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        黑色素瘤抗原A1和A3蛋白在食管鱗癌組織中的表達(dá)及其對預(yù)后的判斷價值

        2012-09-21 12:59:20梁保華開封市第二人民醫(yī)院心胸外科河南開封475002
        中國老年學(xué)雜志 2012年14期
        關(guān)鍵詞:著色鱗癌抗原

        梁保華 (開封市第二人民醫(yī)院心胸外科,河南 開封 475002)

        食管鱗癌發(fā)生與發(fā)展是多因素綜合作用的結(jié)果。近年研究表明食管鱗癌發(fā)生時機體基因和蛋白均出現(xiàn)明顯變化,并調(diào)節(jié)腫瘤發(fā)生發(fā)展〔1〕。黑色素瘤抗原(MAGE)是腫瘤特異性抗原,其編碼的蛋白經(jīng)抗原提呈細(xì)胞加工后,可誘導(dǎo)機體產(chǎn)生殺傷性T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的特異性抗腫瘤免疫應(yīng)答〔1〕。MAGE-A1和-A3是MAGE家庭中最有特征的代表,對多種腫瘤進(jìn)展均有促進(jìn)作用〔2〕。關(guān)于二者在食管鱗癌表達(dá)的關(guān)系尚未見報道。本實驗探討食管鱗癌組織MAGE-A1和-A3表達(dá)關(guān)系,關(guān)注其對判斷預(yù)后的價值。

        1 材料與方法

        1.1 臨床材料 我院2006年1月至2001年12月存檔的食管鱗癌標(biāo)本蠟塊83例為觀察組,年齡46~80(平均56.0)歲,臨床隨訪資料完整,手術(shù)前均未有任何放、化療。同時選取同期病理證實為正常食管黏膜組織52例為對照組,年齡45~79(平均55.6)歲。二組在一般資料的比較中,無明顯差別。隨訪3~60(平均21.2)個月。

        1.2 方法 MAGE-A1和-A3試劑購自武漢博士德生物技術(shù)有限公司,檢測應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)SP法,具體步驟:切片后脫蠟,水化,應(yīng)用3%H2O2去離子水孵育約10 min;經(jīng)高壓修復(fù)后分別滴加MAGE-A1和-A3抗體,4℃過夜,PBS沖洗3次;加入二抗,室溫孵育20 min,PBS沖洗3次;加入辣根酶標(biāo)記的鏈霉卵白素,室溫孵育20~30 min,PBS沖洗3次;DAB顯色;沖洗、復(fù)染、脫水、透明、封片〔3〕。全部過程均由同一病理科的主管技師完成,避免人為誤差,嚴(yán)格質(zhì)控。

        1.3 判定標(biāo)準(zhǔn) MAGE-A1和-A3陽性染色主要位于細(xì)胞質(zhì),均為棕黃色細(xì)顆粒樣著色,于每張切片中均仔細(xì)選擇10個腫瘤細(xì)胞密度高的高倍鏡視野區(qū),根據(jù)染色部位和染色細(xì)胞所占的百分比進(jìn)行綜合評分。不著色0分,著色淡1分,著色深2分;著色細(xì)胞占總計數(shù)細(xì)胞百分率<5%為0分,5% ~25%1分,26% ~50%2分,>50%3分。以每張切片著色強度得分乘以著色細(xì)胞百分率計為最終得分。<2分陰性(-),≥2分陽性。

        1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SAS6.12統(tǒng)計軟件,定性資料比較采用χ2檢驗,并進(jìn)行相關(guān)分析及生存分析。

        2 結(jié)果

        2.1 兩組MAGE-A1和-A3表達(dá)比較 觀察組與對照組MAGE-A1〔68例(81.93%)vs 13例(25.00%)〕和-A3表達(dá)陽性率〔60例(72.29%)vs 16例(30.77%)〕差別顯著(χ2=43.170 2,P<0.000 1;χ2=22.400 8,P<0.000 1)。

        2.2 MAGE-A1和-A3在觀察組中不同臨床特征中表達(dá)比較觀察組中MAGE-A1和-A3表達(dá)與Ki67表達(dá)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期均有密切相關(guān)。見表1。

        表1 MAGE-A1和-A3在觀察組中不同臨床病理特征的表達(dá)〔n(%)〕

        2.3 觀察組MAGE-A1和-A3表達(dá)關(guān)系 線性相關(guān)分析表明,觀察組MAGE-A1和-A3表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.49,P=0.031 1)。

        2.4 食管鱗癌組織中MAGE-A1和-A3與生存的關(guān)系 食管鱗癌MAGE-A1和-A3表達(dá)與預(yù)后相關(guān)(P<0.05),即MAGEA1和-A3高表達(dá)患者預(yù)后差。

        3 討論

        食管鱗癌侵襲和轉(zhuǎn)移是影響生物學(xué)行為最重要的因素〔4〕。但是其具體調(diào)節(jié)機制尚不明確。MAGE-A1和-A3是MAGE家族中最早發(fā)現(xiàn)的基因和蛋白,其編碼的蛋白產(chǎn)物在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)被蛋白水解酶裂解,形成兩個可被遞呈系統(tǒng)識別的與主要組織相容性復(fù)合體(MHC)分子相結(jié)合的肽段〔5〕。在機體中,參與抗腫瘤免疫排斥反應(yīng)的主要角色是T淋巴細(xì)胞,而T淋巴細(xì)胞活化依賴于對腫瘤特異性抗原的識別,MAGE-A3抗原在腫瘤細(xì)胞表面可和MHC類分子特異性結(jié)合成復(fù)合物,被自體抗原識別,誘發(fā)細(xì)胞增殖。但是,腫瘤細(xì)胞有異質(zhì)性,在同一腫瘤內(nèi)部,腫瘤細(xì)胞亞群不同而造成了腫瘤細(xì)胞生物學(xué)特性差異,使各亞群之間在浸潤、轉(zhuǎn)移潛能也有差異。因此,不同個體,不同腫瘤中MAGE-A1和-A3表達(dá)可能差別較大〔6〕。

        本實驗結(jié)果提示腫瘤發(fā)生過程中,MAGE-A1和-A3可能起某種促進(jìn)作用,可影響腫瘤增殖及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移過程,也可能對調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附性的細(xì)胞外基質(zhì)的降解有一定影響,進(jìn)而促進(jìn)腫瘤進(jìn)展〔7〕。由于Ki67表達(dá)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期是食管鱗癌預(yù)后相關(guān)的重要臨床因素,因此兩種蛋白高表達(dá)可能提示腫瘤預(yù)后不良,生存分析結(jié)果直接證實了此結(jié)論。本實驗顯示MAGE-A1和-A3蛋白具有正相關(guān)性,提示MAGE-A1和-A3有協(xié)同正向作用,由于MAGE-A1和-A3屬于同一家族,具有共同結(jié)構(gòu)和位點,因此其對腫瘤增殖及分化調(diào)控作用可能具有相似性,其也可能參與到人們已經(jīng)尋找到的5條以MAGE/抗原基因為基礎(chǔ)的腫瘤免疫治療途徑中,即抗原遞呈途徑、黑色素瘤接種途徑、基因轉(zhuǎn)染途徑、樹突細(xì)胞接種途徑、MAGE抗原肽接種途徑〔8〕,這些通道 MAGE-A1和-A3共同起作用的基礎(chǔ)。MAGE-A1和-A3聯(lián)合檢測為食管鱗癌預(yù)后判斷提供了新的方法,且免疫組化技術(shù)成熟,應(yīng)用簡單,臨床可以開展應(yīng)用。

        1 Metzler P,Mollaoglu N,Schwarz S,et al.MAGE-A as a novel approach in the diagnostic accuracy of oral squamous cell cancer:a case report〔J〕.Head Neck Oncol,2009;16(1):39.

        2 唐 艷,夏大文,李亞榮,等.以MAGE A1-A6亞型基軛mRNA為特異標(biāo)記檢測肺癌細(xì)胞〔J〕.中國老年學(xué)雜志,2008;28(21):2123-5.

        3 李德艷,劉愛東,高 峰.MMP-7和E-cad在胃癌組織中表達(dá)的臨床價值〔J〕.中國老年學(xué)雜志,2011;31(2):185-6.

        4 王 麗,陳奎生.MAGE-A3食管鱗癌組織中的表達(dá)及與預(yù)后的關(guān)系〔J〕.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2009;36(8):3600-1.

        5 吳 晁,陳同鈺,樊祥山,等.食管鱗癌中癌-睪丸抗原NY-ESO-1及MAGE的表達(dá)〔J〕.實用癌癥雜志,2007;22(4):341-3.

        6 李 佳,潘林娜,張志燕,等.MAGE-A1在食管癌中的表達(dá)及其與腫瘤細(xì)胞增殖的關(guān)系〔J〕.世界華人消化雜志,2007;15(7):706-11.

        7 劉愛東,龐久玲,劉士生.胃癌中基質(zhì)金屬蛋白酶-9和CD105表達(dá)關(guān)系的研究〔J〕.中國老年學(xué)雜志,2009;29(7):886-7.

        8 裴 斐,李新明,史火喜,等.黑色素腫瘤抗原基因1、3在直腸癌肝轉(zhuǎn)移組織的表達(dá)〔J〕.咸寧學(xué)院學(xué)報(醫(yī)學(xué)版),2010;24(2):96-8.

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