔樹明.《醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐》D-二聚體測定及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展,2011,24(8):896-898.
130011長春,一汽總醫(yī)院(吉大四院)檢驗(yàn)科