夏吉榮，楊雙雙，祝佳麗，張小嬌

（重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗科 400016）

宮頸癌是女性常見的婦科惡性腫瘤之一，其發(fā)病率僅次于乳腺癌，近年來，宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）的發(fā)病率明顯上升，世界范圍內(nèi)每年浸潤性宮頸癌的新發(fā)病例數(shù)約50萬，中國宮頸癌的患病率及病死率約占世界1／3，且具有年輕化趨勢。近年來的研究資料表明，人乳頭瘤病毒（human papilloma virus，HPV）與宮頸癌及其癌前病變的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。文獻(xiàn)報道有99.7%的宮頸癌組織活檢標(biāo)本中可檢測到HPV－DNA，HPV感染已被公認(rèn)為宮頸癌發(fā)生的重要病因［1－3］。了解HPV在不同地區(qū)的流行病學(xué)情況，分析其與宮頸癌和其他婦科疾病的關(guān)系，為宮頸癌高危人群的早診斷、早防治提供重要信息。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對象系2009年6月至2011年7月在本院就診的婦女7 016例，年齡18～83歲。其中343例為明確診斷的宮頸病變患者，分別為：慢性宮頸炎及宮頸良性病變115例，CINⅠ93例，CINⅡ67例，CINⅢ42例，宮頸癌26例。上述疾病為臨床細(xì)胞學(xué)最終診斷。

1.2 主要檢測儀器及試劑 主要檢測儀器：BIO公司S1000聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）擴(kuò)增儀、Hybri－Max醫(yī)用核酸分子快速雜交儀（潮州凱普公司）、高速低溫離心機(jī)（美國Thermo公司）、快速核酸提取儀（北京博奧生物有限公司）等；主要試劑：細(xì)胞提取裂解試劑、HPV PCR試劑，雜交試劑均由潮州凱普生物化學(xué)有限公司提供。

1.3 標(biāo)本采集 由臨床醫(yī)生以窺陰器暴露宮頸，將宮頸刷置于宮頸口，輕輕搓動宮頸刷使其順時針旋轉(zhuǎn)5圈，慢慢取出宮頸刷，將其放入標(biāo)有患者信息的專用取樣管中，擰緊瓶蓋送檢。

1.4 檢測方法 將收集的宮頸細(xì)胞液進(jìn)行濃縮，裂解細(xì)胞后提取DNA，然后將提取的DNA模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，將擴(kuò)增產(chǎn)物解鏈后用核酸分子芯片快速雜交法檢測HPV，結(jié)果判斷按本方法提供的模板進(jìn)行，上述所有過程和結(jié)果判斷嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行。本法檢測HPV共包含3個類別，21個亞型，涵蓋了中國人群感染型的96%以上，分為高危型、低危型和其他型（中國人特有型）。高危型含13種亞型：16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68亞型；低危型含5種亞型：6、11、42、43、44亞型；其他型含3種亞型：53、66、CP8304亞型。

1.5 數(shù)據(jù)收集 對7 016例HPV檢測結(jié)果進(jìn)行感染率、型別分布以及感染率與年齡、感染型別與疾病的相關(guān)性等進(jìn)行分析。

2 結(jié) 果

7 016 例標(biāo)本中HPV檢測陽性者2 357例，陽性率為33.6%；單一高危型陽性1 558例，占感染者的66.1%，以HPV 16、58、52、33、18、31、68亞型為主；高危型合并其他型陽性447例，占感染者的19.0%，以HPV 16、52、58亞型為主；低危型159例，占感染者的6.7%，以HPV 11、6亞型為主；低危型合并其他型陽性23例，占感染者的1.0%，以HPV 6、52亞型為主；其他型170例，占感染者的7.2%，以HPV CP8304和53亞型為主。結(jié)果見表1。不同宮頸病變HPV的感染率見表2。不同宮頸病變HPV感染的主要發(fā)生型別見表3。HPV感染的年齡分布：＞20～60歲HPV－DNA的檢出率為99%，＞40～50歲HPV－DNA的檢出率為35%，＞60歲HPV－DNA的檢出率僅為1%，本組13例超過73歲的患者未檢出HPVDNA，結(jié)果見圖1。

表1 2 357例HPV陽性標(biāo)本主要型別分布

表2 不同宮頸病變HPV感染率

表3 不同宮頸病變HPV感染主要發(fā)生型別

圖1 HPV感染的年齡分布

3 討 論

HPV是一種雙鏈?zhǔn)壬掀ば訢NA病毒，屬于乳多空病毒科，在人和動物中分布廣泛。目前發(fā)現(xiàn)HPV有200多個基因型，約40個型別涉及生殖道感染，近年來大量流行病學(xué)及分子生物學(xué)研究表明，HPV感染與女性宮頸癌及其癌前病變的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。有報道99.7%宮頸癌組織活檢標(biāo)本中可檢測到HPV－DNA［1］，但不同地區(qū)和人群HPV的感染率和型別分布相差較大，感染率為20.7%～58.4%［4－9］。了解本地區(qū)HPV感染情況及型別分布可為本地區(qū)HPV診斷預(yù)測及預(yù)防提供指導(dǎo)信息。

3.1 HPV感染的地區(qū)差異 本調(diào)查中，7 016例患者HPV的總感染率為33.6%，明顯低于國外報道的58.4%［8］和國內(nèi)報道的43.9%［6］，但又明顯比國內(nèi)報告的20.8%高［5］，說明不同區(qū)域HPV感染存在明顯差異，各地區(qū)應(yīng)采取相應(yīng)措施預(yù)防。

各個地區(qū)HPV感染的主要型別也有差異，世界范圍常見的感染亞型為HPV 16亞型［10－16］。本調(diào)查結(jié)果顯示，重慶地區(qū)HPV亞型檢出率前6位的分別是 HPV 16、58、52、33、CP8304及18亞型，其感染率分別為29.1%、10.8%、9.4%、5.8%、4.0%及4.0%，其中以 HPV 16亞型最常見，提示重慶地區(qū)HPV感染高危型以16、58及52亞型為主，低危型以11、6亞型為主，其他型以CP8304亞型為主。不同檢測方法所覆蓋的HPV檢出型別有差異，因此，這為疫苗的研究以及臨床診斷與治療提供了指導(dǎo)方向，也為實驗室檢測方法的選擇及設(shè)計提供參考。

3.2 HPV感染與宮頸疾病的關(guān)系 近年來國內(nèi)、外有關(guān)宮頸癌的病因研究表明，感染高危型HPV與宮頸癌的發(fā)生高度相關(guān)，是宮頸癌的首要病因，相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，HPV（特別是高危型）的持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的重要病因［8－10］。本次調(diào)查的宮頸癌病例以HPV高危型感染為主（92.3%，表3），亞型以16、58、31、33及18亞型為主，其中有42.3%（11／26）的宮頸癌是HPV 16亞型；宮頸炎及其他良性宮頸病變以HPV低危型感染為主（59.3%，表3）。本調(diào)查還發(fā)現(xiàn)，HPV感染與宮頸病變程度呈正相關(guān)，宮頸病變程度越重，HPV的感染率也越高；CIN病變和宮頸癌高危型感染率明顯高于宮頸其他病變（16.7%，表3），說明高危型HPV與宮頸癌以及癌前病變的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。而低危型及其混合感染在宮頸炎及宮頸良性病變中占59.3%，但隨著病變級別的增加，比例逐漸減少，反映出HPV低危型感染一般只引起良性病變。

有研究顯示，在婦女的一生中可重復(fù)感染HPV，也可同時感染多種不同型別的HPV［14］。本文調(diào)查HPV感染者中單一型感染1 887例（81.0%），多重感染470例（19.2%），隨著宮頸病變級別增加，多重感染率也呈增加趨勢，多重感染可能預(yù)示機(jī)體免疫機(jī)制對病毒的清除不全，但未發(fā)現(xiàn)宮頸癌與多重HPV感染有明顯關(guān)系，其機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。

3.3 HPV感染與年齡的關(guān)系 HPV感染與年齡相關(guān)［5］。本研究結(jié)果顯示，重慶地區(qū)HPV感染的年齡段主要在＞20～60歲，發(fā)生率為99%；其中，＞40～50歲為高發(fā)年齡，發(fā)生率為35%，因此應(yīng)對這個年齡段婦女高度重視。

HPV感染與宮頸癌及其前期損害之間有密切的聯(lián)系，從CIN發(fā)展為宮頸癌一般需要10～20年，而HPV反復(fù)和多重感染可能使該病變時間縮短。重慶地區(qū)處于HPV相對高發(fā)區(qū)，因此在婦女中進(jìn)行宮頸HPV篩查是非常必要的，早期篩查、盡早診斷能有效降低宮頸癌的發(fā)病率和病死率。

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