廣東省韶關市食品藥品檢驗所（512028）何紹萍 陳華龍 羅蔚

磺胺脒片是磺胺類藥，主要用于細菌性痢疾、腸炎等，收載于《衛(wèi)生部藥品標準化學藥品及制劑》第一冊[1]，質量標準中采用永停滴定法測定其含量，其測定結果容易因為人員的操作出現(xiàn)誤差、重現(xiàn)性差。本文采用HPLC法測定磺胺脒片的含量，該方法靈敏度高、專屬性強、重現(xiàn)性好、結果準確，是一種行之有效的檢測方法，值得推廣使用。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 1200型高效液相色譜儀，UV-2550紫外分光光度計（日本島津），XS105DU十萬分之一電子天平（梅特勒托利多儀器有限公司），ZYT-1型自動永停滴定儀。

附表1 加樣回收率試驗結果（n=6）

附表2 含量測定結果（n=3）

1.2 試藥 甲醇：色譜純；水為純化水；其他試劑為分析純；磺胺脒對照品（供含量測定用，規(guī)格：約100mg，批號：100412-200401，中國藥品生物制品檢定所）；磺胺脒片（廣東臺城制藥股份有限公司，規(guī)格：0.5g，批號：20090905、20101205、20110311）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱：依利特Hypersil ODS2（5μm，4.6mm×200mm）；流動相：水-冰醋酸-甲醇（69∶1∶30）；流速：1.0mL/min；檢測波長：263nm；進樣量：20μL；柱溫：25℃。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備 精密稱取磺胺脒對照品11.90mg，置100mL量瓶中，加甲醇適量，振搖使溶解，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得；精密量取10mL，置另一25mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備 取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于磺胺脒50mg），置50ml量瓶中，加甲醇適量，振搖使溶解，加甲醇稀釋至刻度，搖勻；精密量取2mL，置另一50mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.3 方法學驗證

2.3.1 線性關系考察 取上述對照品溶液，分別進樣2，4，8，16，32μL，按上述色譜條件測定，以進樣量（X）對峰面積（Y）進行回歸，得回歸方程Y=25907.452X-1502.657，r=0.9998（n=5）。結果表明，磺胺脒進樣量在0.0952～1.5232μg范圍內與峰面積線性關系良好。

2.3.2 專屬性試驗 分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液各20μL，注入液相色譜儀，測定。色譜圖見附圖。

2.3.3 精密度試驗 精密吸取“2.2.1”中對照品溶液20μL，重復進樣5次，測得磺胺脒峰面積的RSD為0.2%（n=5）。精密度良好。

2.3.4 重復性試驗 取同一批號樣品（批號：20090905）6份，分別按供試品溶液制備方法制備，測定磺胺脒含量，RSD為0.5%（n=6）。

2.3.5 穩(wěn)定性試驗 精密吸取供試品溶液，分別在0，2，4，6，8h進樣20μL，測定磺胺脒峰面積?；前冯叻迕娣e積分值RSD為0.3%（n=5），這表明供試品溶液在8h內穩(wěn)定，說明其穩(wěn)定性良好。

2.3.6 加樣回收率試驗 精密稱取已知含量的樣品（批號：20090905，標示含量97.4%）適量6份，分別精密加入磺胺脒對照品溶液適量，按“2.2.2”項中供試品溶液的制備方法制備，按上述色譜條件測定，計算加樣回收率，結果見附表1。

2.4 樣品含量測定 取3批樣品按供試品溶液制備法制備，并按上述色譜條件測定峰面積，以外標法計算其含量，并將測得結果與原標準（《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準化學藥品及制劑》第一冊）的永停滴定法測定結果進行比較比較，結果見附表2。

3 討論

3.1 HPLC法測定磺胺脒片的含量，簡化了磺胺脒片的含量測定方法。

3.2 檢測波長的選擇 取磺胺脒對照品適量，用甲醇溶解，在200～400nm波長掃描，磺胺脒在202nm與263nm處有均最大吸收，由于202nm已靠近紫外吸收區(qū)的末端，故采用了263nm作為檢測波長。

3.3 流動相的選擇 比較了不同比例的甲醇-水、水-冰醋酸-甲醇、乙腈-0.025mol/L冰醋酸溶液作流動相進行試驗[2][3]，結果表明，以水-冰醋酸-甲醇（69∶1∶30）為流動相磺胺脒的峰形好，保留時間適中，柱效高。

3.4 永停滴定法對儀器的精度要求很高，精度不高則會對檢出限有一定的限制，終點讀數(shù)也會由于人員的操作容易出現(xiàn)誤差，造成重現(xiàn)性差。本文采用HPLC法測定磺胺脒片，方法簡便準確、重現(xiàn)性好。