屈新輝 張昆南▲ 王衛(wèi)真 梅海濤 閔生輝 曹文鋒 吳曉牧

1.江西省人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，江西南昌 330006；2.江西省人民醫(yī)院超聲診斷科，江西南昌 330006；3.江西省人民醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科，江西南昌 330006

頸動(dòng)脈粥樣硬化是缺血性腦血管病的主要危險(xiǎn)因素之一[1-2]。 神經(jīng)肽Y（Neuropeptide Y，NPY）是由36個(gè)氨基酸殘基組成的神經(jīng)活性肽，廣泛存在于中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)，通過(guò)血管收縮作用或刺激血小板激活或胰島素抵抗，交感神經(jīng)興奮所產(chǎn)生的NPY可間接促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化形成[3]。本研究觀察了缺血性腦血管病患者血漿NPY水平，分析了NPY與頸動(dòng)脈粥樣硬化的相關(guān)性，旨在探討在缺血性腦血管病中NPY與頸動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系和作用。現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2009年1月～2010年12月于我院神經(jīng)內(nèi)科住院/門診的急性頸動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死患者116例作為急性腦梗死組，其中，男61例，女55例；年齡42～80歲，平均61歲；將同期神經(jīng)內(nèi)科診斷的短暫性腦缺血發(fā)作（TIA）患者48例作為TIA組，其中，男26例，女22例，年齡49～76歲，平均62歲；將同期神經(jīng)內(nèi)科診斷的頸動(dòng)脈粥樣硬化患者92例作為頸動(dòng)脈硬化組，其中，男49例，女43例，年齡52～79歲，平均61歲。另選擇同期在我院正常健康體檢者95例作為對(duì)照組，其中，男 50例，女 45例，年齡 43～75歲，平均62歲，對(duì)照組頸部血管檢查未見(jiàn)異常。所有入選者無(wú)口服他汀類藥物史，近期無(wú)感染病史。四組性別、年齡、吸煙、血脂、糖尿病等臨床資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 神經(jīng)肽Y測(cè)定 清晨空腹取肘靜脈血2 mL，分別注入含40 μL 7.5%EDTA-2Na和 40 μL抑肽酶的抗凝管中混勻，4℃ 3 000 r/min離心10 min，分離血漿，-20℃保存待測(cè)。測(cè)定前將樣本置于室溫下復(fù)融，混勻，再次4℃3 000 r/min離心10 min，取上清液，采用放射免疫法測(cè)定NPY水平。放射免疫試劑盒由北京普爾偉業(yè)生物科技有限公司提供，按說(shuō)明書由專人操作。試劑盒參數(shù)：靈敏度＜33 pg/mL，可測(cè)范圍為33～1 200 pg/mL，批內(nèi)變異系數(shù)＜10%，批間變異系數(shù)＜15%。

1.2.2 頸動(dòng)脈超聲檢測(cè) 采用美國(guó)惠普Sonos Agilent 5500 彩色多普勒超聲診斷儀進(jìn)行頸動(dòng)脈超聲檢測(cè)，使用11-31 線陣探頭，測(cè)量頸總動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度（IMT）：患者取仰臥位，縱向超聲顯像可表現(xiàn)為由相對(duì)較低回聲分隔的兩條平行亮線，兩線間垂直距離即IMT。凍結(jié)頸動(dòng)脈竇以下1 cm圖像，測(cè)量3次IMT值，取3次測(cè)量值的平均值為頸總動(dòng)脈IMT值。

1.3 超聲判斷標(biāo)準(zhǔn)及狹窄程度分級(jí)

以IMT＜1.0 mm為頸動(dòng)脈超聲陰性；IMT≥1.0 mm為頸動(dòng)脈粥樣硬化。管腔狹窄率=[（頸總動(dòng)脈管徑-最小殘存管徑）/頸總動(dòng)脈管徑]×100%。狹窄程度分級(jí)按以下標(biāo)準(zhǔn)：0～49%為輕度狹窄；50%～69%為中度狹窄；70%～99%為重度狹窄；100%為完全閉塞。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 11.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson檢驗(yàn)；以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血漿神經(jīng)肽Y水平比較情況

急性腦梗死組、TIA組、頸動(dòng)脈硬化組患者NPY水平較對(duì)照組明顯升高，差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.01）；急性腦梗死組和TIA組患者NPY水平較頸動(dòng)脈硬化組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；隨著缺血性腦血管病頸動(dòng)脈粥樣硬化程度加重，血漿NPY水平呈現(xiàn)增高趨勢(shì)，頸動(dòng)脈重度狹窄與輕、中度狹窄相比，NPY水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜ 0.05）。 見(jiàn)表1。

2.2 血漿神經(jīng)肽Y水平與各組頸總動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度的相關(guān)性

急性腦梗死組、TIA組、頸動(dòng)脈硬化組頸動(dòng)脈IMT值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0.05）；三組血漿NPY水平與頸總動(dòng)脈IMT值呈正相關(guān)（均P＜0.05）。見(jiàn)表2。

3 討論

NPY是由36個(gè)氨基酸殘基組成的神經(jīng)活性肽，廣泛存在于中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)。NPY主要來(lái)源于交感神經(jīng)，一方面可作為遞質(zhì)或調(diào)質(zhì)，通過(guò)影響心血管中樞神經(jīng)元的活動(dòng)，實(shí)現(xiàn)對(duì)心血管活動(dòng)的調(diào)節(jié)；另一方面可直接或間接作用于血管，影響血管內(nèi)皮的功能和平滑肌細(xì)胞的增殖，對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化形成起著重要作用。研究認(rèn)為，NPY對(duì)血管調(diào)節(jié)的短期效應(yīng)為影響血管的舒縮平衡，長(zhǎng)期效應(yīng)為調(diào)節(jié)血管壁的生長(zhǎng)、增殖和結(jié)構(gòu)重塑。NPY可能影響血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)，調(diào)節(jié)內(nèi)原性血管舒縮，促進(jìn)單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附，刺激血管平滑肌細(xì)胞（VSMC）發(fā)生增殖或肥大，誘導(dǎo)VSMC凋亡基因的表達(dá)。本研究發(fā)現(xiàn)，在缺血性腦血管病中隨著頸動(dòng)脈粥樣硬化程度加重，血漿NPY水平呈現(xiàn)增高趨勢(shì)；頸動(dòng)脈重度狹窄與輕、中度狹窄相比，NPY水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05）；且血漿NPY水平與均頸總動(dòng)脈IMT值呈正相關(guān)關(guān)系（P＜0.05）?？紤]NPY誘導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化形成的機(jī)制如下：①刺激血管平滑肌增生。Pons等[4]在離體實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)，NPY通過(guò)刺激Y1、Y5 受體激活鼠和人的VSMC，促進(jìn)細(xì)胞分裂。②激活血小板（PLT）。血管內(nèi)皮損傷后，PLT聚集黏附，NPY隨之在損傷處堆積，促進(jìn)PLT激活[5]。③NPY介導(dǎo)血管性假性血友病因子（vWF）表達(dá)和血栓形成，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化形成。④刺激免疫復(fù)合物形成，促進(jìn)血管阻塞。NPY一方面通過(guò)激活新生血管內(nèi)膜，加快其形成；另一方面，NPY與血管形成因子一起激活二肽基肽酶Ⅳ （dipeptidyl peptidaseⅣ，DPPⅣ），促進(jìn)NPY轉(zhuǎn)化并參與免疫復(fù)合物的重構(gòu)[6]。透明質(zhì)酸酶免疫染色法已證實(shí)了NPY可促進(jìn)免疫復(fù)合物沉積[7]。因此，血漿中NPY水平可以反映頸動(dòng)脈粥樣硬化的程度。

表1 各組血漿神經(jīng)肽Y水平比較（±s，ng/L）

表1 各組血漿神經(jīng)肽Y水平比較（±s，ng/L）

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.01；與頸動(dòng)脈硬化組比較，△P＜0.05；與同組輕、中度狹窄比較，#P＜0.05

組別例數(shù) 血漿NPY水平急性腦梗死組重度狹窄輕、中度狹窄TIA組重度狹窄輕、中度狹窄頸動(dòng)脈硬化組重度狹窄輕、中度狹窄對(duì)照組116 44 72 48 18 30 92 22 70 95 264.18 ±39.63*△268.32 ±41.52#255.10 ±27.18 261.31 ±38.57*△265.64 ±40.06#244.83 ±26.19 248.14 ±30.42*256.43 ±30.47#240.74 ±25.80 230.35 ±23.19

表2 血漿神經(jīng)肽Y水平與各組頸總動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度的相關(guān)性分析（±s）

表2 血漿神經(jīng)肽Y水平與各組頸總動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度的相關(guān)性分析（±s）

組別例數(shù) 頸總動(dòng)脈IMT值（mm）血漿NPY水平（ng/L） r值 P 值急性腦梗死組TIA組頸動(dòng)脈硬化組116 48 92 1.23 ±0.22 1.21 ±0.20 1.19 ±0.18 264.18 ±39.63 261.31 ±38.57 248.14 ±30.42 0.163 0.245 0.179 0.037 0.046 0.043

在動(dòng)脈粥樣硬化逐漸形成的基礎(chǔ)上，動(dòng)脈內(nèi)膜損傷裂解形成潰瘍后，血小板及纖維素等有形成分黏附、聚集、沉著形成血栓。PLT聚集時(shí)又釋放大量的NPY，血循環(huán)中NPY作用于心腦血管系統(tǒng)，產(chǎn)生收縮效應(yīng)，并作用于中樞系統(tǒng)使心率變緩，血壓下降，減少腦灌注，造成TIA及腦梗死。本研究結(jié)果顯示，缺血性腦血管病（包括急性腦梗死、TIA、頸動(dòng)脈硬化）患者NPY水平明顯較對(duì)照組升高（P＜0.01），急性腦梗死和TIA組血漿NPY水平較單純頸動(dòng)脈硬化組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。提示NPY參與了頸動(dòng)脈粥樣硬化繼發(fā)腦缺血、腦梗死的病理生理過(guò)程，檢測(cè)血漿NPY水平有利于對(duì)腦缺血病情的判斷。

總之，筆者認(rèn)為，檢測(cè)缺血性腦血管病患者血漿NPY水平，可以反映頸動(dòng)脈粥樣硬化的程度，對(duì)探討頸動(dòng)脈粥樣硬化造成缺血性腦血管病的發(fā)病機(jī)制，判斷病情和指導(dǎo)臨床治療提供參考依據(jù)。

[1] Linfante I，Andreone V，Akkawi N，et al.Internal carotid artery stenting in patients over 80 years of age：singlecenter experience and review of the literature[J].J Neuroimaging，2009，19：158-163.

[2] Hunt KJ，Evans GW，F(xiàn)olsom AR，et al.Acoustic shadowing on B-mode ultrasond of the carotid artery predicts ischemic stroke：the Atherosclerosis Risk in Communities（ARIC）study[J].Stroke，2001，32：1120-1126.

[3] Esler M，Kaye D.Sympathetic nervous system activation in essential hypertension，cardiac failure and psychosomatic heartdisease[J].J Cardiovasc Pharmacol，2000，35：1-7.

[4] Pons J，Kitlinska J，Ji H，et al.Neuropeptide Y and vascular growth：role of Y1 and Y5 receptors and adrenergic activation[J].Can J Pharmacol，2003，81：177-185.

[5] Ignarro LJ.Nitric oxide：a unique endogenous signalingmolecule in vascularbiology[J].Biosci Rep，1999，19：51-71.

[6] Ghersi G，Dong H，Goldstein LA，et al.Regulation of fibroblastmigration on collagenousmatrixby a cell surface peptidase complex[J].J Biol Chem，2002，277：29231-29241.

[7] Ward MR，Tsao PS，Agrotis A，et al.Low blood flow after angioplasty augments mechanisms of restenosis：inward vessel remodeling，cellmigration，and activity of genes regulating migration[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol，2001，21：208-213.