徐春華，于力克，張 宇

(南京市胸科醫(yī)院呼吸科，江蘇南京210029)

腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移依賴于腫瘤性的血管生成［1］。血管生成素 －2(angiopoietin-2，Ang-2)是作用強(qiáng)大的促血管生長(zhǎng)因子，可促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞分裂與增殖。越來(lái)越多的資料顯示，血清Ang-2水平升高與多種類型腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后有關(guān)［2－6］。為探討 Ang-2在非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的作用，作者選擇102例NSCLC患者的血清標(biāo)本，對(duì)其Ang-2水平進(jìn)行檢測(cè)，以期探討Ang-2在NSCLC相關(guān)研究中的應(yīng)用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 收集2007年1月至2009年1月在我院住院的患者，所有患者均未接受過(guò)放化療，且臨床資料齊全。102例NSCLC均經(jīng)臨床及病理組織學(xué)確診，男性52例，女性50例;年齡35～78歲;腺癌60例，鱗癌42例;高分化癌14例，中分化癌40例，低分化癌48例;根據(jù)2009年國(guó)際抗癌聯(lián)盟(UICC)修訂的肺癌TNM分期標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ期13例，Ⅱ期30例，Ⅲ期29例，Ⅳ期30例;無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者40例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者62例。其中手術(shù)患者52例，年齡38～74歲;復(fù)發(fā)患者42例，年齡38～71歲。良性肺部疾病組為同期住院患者60例，男性40例，女性20例，年齡33～74歲。健康對(duì)照組90例，均為門(mén)診健康體檢者，男性50例，女性40例，年齡28～69歲。所有NSCLC患者均至少隨訪1 a。

1.2 檢測(cè)方法 清晨空腹抽靜脈血5 mL，室溫下靜置 30 min，3 000 r·min－1離心15 min，分離血清，－70℃保存待測(cè)。Ang-2測(cè)定采用酶聯(lián)免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)法，按照人 Ang檢測(cè)試劑盒(美國(guó)R＆D公司)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。檢測(cè)儀器為美國(guó)Biocell HT2型酶標(biāo)儀。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SSPS 13.0進(jìn)行分析，計(jì)量資料以±s表示，比較采用t檢驗(yàn)或單因素方差分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn) α =0.05。

2 結(jié)果

2.1 各組血清Ang-2水平比較 NSCLC組患者血清Ang-2水平高于良性肺部疾病組和健康對(duì)照組(P均＜0.01);良性肺部疾病組與健康對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見(jiàn)表1。

表1 不同組別患者血清Ang-2水平比較μg·L－1

2.2 NSCLC患者血清Ang-2水平與臨床病理特征的關(guān)系 Ⅲ～Ⅳ期患者血清Ang-2水平高于Ⅰ～Ⅱ期患者;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者;手術(shù)前高于手術(shù)后;復(fù)發(fā)后高于復(fù)發(fā)前;存活期1 a以內(nèi)患者低于存活期1 a及以上患者，各組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＜0.01)。見(jiàn)表2。

3 討論

Ang是1985年由哈佛醫(yī)學(xué)院Fett等首次從人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞培養(yǎng)上清中分離純化得到的一種血管生成因子［7］。目前發(fā)現(xiàn)Ang家族共有4個(gè)亞型，包括 Ang-1、Ang-2、Ang-3和 Ang-4。Ang-2基因位于8p21上，相對(duì)分子質(zhì)量約75×103，全長(zhǎng)496個(gè)氨基酸，含3個(gè)結(jié)構(gòu)域(疏水性分泌信號(hào)肽、N端螺旋卷曲結(jié)構(gòu)域、C端纖維蛋白原樣結(jié)構(gòu)域)，包括9個(gè)外顯子和8個(gè)內(nèi)含子，其中3個(gè)內(nèi)含子插入螺旋區(qū)，1個(gè)內(nèi)含子位于鉸鏈區(qū)，4個(gè)內(nèi)含子分布于纖維蛋白樣區(qū)。腫瘤的形成與轉(zhuǎn)移依賴于新血管的生成，而不同來(lái)源的腫瘤組織及腫瘤細(xì)胞系中均有Ang mRNA的表達(dá)，在腫瘤發(fā)生的不同階段刺激新血管的生成，且腫瘤患者血液中Ang水平的高低與腫瘤的惡性程度密切相關(guān)。Etoh等［8］的研究發(fā)現(xiàn)Ang-2可以通過(guò)誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞蛋白酶的產(chǎn)生促進(jìn)腫瘤血管的形成及腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移。

表2 NSCLC患者血清Ang-2水平與臨床病理特征的關(guān)系μg·L－1

本研究應(yīng)用ELISA法檢測(cè)Ang-2在NSCLC患者血清中的水平，發(fā)現(xiàn)Ang-2在NSCLC患者血清中表達(dá)水平明顯高于良性肺部疾病組或健康對(duì)照組(P均＜0.01)，提示Ang-2與NSCLC的發(fā)生有關(guān)。還發(fā)現(xiàn)男性NSCLC患者血清Ang-2水平高于女性患者，＜60歲患者高于≥60歲患者，但差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＞0.05);對(duì)于不同病理類型和病理分級(jí)NSCLC患者血清Ang-2水平檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，肺鱗癌較肺腺癌高，低分化癌較高 －中分化癌高，但差異亦均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＞0.05)。這表明血清Ang-2水平高低與患者性別、年齡、病理類型及病理分級(jí)無(wú)關(guān)。Ⅲ～Ⅳ期患者血清Ang-2水平明顯高于Ⅰ～Ⅱ期患者，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清Ang-2水平明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者。提示血清Ang-2水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期關(guān)系密切，與文獻(xiàn)［9］報(bào)道一致。由上可推測(cè)，Ang-2的高水平對(duì)評(píng)價(jià)NSCLC的發(fā)生、發(fā)展有一定的價(jià)值。術(shù)前患者血清Ang-2水平高于術(shù)后患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，說(shuō)明手術(shù)可有效清除和降低患者體內(nèi)活性腫瘤細(xì)胞，監(jiān)測(cè)Ang-2水平有助于判斷手術(shù)效果和指導(dǎo)治療。本文對(duì)42例復(fù)發(fā)患者檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，復(fù)發(fā)后患者血清Ang-2水平升高(P＜0.01)，說(shuō)明血清Ang-2水平具有較好的監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)的作用;經(jīng)過(guò)隨訪，我們進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)存活期1 a及以上的患者血清Ang-2水平較存活期1 a以內(nèi)患者低，與有關(guān)研究［10］基本一致。說(shuō)明血清Ang-2水平對(duì)于判定預(yù)后也有一定參考作用。

總之，血清Ang-2水平與腫瘤活動(dòng)度密切相關(guān)，可反映疾病的嚴(yán)重程度，用于判定手術(shù)效果、監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)和評(píng)估預(yù)后等，可給臨床工作者提供多方面參考。

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