張文虹 陳秀蘭

湖北省十堰市婦幼保健院檢驗(yàn)科，湖北十堰 442000

目前臨床抗菌藥物的濫用現(xiàn)象十分嚴(yán)重，由此引發(fā)和導(dǎo)致的病原菌株耐藥性增加已經(jīng)成為全球性問題，臨床醫(yī)師及時(shí)了解掌握本院病原菌耐藥性的變化，對(duì)指導(dǎo)臨床合理使用抗生素具有十分重要意義。本研究對(duì)2010年我院微生物實(shí)驗(yàn)室病分離的病原菌構(gòu)成、藥物耐藥率及來(lái)源進(jìn)行了回顧性分析，現(xiàn)總結(jié)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 菌株來(lái)源

2010年1月1日～12月31日我院微生物實(shí)驗(yàn)室共分離病原菌2 294株，去除同一患者相同部位分離的重復(fù)菌株后，共1 891株，其中，住院患者分離1 671株，占88.4%，門診患者分離220株，占11.6%。

1.2 試劑

不同標(biāo)本分離病原菌所需培養(yǎng)基干粉、M-H藥敏瓊脂培養(yǎng)基干粉，為英國(guó)OXOID公司產(chǎn)品，除含萬(wàn)古霉素巧克力平皿及科瑪嘉真菌顯色培養(yǎng)皿外，其他培養(yǎng)基及藥敏培養(yǎng)基自配。細(xì)菌藥敏紙片為英國(guó)OXOID公司產(chǎn)品。

1.3 方法

所有送檢標(biāo)本按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第3版）進(jìn)行分離和鑒定[1]；細(xì)菌藥敏試驗(yàn)采用 CLSI（2009）[2]藥敏紙片擴(kuò)散法。質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC35218、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853。采用 Nitrocephin紙片法（英國(guó)OXOID公司）檢測(cè)是否產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶；肺炎鏈球菌用1 μg苯唑西林藥敏紙片預(yù)測(cè)青霉素是否敏感[2]；青霉素耐藥株用E-test法確證；用CLSI推薦的紙片篩選和酶抑制劑增強(qiáng)紙片確認(rèn)法測(cè)定菌中產(chǎn)ESBLs株。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用WHONET 5.5軟件統(tǒng)計(jì)病原菌和藥敏結(jié)果，描敘性分析病原菌對(duì)不同抗菌藥物的耐藥性。

2 結(jié)果

2.1 病原菌標(biāo)本的來(lái)源

本研究共檢出病原菌1 891株，其中，分離病原菌最多的是痰液標(biāo)本（854株），其次為尿液標(biāo)本（276株）。見表1。

2.2 病原菌的分布情況

我院共分離病原菌1 891株，其中，革蘭陰性桿菌占76.6%，革蘭陽(yáng)性球菌占23.4%，革蘭陰性桿菌中檢出最多的常見病原菌依次為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌；檢出非發(fā)酵菌539株，主要為不動(dòng)桿菌屬（245株）、銅綠假單胞菌（241株）和嗜麥芽窄食單胞菌（62株）；不動(dòng)桿菌屬主要以鮑曼不動(dòng)桿菌為主，共檢出220株，占所有不動(dòng)桿菌屬的89.8%（220/245）。見表2。

表2 病原菌構(gòu)成及分布情況（株）

2.3 常見革蘭陰性桿菌對(duì)各種抗菌藥物的耐藥率

大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs率分別為64.2%、51.8%，但二者對(duì)亞胺培南和美羅培南均無(wú)耐藥。見表3。

2.4 常見革蘭陽(yáng)性球菌對(duì)各種抗菌藥物的耐藥率

我院檢出革蘭陽(yáng)性球菌443株，其中，凝固酶陰性的葡萄球菌（CNS）160株，糞腸球菌48株，肺炎鏈球菌20株，金黃色葡萄球菌共檢出155株，占葡萄球菌屬的49.2%（155/315），其中，抗藥性金黃色葡萄球菌（MRSA）達(dá)73株，占金黃色葡萄球菌的47.1%（73/155）；耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）占 CNS 的 86.2%（138/160）。 見表4。

表3 常見革蘭陰性桿菌對(duì)各種抗菌藥物的耐藥率（%）

3 討論

本研究結(jié)果顯示，革蘭陰性桿菌是2010年十堰地區(qū)感染性疾病的主要致病菌，與王勇等[3]報(bào)道基本一致。革蘭陰性桿菌中檢出最多的是大腸埃希菌，其次為肺炎克雷伯菌，高于張秀珍等[4]的報(bào)道，與本院往年相比，檢出率有逐年增加的趨勢(shì)。腸桿菌科細(xì)菌中，產(chǎn)ESBLs菌株主要為大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌，所有腸桿菌科細(xì)菌除對(duì)碳青霉烯類100%敏感，對(duì)β-內(nèi)酰胺/β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合物和氨基糖苷類90%以上敏感外，對(duì)其他藥物平均耐藥率高達(dá)60%以上，表明碳青霉烯類、β-內(nèi)酰胺/β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合物及氨基糖苷類仍為目前臨床治療腸桿菌科細(xì)菌感染最敏感的藥物。我國(guó)腸桿菌科細(xì)菌產(chǎn)生的ESBLs主要是CTX-M型酶和少量SHV型酶[5]。CTX-M酶主要水解頭孢噻肟，因此，腸桿菌科細(xì)菌對(duì)頭孢噻肟的耐藥率明顯高于頭孢他啶。我院監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢吡肟及氨曲南的耐藥率差異不明顯，推測(cè)可能是其產(chǎn)ESBLs基因型已發(fā)生變化，需進(jìn)一步研究。

表4 常見革蘭陽(yáng)性球菌對(duì)各種抗菌藥物的耐藥率（%）

本研究革蘭陽(yáng)性病原菌中，MRSA占金黃色葡萄球菌的49.2%，低于其他醫(yī)院報(bào)道[6]；MRCNS占CNS的86.2%，與其他醫(yī)院報(bào)道結(jié)果接近[6]。本研究未發(fā)現(xiàn)萬(wàn)古霉素和利奈唑胺耐藥株，無(wú)論是否為MRSA菌株，氯霉素敏感性達(dá)89%以上。提示盡管臨床上極少使用氯霉素，但仍有必要將其作為金葡菌的常規(guī)藥敏。腸球菌屬細(xì)菌主要以糞腸球菌為主，共檢出48株，占腸球菌屬的54.5%（48/88），所有腸球菌均未發(fā)現(xiàn)萬(wàn)古霉素和利奈唑胺耐藥株。鏈球菌屬細(xì)菌主要以肺炎鏈球菌為主，主要分離自嬰兒肺炎痰液標(biāo)本，共檢出20株，占鏈球菌屬的50.0%（20/40），所有鏈球菌屬細(xì)菌對(duì)萬(wàn)古霉素和利奈唑胺100.0%敏感，對(duì)苯唑西林的耐藥率僅為5.0%，對(duì)其他藥物均存在不同程度耐藥。

革蘭陰性桿菌中，本院共檢出220株鮑曼不動(dòng)桿菌，占不動(dòng)桿菌屬的89.8%（220/245），絕大多數(shù)分離自痰液標(biāo)本，且ICU、神經(jīng)外科等使用人工呼吸機(jī)最頻繁的科室分離的菌株數(shù)遠(yuǎn)高于其他科室，推測(cè)人工呼吸機(jī)可能是感染的重要途徑。鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)亞胺培南的耐藥率高達(dá)75.4%，高于近期的文獻(xiàn)報(bào)道[7-8]。

綜上所述，抗生素耐藥性問題已成為全球關(guān)注的焦點(diǎn)，而我國(guó)是世界上濫用抗生素最為嚴(yán)重的國(guó)家之一[9-10]。因此，加強(qiáng)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)，以及時(shí)發(fā)現(xiàn)臨床分離細(xì)菌耐藥性變化的特點(diǎn)；臨床藥師與臨床醫(yī)師應(yīng)密切合作，以指導(dǎo)臨床合理選用抗生素，保障患者健康。

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