劉旭錦

隨著對氧化損傷在慢性乙型病毒性肝炎中作用認(rèn)識的明確，許多自由基清除劑應(yīng)時(shí)而生，并已經(jīng)用于臨床，如還原型谷胱甘肽制劑。本實(shí)驗(yàn)通過檢測慢性乙型病毒性肝炎（CHB）患者血清谷胱甘肽抗氧化系統(tǒng)的濃度，探討相應(yīng)制劑在CHB患者應(yīng)用的合理性，同時(shí)評價(jià)臨床患者應(yīng)用還原型谷胱甘肽（古拉定）后肝功恢復(fù)情況，以指導(dǎo)、協(xié)助CHB的臨床治療。

1 資料和方法

1.1 研究對象 33例均為2011-12～2012-04在山東大學(xué)齊魯醫(yī)院肝病科住院和門診治療的CHB患者。符合2000年第十次全國病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的《病毒性肝炎防治方案》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。所選患者均未患有其它系統(tǒng)疾病。年齡18～55歲，平均（37±9.2）歲。其中男18例，女15例。ALT異常者20例，占60.6%，平均水平為（172.7±100.3）U/L；ALT正常者13例占39.4%，平均水平 （29.7±8.7）U/L。HBeAg陽性者 23例占69.7%，HBeAg陰性者10例占 30.3%。血清HBV DNA陽性者22例占 66.7%，平均值（4±7.4）×106copy/ml。

隨機(jī)選取2012-04住院CHB肝功異?；颊?0例，ALT 平均水平為（361.9±215.3）U/L，AST 平均水平為（160.8±104.5） U/L，分為 2 組，15 例/組，分別給予古拉定1.2 g/d靜脈滴注聯(lián)合甘利欣150 mg/d靜脈滴注治療，及單用甘利欣150 mg/d靜脈滴注治療，用藥7 d后復(fù)測肝功轉(zhuǎn)氨酶水平。

正常對照組（健康志愿者）6名，男、女各3名；年齡22～38歲，平均（29.7±5.8）歲。均為身體健康者，未患有其它系統(tǒng)疾病。正常對照組均進(jìn)行乙肝五項(xiàng)定量、HBV DNA 定量、ALT、AST、BIL、白蛋白、球蛋白等血清學(xué)、病毒學(xué)、生化學(xué)檢查。血清免疫學(xué)檢查均證實(shí)無甲、乙、丙、丁、戊、庚型肝炎病毒、巨細(xì)胞病毒感染證據(jù)，肝功能檢查均為正常。

1.2 方法 血清谷胱甘肽（GSH）測定均采用化學(xué)比色法，測定試劑盒購自南京建成生物工程研究所第一分所，具體步驟按說明書嚴(yán)格執(zhí)行。患者及健康對照組肝功能、ALT、AST、HBeAg由山東大學(xué)齊魯醫(yī)院檢驗(yàn)科生化室檢測。HBV DNA由山東大學(xué)齊魯醫(yī)院基因室檢測。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 各組檢測數(shù)據(jù)采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)分析軟件處理，各組處理數(shù)據(jù)結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，用t檢驗(yàn)分析各組各指標(biāo)的差異。用直線相關(guān)分析分析ALT、HBV DNA與各指標(biāo)之間的關(guān)系。

2 結(jié) 果

CHB 患者組 GSH（275.79±77.92）mg/L；健康對照組GSH （330.71±50.15）mg/L。與健康對照組相比，CHB患者組GSH濃度均明顯降低 （圖1，P=0.015）。在CHB患者中，GSH濃度與ALT水平呈顯著負(fù)相關(guān)（GSH-ALT r=-0.28，P=0.025，圖2）。HBV DNA 陰性組 GSH （290.90±82.99） mg/L，HBV DNA陽性組 GSH（259.16±67.94）mg/L，組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.067）。

圖1 兩組GSH水平

圖2 GHB患者的ALT與GSH的相關(guān)性分析

古拉定聯(lián)合甘利欣治療組患者治療前ALT平均水平為（398.3±153.7） U/L，AST 平均水平為（208±86.0）U/L，治療后 ALT 平均水平為（100.1±53.2）U/L，AST 平均水平為（70.8±32.7）U/L；用甘利欣治療組患者治療前ALT平均水平為（325.6±263.7）U/L，AST 平均水平為（134.5±115.0）U/L，治療后 ALT 平均水平為 （178.2±154.4） U/L，AST 平均水平為（62.6±46.4）U/L；古拉定聯(lián)合甘利欣治療組患者肝功恢復(fù)水平優(yōu)于甘利欣治療組 （ALT P=0.002 AST P=0.033）。

3 討 論

氧自由基參與機(jī)體的細(xì)胞分化生長、免疫及機(jī)體的防御功能（如白細(xì)胞殺菌、殺死腫瘤細(xì)胞等），發(fā)揮重要作用[2-4]，同時(shí)參與了很多疾病的發(fā)生，包括動(dòng)脈粥樣硬化、癌癥、自身免疫性疾病等。研究證實(shí)，CHB的發(fā)病機(jī)制中也有氧化損傷的參與。既往研究指標(biāo)多為丙二醛、黃嘌呤氧化酶等，通過相應(yīng)指標(biāo)的變化，推測氧化損傷的狀態(tài)，而臨床中，多應(yīng)用還原型谷胱甘肽藥物治療，本試驗(yàn)直接測定CHB患者的GSH水平，明確還原型谷胱甘肽應(yīng)用的合理性，及監(jiān)測應(yīng)用古拉定患者肝功恢復(fù)情況。

GSH是目前研究最多的抗氧化酶之一，是組織中主要的非蛋白質(zhì)的巰基化合物，并且能穩(wěn)定含巰基的酶和防止血紅蛋白及其它的輔助因子受氧化損傷，最近還證明GSH也參與使維生素E恢復(fù)到還原狀態(tài)的作用，GSH水平的多少是衡量機(jī)體抗氧化能力大小的重要指標(biāo)。

氧化損傷是氧自由基產(chǎn)生過多，和（或）抗氧化酶產(chǎn)生不足或過多耗竭，因此GSH水平也反映出機(jī)體的氧化還原狀態(tài)。通過測量血清中的GSH含量，即可間接地反映出肝臟中的氧化損傷狀態(tài)和炎癥損傷狀態(tài)。

在本文中，CHB患者組的GSH顯著低于健康對照組，尤其ALT異常的患者。Demirdag等[5]對80例CHB的研究中發(fā)現(xiàn)CHB患者組氧化損傷產(chǎn)物丙二醛較健康對照組顯著增高，且與ALT相關(guān)，與本文結(jié)果基本相符。

在研究中，GSH水平與HBV DNA無關(guān)，分析其由于GSH主要與肝組織炎癥損傷有關(guān)，而肝組織的炎癥損傷與患者自身的病毒載量關(guān)系不大。Ruhl等[6]于2003年報(bào)道的一個(gè)有13 605名入組的大規(guī)模試驗(yàn)中指出未感染病毒性肝炎，僅抗氧化酶下降即可加速或?qū)е赂闻K的損傷，也與本文結(jié)果相符。在已有的文獻(xiàn)中，關(guān)于氧化損傷和HBV DNA相關(guān)性的研究較少，且結(jié)果不盡相同，不僅如此，CHB患者的氧化損傷相關(guān)酶的結(jié)果也不相同，如Saeki等[7]認(rèn)為CHB患者的過氧化氫酶較健康對照組升高，而Demirdag等[8]認(rèn)為CHB患者的過氧化氫酶較健康對照組降低，推測可能與參與試驗(yàn)的CHB患者的HBV基因型不同有關(guān)，氧化損傷和HBV DNA的關(guān)系還需進(jìn)一步研究。

Melhem等[9]的研究提示，抗氧化損傷制劑和抗病毒藥物聯(lián)合應(yīng)用，可以提高慢性丙型肝炎患者抗病毒治療的總體反應(yīng)率。對于CHB患者，在抗病毒治療的基礎(chǔ)上適當(dāng)輔以抗氧化治療是否能夠增加抗病毒治療效果，尚需進(jìn)一步研究。

本文結(jié)果反映出CHB患者GSH過度消耗，存在氧化損傷現(xiàn)象，ALT水平可間接反應(yīng)機(jī)體氧化損傷狀態(tài)。通過本實(shí)驗(yàn)看出，CHB患者應(yīng)用還原型谷胱甘肽藥物治療有據(jù)可依，在實(shí)際臨床應(yīng)用中，還原型谷胱甘肽可促進(jìn)肝功恢復(fù)。

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