杜冬華，周 靜，王愛華，徐占云

（河北北方學(xué)院動物科技學(xué)院動物醫(yī)學(xué)系，河北張家口075131）

奶牛乳房炎是由各種因素引起的乳房的炎癥，最常見的是由致病微生物感染引起，可分為臨床型乳房炎和隱性乳房炎。特別是隱性乳房炎是目前阻礙奶牛養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展最嚴(yán)重的疾病之一，其發(fā)病率可高達(dá)70%，嚴(yán)重影響奶牛的產(chǎn)奶量及乳品質(zhì)［1］。近幾十年來，對于奶牛乳房炎的防治還是主要依賴抗生素，但抗生素治療存在兩大問題，即耐藥性的產(chǎn)生和乳中抗生素殘留超標(biāo)，嚴(yán)重威脅食品安全和人類健康［2］。中藥治療奶牛乳房炎有諸多優(yōu)勢，如不易產(chǎn)生抗藥性、無殘留或低殘留等，且中藥是純天然物質(zhì)，含有多種生物有效成分，具有藥物、營養(yǎng)劑、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫機(jī)能等多重功能。應(yīng)用中藥治療奶牛乳房炎，并開發(fā)不同組方、不同劑型及通過不同給藥途徑，將具有廣闊的應(yīng)用前景［3－6］。另外，在乳房炎治療方法中，乳房灌注療法操作方便，藥物可直達(dá)患病部位，療效可靠［7－10］。因此，本研究用自擬中藥方劑制備乳房灌注劑，對奶牛隱性乳房炎進(jìn)行療效試驗(yàn)，以指導(dǎo)臨床用藥。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 中藥 本研究所用方劑成分包括黃芪30 g、金銀花30 g、蒲公英30 g、大青葉15 g、瓜蔞15 g、紫花地丁15 g、赤芍15 g、王不留行15 g、青皮15 g、連翹15 g、當(dāng)歸15 g、通草15 g、乳香15 g、甘草10 g，共14味中藥，按配方稱取，經(jīng)粉碎、混勻器混合后裝入塑料袋密封，250 g／袋。

1.1.2 試驗(yàn)用動物 在張家口某奶牛養(yǎng)殖小區(qū)，從中選擇年齡及泌乳期相近的2胎～4胎經(jīng)產(chǎn)奶牛 。用苛性鈉凝乳檢驗(yàn)法和烷基硫酸鹽凝乳試驗(yàn)（CMT）法進(jìn)行篩查［11］，共篩選出68頭隱性乳房炎陽性奶牛（＋、＋＋或＋＋＋），判定標(biāo)準(zhǔn)如下：

CMT法：乳汁無變化，不出現(xiàn)凝塊，判為陰性（－）；出現(xiàn)微量沉淀，不久即有消失的傾向，判為可疑（±）；乳汁部分形成凝膠狀，判為弱陽性（＋）；全部成凝膠狀，回轉(zhuǎn)搖動時凝塊向中央集中，停止搖動時凝塊呈凸凹狀附于皿底，判為陽性（＋＋）；全部呈凝膠狀，回轉(zhuǎn)搖動時凝塊向中央集中，停止搖動仍保持原狀，并固著于皿底，判為強(qiáng)陽性（＋＋＋）。

氫氧化鈉凝乳檢驗(yàn)法：乳汁無變化，不出現(xiàn)凝乳現(xiàn)象判為陰性（－）；乳汁有細(xì)小凝塊出現(xiàn)，判為可疑（±）；出現(xiàn)較大凝塊，乳汁略顯透明，判為弱陽性（＋）；出現(xiàn)大凝塊，用火柴棒攪動時形成絲狀凝結(jié)物，乳汁水樣透明，判為陽性（＋＋）；出現(xiàn)乳白色的大凝塊，或全部凝集成一大塊，判為強(qiáng)陽性（＋＋＋）。

1.2 方法

1.2.1 中藥乳房灌注劑的制備 參照文獻(xiàn)［12］的方法，制備中藥乳房灌注劑，最終生藥濃度為1 g／mL。

1.2.2 試驗(yàn)動物分組 將篩選出的68頭陽性牛隨機(jī)分成3組，1組為中藥乳房灌注治療組，30頭；2組為中藥拌料治療組，30頭；3組為不用藥對照組，8頭，分組情況見表1。在用藥前分別測定30頭牛的初始產(chǎn)奶量，1組擠凈奶后用700 mL／L～750 mL／L酒精棉球消毒乳頭，2次／d，每個乳區(qū)灌注40 mL自制灌注劑，注液后按摩3 min～5 min，使藥物在乳區(qū)內(nèi)均勻擴(kuò)散，促進(jìn)藥液吸收；2組每頭奶牛每天用1袋拌料。治療組和對照組分別在用藥3 d、1周、2周時采集乳汁并用苛性鈉法和CMT法檢測，再次測產(chǎn)奶量，評價各組治療效果。

表1 隱性乳房炎奶牛分組情況Table1 Grouping of recessive mastitis in dairy cows

1.2.3 療效判定標(biāo)準(zhǔn) 治愈：治療后用苛性鈉法和CMT法檢查為陰性。有效：治療后用苛性鈉法和CMT法檢查，陽性反應(yīng)降低1個“＋”以上，有效數(shù)包括治愈數(shù)。無效：治療后用苛性鈉法和CMT法檢查，陽性反應(yīng)與治療前相同、加重（陽性反應(yīng)增加1個"＋"以上）或轉(zhuǎn)為臨床型。

2 結(jié)果

2.1 治療效果

對照組8頭奶牛在試驗(yàn)期間未見好轉(zhuǎn)，并且有5例病情加重。治療組2周時采集乳樣檢查，強(qiáng)陽性反應(yīng)消失，且大多數(shù)奶牛的陽性反應(yīng)降低1個"＋"以上，有的轉(zhuǎn)為可疑或陰性反應(yīng)。其中，拌料口服治療組治愈15例，治愈率為50.00%，有效24例，有效率為80.00%；乳房灌注治療組治愈19例，治愈率為63.33%，有效28例，有效率為93.33%。治療組和對照組經(jīng)卡方檢驗(yàn)差異顯著（P＜0.05），但治療1組和治療2組分別用藥1周和2周時治愈率差異不顯著（P＞0.05）。治療1組用藥3 d和1周時有效率差異顯著（P＜0.05），而治療2組在同一階段有效率差異不顯著，表明達(dá)到同樣的治療效果，通過中藥乳房灌注可縮短療程（表2）。

2.2 對奶牛產(chǎn)奶量的影響

用藥前各組奶牛產(chǎn)奶量雖然有差異，但差異不顯著，且用藥期間對照組產(chǎn)奶量沒有明顯變化。用藥后，隨著藥物逐漸被機(jī)體吸收而發(fā)揮作用，治療組的日增加產(chǎn)奶量比對照組持續(xù)提高，差異顯著（P＜0.05），且乳房灌注治療組療效優(yōu)于拌料治療組，日增加產(chǎn)奶量明顯提高（P＜0.05）（表3）。

表2 中藥方對奶牛隱性乳房炎的治療效果Table2 Curative effect of recessive mastitis in dairy cows by Chinese traditional medicine prescription

表3 中藥方對奶牛產(chǎn)奶量的影響統(tǒng)計表Table3 The effect of Chinese traditional medicine prescription on milk yields（± SD） kg

表3 中藥方對奶牛產(chǎn)奶量的影響統(tǒng)計表Table3 The effect of Chinese traditional medicine prescription on milk yields（± SD） kg

注：采用SPSS 17.0軟件方差分析方法統(tǒng)計，不同字母表示顯著性差異（P＜0.05，n＝30）。Note：Using the duncan′s multiple range test of software SPSS 17.0，values with different letters in the same column indicate significant difference（P＜0.05）.

組別Groups始產(chǎn)奶量Initial yield用藥3 d日增產(chǎn)奶量Yield after three days用藥1周日增產(chǎn)奶量Yield after one week用藥2周日增產(chǎn)奶量Yield after two weeks第1組 First group 21.05±2.08a 0.84±0.42a 1.57±0.19b 2.79±0.36c第2組Second group 20.83±2.90a 0.68±0.38a 1.38±0.27b 2.03±0.23d對照組 Control group 20.63±1.69a 0.76±0.42a 0.51±0.29a －0.47±0.31 a

3 討論

本研究所用中藥方劑為自擬方劑，具有清熱解毒、活絡(luò)通乳等功效。其中，黃芪具有益氣補(bǔ)虛，具有調(diào)節(jié)免疫、抗病毒、抗應(yīng)激、提高中性粒細(xì)胞吞噬能力等作用；蒲公英、金銀花、大青葉、連翹、紫花地丁清熱解毒，具有消炎、抗菌、消腫作用；赤芍、乳香、瓜蔞、當(dāng)歸可活血散瘀、通經(jīng)活絡(luò)；青皮、王不留行、通草可理氣散結(jié)、活絡(luò)下乳；甘草可調(diào)和諸藥，并助黃芪益氣補(bǔ)虛。

本研究采用乳房灌注和拌料兩種途徑治療奶牛隱性乳房炎，取得較好的治療效果，強(qiáng)陽性反應(yīng)消失，大多數(shù)奶牛陽性反應(yīng)減弱，且有部分治愈。其中，拌料治療組治愈15例，治愈率為50.00%，有效24例，有效率為80.00%。乳房灌注治療組治愈19例，治愈率為63.33%，有效28例，有效率為93.33%。治療組和對照組經(jīng)卡方檢驗(yàn)差異顯著（P＜0.05），由表2可知，治療1組用藥3 d和1周時差異顯著，表明達(dá)到同樣的治療效果，通過中藥乳房灌注可縮短療程。但治療1組和治療2組分別用藥1周和2周時治愈率差異不顯著（P＞0.05），隨著用藥期的延長治療效果越來越不明顯，最終有部分奶牛未治愈。這可能與奶牛本身免疫力有關(guān)，同一個養(yǎng)殖場，致病因素同時存在，但有的牛發(fā)病，而有的牛卻不發(fā)病，主要原因就在于奶牛自身免疫力。同時也表明雖然中藥在治療奶牛乳房炎方面有較好療效，是當(dāng)前乳房炎防治熱點(diǎn)，但其治療作用機(jī)理尚不很明確。因此，要達(dá)到更好地治療效果，還需要諸多研究工作，如加強(qiáng)對中藥制劑作用機(jī)理研究、確定活性成分、優(yōu)化處方等。

綜合分析，乳房灌注治療優(yōu)于拌料治療，這對該病的治療有一定指導(dǎo)意義，但同時需要注意，雖然通過乳房灌注治療效果較好，治療時也一定要注意嚴(yán)格消毒，杜絕將細(xì)菌、真菌等引入乳區(qū)造成感染，并且插針時動作要輕柔，以防損傷乳頭孔，使乳頭變硬、變形。

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［11］趙興緒，等.乳房炎的實(shí)驗(yàn)室診斷，獸醫(yī)產(chǎn)科學(xué)實(shí)習(xí)指導(dǎo)［M］.3版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2002：138－140.

［12］中國獸藥典委員會.中國獸藥典：二部［M］.2005年版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2005：附錄10.