李德維，王長淼

(1.長?？h人民醫(yī)院外科，遼寧大連 116500;2.大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院普外科，遼寧大連 116011)

大承氣湯對急性壞死性胰腺炎腸道推進功能變化的影響

李德維1，王長淼2

(1.長?？h人民醫(yī)院外科，遼寧大連 116500;2.大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院普外科，遼寧大連 116011)

［目的］研究急性壞死性胰腺炎時腸道推進功能變化和大承氣湯的影響。［方法］SD大鼠制成急性壞死性胰腺炎檢測其腸道推進功能的模型，分成假手術(shù)組、模型組、中藥治療組。模型建立48 h后從十二指腸注入熒光標記右旋糖酐10 000，25 min后處死動物，各組檢測10等分段小腸熒光標記物的含量，計算其幾何中心;取盲腸內(nèi)容物進行細菌培養(yǎng)。［結(jié)果］熒光標記物平均幾何中心在小腸的位置，模型組較假手術(shù)組顯著落后(P＜0.01)，中藥治療組較模型組顯著提前(P＜0.01);盲腸內(nèi)容物培養(yǎng)菌量模型組需氧菌總數(shù)和革蘭陰性菌菌數(shù)較假手術(shù)組顯著增加(P＜0.01)，中藥治療組較模型組顯著降低(P＜0.01)。［結(jié)論］急性壞死性胰腺炎腸道推進功能減弱，大承氣湯可明顯的提高腸推進功能。

胰腺炎;急性壞死性;胃腸通過試驗;大承氣湯

急性胰腺炎尤其是急性壞死性胰腺炎時腸道麻痹，腸蠕動減弱，腸道推進功能減弱，隨著病情發(fā)展，引起腹壓增高，是出現(xiàn)腹腔間隙室綜合征主要因素之一［1］，而后者近年來認為是引起急性壞死性胰腺炎死亡的重要原因之一。大承氣湯是《傷寒論》的經(jīng)典處方，具有通里攻下，峻下熱結(jié)的功效，主治陽明腑實證［2］。能促進腸蠕動。大承氣湯治療急性胰腺炎在臨床上取得了顯著的療效。本研究擬觀察急性壞死性胰腺炎腸道推進功能的變化和中藥大承氣湯的影響。

1 材料和方法

1.1 實驗動物

SD大鼠250～350 g，26只，雌雄各半，大連醫(yī)科大學實驗動物中心提供。

1.2 實驗藥品和儀器

?；悄懰徕c(sodium taurockoiate)(包頭生化試劑廠);血瓊脂培養(yǎng)基和伊紅美藍培養(yǎng)基(大連醫(yī)科大學微生態(tài)教研室);熒光標記右旋糖酐(FITC dextran 10000)(美國Sigma Co.);熒光分光光度計(日本島津)。中藥:大承氣湯:大黃:12 g，厚樸:15 g，枳實:12 g，芒硝:9 g。其中大黃后下，芒硝沖服。以水煎制成100%藥液，含生藥1 g/mL。

1.3 急性壞死性胰腺炎(ANP)的模型制備

大鼠術(shù)前12 h禁食不禁水，消毒后腹腔內(nèi)注射無菌2.5%戊巴比妥鈉40 mg/kg，腹部正中切口進腹，于胰膽管肝門端及腸端用絲線及動脈夾阻斷，近端腸4號頭皮針逆行注入2%?；悄懰徕c0.15 mL/100 g，5 min注畢，注畢10 min去除結(jié)扎絲線和動脈夾。假手術(shù)組僅輕輕翻動胰腺，關(guān)腹。

1.4 腸道推進功能的檢測

參照 Miller［3］等的辦法，建立檢測腸道推進功能的模型，在ANP模型制備完畢后，十二指腸細針扎孔，插入直徑0.5 mm細硅膠管，出口端經(jīng)皮下至頸后部穿出皮膚，絲線固定。

取SD大鼠26只，建立ANP檢測推進功能模型，隨機分成3組:模型組(n=11)，中藥治療組(n=9)，假手術(shù)組(n=6)。模型組和假手術(shù)組:手術(shù)后灌服生理鹽水;中藥防治組:手術(shù)后灌服大承氣湯。均3次/d，每次1 mL/100 g體重。

術(shù)后48 h，將0.1 mL 5 mmol/L熒光標記右旋糖酐10000(FITC dextran)通過硅膠管注入十二指腸內(nèi)，隨后注射0.2 mL生理鹽水沖洗，25 min后殺死動物，剖腹，將小腸按長度用絲線結(jié)扎成10等分段，將每段內(nèi)容擠出，并用3 mL pH值為10.3的Tris緩沖液沖洗，內(nèi)容物振蕩搖勻后以1 200 r/min離心5 min，上清液熒光活性用熒光分光光度計測量，右旋糖酐濃度以其熒光活性和已知標準比較決定。腸推進率以熒光標記右旋糖酐在腸段分布的平均幾何中心代表。

1.5 盲腸內(nèi)容物細菌培養(yǎng)

取盲腸內(nèi)容物0.5 g，用稀釋液將其進行10倍系列稀釋，取20 μL不同稀釋倍數(shù)的菌液分別接種于血瓊脂培養(yǎng)基和伊紅美藍培養(yǎng)基中。將培養(yǎng)基于37℃培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24 h。行菌落形態(tài)觀察，革蘭染色確定菌種，計算菌落數(shù)。

1.6 統(tǒng)計學方法

應用SPSS 11.5軟件進行統(tǒng)計分析，計算資料以均數(shù)±標準差表示，比較采用t檢驗，計數(shù)資料以率表示，比較采用卡方檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

模型組死亡3只，中藥治療組死亡2只。

2.1 各組動物腸推進功能的變化

熒光標記物(FITC dextran 10000)注入十二指腸后25 min，各組小腸熒光標記物平均幾何中心位置為模型組:(24.67±4)%處;中藥治療組:(58.33±4)%處;假手術(shù)組:(51.67±4)%處。模型組較假手術(shù)組顯著落后(P＜0.01)，中藥防治組較模型組顯著提前(P ＜0.01)。見圖1。

圖1 各組熒光標記物在小腸10等段分布的百分率Fig 1 The percentage of the fluorescent marker in 10 intestine segments

2.2 各組動物盲腸內(nèi)容物菌量變化

模型組需氧菌總數(shù)和革蘭陰性菌菌數(shù)較假手術(shù)組顯著增加(P＜0.01)，中藥治療組上述菌量較模型組顯著降低(P＜0.01)，見表1。

表1 各組動物盲腸內(nèi)容物菌量表Tab 1 The amount of bacteria in three groups

3 討 論

急性重癥胰腺炎時由于腹膜后大量腹腔積液，引起腸道麻痹，腸蠕動減弱，腸推進功能減弱，腸道擴張，腹腔高壓引起腹腔間隔室綜合征［1］。腹腔高壓可影響心、肺、腎功能。研究表明，嚴重的腹內(nèi)高壓是引起急性重癥胰腺炎死亡的主要原因之一［4］。目前，腹腔間隔室綜合征在急性重癥胰腺炎尤其急性暴發(fā)胰腺炎中的作用日益引起重視。急性重癥胰腺炎所致的腹腔間隔室綜合征(abdominal compartment syndrome，ACS)。ACS分為由胃腸道功能障礙引起的I型ACS(胃腸型)和腹膜腔或腹膜滲出或積液引起的Ⅱ型ACS(積液型)［5］。腹腔積液可以用腹腔灌洗及剖腹手術(shù)引流進行治療，而急性重癥胰腺炎的腸道蠕動減弱，腸道擴張，可持續(xù)很長時間，如果未引起重視或治療不及時，會影響急性重癥胰腺炎的治療效果，有時會引起死亡［6-7］。腹內(nèi)高壓緩解早的病人，臨床愈后比腹內(nèi)高壓緩解晚的病人要好。目前在臨床上應用包括硫酸鎂、中藥通里攻下藥物如大承氣湯進行治療，強調(diào)早期應用［8］。大承氣湯氏《傷寒論》的經(jīng)典處方。具有通里攻下、峻下熱結(jié)、破痞除滿、清熱解濕的作用，主治陽明腑實證。大承氣湯治療急性胰腺炎在臨床上取得了顯著的療效。

本研究發(fā)現(xiàn)熒光標記物(FITC dextran 10000)注入十二指腸后25 min，各組小腸熒光標記物平均幾何中心位置，模型組較假手術(shù)組顯著降低(P＜0.01)，中藥治療組較模型組顯著升高(P＜0.01)，模型組腸推進功能明顯較假手術(shù)組減弱，說明急性壞死性胰腺炎存在著嚴重的腸蠕動減弱，腸推進功能降低現(xiàn)象。而應用中藥大承氣湯后，腸道推進功能明顯較模型組增強，說明大承氣湯具有明顯的增強腸推進功能的作用，對此藥在臨床上應用提供了有力的證據(jù)。

盲腸內(nèi)容物細菌培養(yǎng)顯示:模型組需氧菌總數(shù)和革蘭氏陰性桿菌菌數(shù)較假手術(shù)組顯著增加，而中藥治療組上述菌量顯著降低。說明急性壞死性胰腺炎時，腸推進功能減弱，腸蠕動減弱，腸道需氧菌量尤其是革蘭氏陰性桿菌菌數(shù)增加，易導致內(nèi)毒素血癥及細菌移位。應用中藥大承氣湯之后，腸道需氧菌量尤其是革蘭氏陰性桿菌菌數(shù)明顯降低，說明中藥大承氣湯能夠通過明顯的增強腸推進功能，降低腸道致病菌水平。

本研究證明大承氣湯一方面能夠提高腸推進功能、減輕腹脹、盡早恢復胃腸蠕動、降低腹腔壓力，減輕腹腔間隔室綜合征的危害，另一方面，還能降低腸道內(nèi)腸道需氧菌量尤其是革蘭氏陰性桿菌菌量，縮小內(nèi)毒素池，抑制腸道細菌移位。

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Effect of Da Cheng Qi decoction to the intestinal transtit of acute necrotizing pancreatitis(ANP)in rat

LI De-wei1，WANG Chang-miao2
(1.Department of Surgery，the People＇s Hospital of Changhai，Dalian116500，China;2.Department of General Surgery，the First Affiliated Hospital of Dalian Medical University，Dalian116011，China)

Abstract:［Objective］To investigate the the effect of Da Cheng Qi decoction to the intestinal transtit of acute necrotizing pancreatitis(ANP)in rat.［Methods］The modols of testing the intestinal transit of ANP in rat were established，and SD rat were divided in to sham operation group，model group and treatment group.After 48 hr，F(xiàn)ITC dextran 10000 were injected into the duodenum，25 min later，the levels of FITC dextran 10000 in 10-equal-part-intestine were tested，and the average geometric centre were calculated.［Results］The average geometric center of the fluorescent marker model group than the sham operation group were significantly more backward(P＜0.01)，treatment group compared with the model group significantly more ahead(P＜0.01).Cecal contents of the culture to a significant increase in the total number of bacteria quantity model group aerobic and gram -negative bacteria，bacterial counts than the sham operation group group(P＜0.01)，the treatment group significantly reduced compared with the model group(P＜0.01).［Conclusions］There was decreased intestinal transtit in acute necrotizing pancreatitis.Da Cheng Qi decoction could increased intestinal transit.

Key words:pancreatitis;acute necrotizing;gastrointestinal transit;DaChengQi decoction

R657.5+1;R333.3

A

1671-7295(2012)05-0455-03

2012-01-12;

2012-09-22

李德維(1963-)，男，遼寧大連人，副主任醫(yī)師。E-mail:842824915@qq.com

王長淼，教授，博士。E-mail:wangchangmiaodl@sohu.com