姜建偉

(三明市藥品檢驗(yàn)所，福建 三明365000)

生力雄丸是由人參、鹿茸、淫羊藿、韭菜子、蛇床子、蜻蜓、蠶蛾、咖啡因、馬錢子(燙)、蟾蜍10味藥材制成的復(fù)方制劑，具有補(bǔ)腎壯陽(yáng)、益髓填精等功效，主要用于腎精虧損、性欲減退、陽(yáng)痿早泄等癥。其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第二十冊(cè)》，但無含量測(cè)定方法。淫羊藿具有補(bǔ)腎陽(yáng)、強(qiáng)筋骨、祛風(fēng)濕的功能［1］，是方中主要藥味，其有效成分是淫羊藿苷［2］。為有效控制其藥品質(zhì)量，本研究采用反相高效液相色譜法測(cè)定淫羊藿苷的含量，不需要復(fù)雜的前處理，方法快速、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)單，可很好地控制制劑的內(nèi)在質(zhì)量。

1 儀器與試藥

安捷倫1100高效液相色譜儀，BP一211D型電子天平，KQ3200DE型數(shù)控超聲波清洗器。淫羊藿苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)為110737－200312);生力雄丸(太極集團(tuán)重慶桐君閣藥廠有限公司，批號(hào)為10050006，10120012、11060007，規(guī)格為0.32 g，素丸);甲醇、乙腈為色譜純，水為純化水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱:島津 Inertsil ODS－SP色譜柱(4.6 mm×250 mm，5 μm);流動(dòng)相:乙腈 － 水 － 磷酸(28∶72∶1)［3］;流速:1.0 mL·min－1;檢測(cè)波長(zhǎng):270 nm;柱溫:40 ℃;進(jìn)樣量:20 μL;理論板數(shù)按淫羊藿苷計(jì)應(yīng)不得低于4 000。

2.2 溶液制備 精密稱取淫羊藿苷對(duì)照品10.75 mg，置25 mL量瓶中，用70%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品貯備液。精密量取對(duì)照品貯備液1 mL，置10 mL量瓶中，用70%甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

取本品20粒，研細(xì)混勻，精密稱取約0.5 g，置錐形瓶中，精密加70%甲醇25 mL，稱定重量，超聲處理30 min，放置至室溫，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

另按處方組成制備缺淫羊藿的陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備陰性對(duì)照溶液。

2 3 方法學(xué)考察 陰性干擾試驗(yàn):精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液及陰性對(duì)照溶液各20 μL，分別注入高效液相色譜儀測(cè)定。陰性對(duì)照溶液色譜圖中，在淫羊藿苷相應(yīng)的保留時(shí)間附近無干擾峰(圖1)。

線性關(guān)系考察:精密量取對(duì)照品貯備液(0.430 0 mg·mL－1)0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0 mL，分別置 10 mL 量瓶中，用70% 甲醇稀釋至刻度，搖勻，各進(jìn)樣20 μL測(cè)定。以峰面積對(duì)進(jìn)樣量進(jìn)行線性回歸，回歸方程為Y=2.117×103X+28.903，r=0.999 9(n=6)。結(jié)果淫羊藿苷進(jìn)樣量的線性范圍為 0.172 0 ～1.720 μg。

圖1 高效液相色譜圖

精密度考察:依法取同一對(duì)照品溶液(43.00 μg·mL－1)連續(xù)進(jìn)樣，峰面積的RSD為0.08%(n=6)，表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一供試品溶液，在 0、1、4、12、24、48、72 h時(shí)分別進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果淫羊藿苷峰面積的RSD為1.5%(n=7)，表明供試品溶液至少在72 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

重復(fù)性試驗(yàn):取同批號(hào)樣品6份，按上述方法制備供試品溶液，進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果淫羊藿苷平均含量是2.86 mg·g－1，RSD為0.85%(n=6)，表明方法重復(fù)性較好。

加樣回收試驗(yàn):取已知含量的樣品適量，精密稱定，分別精密加入淫羊藿苷貯備液 1.0 mL、1.2 mL、1.4 mL，按供試品溶液制備方法制備溶液并依法測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

表1 淫羊藿苷加樣回收試驗(yàn)結(jié)果

2.4 樣品含量測(cè)定 依法對(duì)3批樣品測(cè)定含量。結(jié)果批號(hào)分別為10050006，10120012、11060007的樣品含量分別為2.921 4 mg·g－1，2.861 8 mg·g－1，2.893 6 mg·g－1。

3 討論

用高效液相色譜法測(cè)定淫羊藿苷含量時(shí)，比較了多種比例的流動(dòng)相，結(jié)果以本試驗(yàn)用流動(dòng)相較為理想。用70%甲醇超聲處理30 min后的樣品，過濾后殘?jiān)^續(xù)用70%甲醇超聲10 min提取，同法測(cè)定，結(jié)果幾乎不含淫羊藿苷。用反相高效液相色譜法測(cè)定含量簡(jiǎn)便可靠，淫羊藿苷峰形對(duì)稱，基線分離，陰性無干擾，加樣回收率符合規(guī)定。因此，該法可以用于生力雄丸的含量控制。

［1］肖培根.新編中藥志［M］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2001.

［2］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2010年版(一部)［S］.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010.

［3］黃璐敏.HPLC法測(cè)定補(bǔ)腎強(qiáng)身膠囊中淫羊藿苷的含量［J］.中國(guó)藥事，2005，19(7):429－430.