袁學軍，陳永敢，陳光宙，陳忠蔭，李艷麗

（瓊州學院生物科學與技術學，海南 三亞 572000）

靈芝的生物活性成分十分豐富，豐富的生物活性成分決定了它功能的多樣性[1]。據有關研究表明，目前已分離到靈芝的150余種活性成分，有多糖類、核苷類、生物堿類、氨基酸、蛋白質類、三萜類和礦質元素等[2]，具有抗腫瘤、保肝解毒、預防心血管系統(tǒng)疾病、抗過敏、抗衰老、抗神經衰弱、治療高血壓、慢性支氣管炎、支氣管哮喘等作用[3]。除醫(yī)學外，靈芝在食品、飲品以及保健品產業(yè)都占有一定的市場與地位，具有較高的觀賞價值及經濟價值[4]。靈芝既不同于一般藥物對某種疾病起治療作用，亦不同于一般營養(yǎng)保健食品只對某一方面營養(yǎng)素的不足進行補充和強化，它的獨特之處主要在于它是在整體上雙向調節(jié)人體機能平衡，調動機體內部活力，調節(jié)人體新陳代謝，提高自身免疫能力，促使全部的內臟或器官機能正?；?，從而從根本上達到治病強身保健的目的[3]。

目前，國內外學者已經對藥用靈芝中活性成分進行不同的研究：靈芝活性蛋白[5-8]、靈芝多糖[9-11]、靈芝三萜[12-14]和靈芝酸[15-17]等，到目前為止，還沒有關于不同栽培方式對靈芝活性成分的影響的報道。

1 材料與方法

1.1 材料和藥品

1.1.1 材料

靈芝采收后及時將污物清理干凈，在60℃的條件下在干燥箱內干燥24 h，然后用20目的粉碎機粉碎，最后用帶拉鏈的塑料帶密封備用。

1.1.2 藥品

葡萄糖，廣州化學試劑廠；熊果酸和香草醛，上海晶純試劑有限公司；牛白蛋白、考馬斯亮藍G250，國藥集團化學試劑有限公司；活性炭、蒽酮、三氯甲烷、磷酸、冰乙酸、氯化鈉、硫酸銨、碳酸氫鈉、鹽酸、氫氧化鈉、無水乙醇、硫酸和高氯酸均為分析純。

1.2 方法

1.2.1材料來源

野生靈芝來源于尖峰嶺自然保護區(qū)，栽培用的菌種來源于從尖峰嶺自然保護區(qū)獲得的經過分離出的同一管母種，栽培料用直徑15 cm、長20 cm印度紫檀的木段，發(fā)菌結束后進行不同方式的栽培，其他條件均相同。

1.2.2 測定方法

靈芝多糖的測定參考蒽酮-硫酸法[18]，用葡萄糖做的標準曲線為：y=0.7622x+0.0122，R2=0.998。

靈芝蛋白的測定參考考馬斯亮藍G-250法[18]，用牛血清白蛋白做的標準曲線為：y=0.6643x+0.0009，R2=0.999。

靈芝三萜的測定參考直接光度法測定法[19]，用熊果酸做的標準曲線為：y=0.4144x-0.01，R2=0.9934。

1.3 統(tǒng)計分析

用南京農業(yè)大學王韶華教授發(fā)明的stst軟件進行統(tǒng)計分析。

2 結果與分析

不同栽培方式對靈芝活性成分的影響見表1。

表1 不同栽培方式對靈芝活性成分的影響

從表1可知，靈芝多糖方面，尖峰嶺處理的和野生的相比無顯著性差異，可能是由于菌種來源于同一子實體，前期一個是在實驗室中發(fā)菌，一個是在自然中發(fā)菌，但子實體生長階段條件則基本相同的緣故；其他處理之間均存在顯著性差異，其中椰糠處理的最高，可能是菌絲也能從椰糠中吸收一部分糖分，且椰糠中糖分相對豐富，而太白山處理的多糖含量最低，可能是由于太白山土壤貧瘠造成的，靈芝多糖含量由高到低的順序為椰糠、尖峰嶺、野生、果園、太白山，因此，靈芝多糖的含量與栽培基質有直接關系。

靈芝蛋白方面，尖峰嶺處理的和野生的相比無顯著性差異，造成的原因與多糖相同，其他處理之間均存在顯著性差異，其中椰糠處理的最高，但西校區(qū)處理的最低，這與多糖含量不同。靈芝蛋白含量由高到低的順序為椰糠、尖峰嶺、野生、太白山、果園，因此，靈芝蛋白的含量也與栽培基質有直接關系。

靈芝三萜方面，尖峰嶺處理的和野生的相比無顯著性差異，其他處理之間均存在顯著性差異，其中椰糠處理的最高，西校區(qū)處理的最低，靈芝三萜含量由高到低的順序為椰糠、太白山、野生、尖峰嶺、果園，因此，靈芝蛋白的含量也與栽培基質有直接關系。

3 討論與結論

靈芝多糖、蛋白、三萜類化合物是靈芝中的主要活性物質，也是衡量靈芝質量的重要指標[20]。該研究對同一靈芝菌不同栽培方式的多糖、蛋白和三萜含量進行了比較，結果表明，由于分離的子實體來源于尖峰嶺，前期人工發(fā)菌，出菇返回原生地，出菇條件相同，所以和野生相比，3種活性成分的含量無顯著性差異，但不同處理之間差異性極顯著，這說明產地的子實體活性物質的含量不同，這可能與周圍基質中的養(yǎng)分含量的多少有關。

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