傅惠英，張利棕，壽旗揚(yáng)，周衛(wèi)民，屠 玨，陳民利

(1.浙江中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院，杭州 310053;2.浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心，杭州 310053)

中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉小鼠免疫功能調(diào)節(jié)作用的比較

傅惠英1，張利棕2，壽旗揚(yáng)2，周衛(wèi)民2，屠 玨2，陳民利2

(1.浙江中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院，杭州 310053;2.浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心，杭州 310053)

目的 觀察中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉對(duì)小鼠免疫功能的影響。方法 分別給予中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉后，測(cè)定觀察對(duì)小鼠碳粒廓清功能、遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)、溶血素抗體、淋巴細(xì)胞增殖和NK細(xì)胞活性等的影響。結(jié)果 3.0 g/kg中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉可顯著提高小鼠吞噬指數(shù)和半數(shù)溶血值(P＜0.01)、顯著提高T、B淋巴細(xì)胞增殖能力(P＜0.01，P＜0.05)、顯著提高NK細(xì)胞活性(P＜0.05)，0.5～1.5 g/kg中國(guó)被毛孢都能顯著抑制小鼠耳廓腫脹(P＜0.01，P＜0.05)，同時(shí)還能抑制脾臟和胸腺增大(P＜0.01，P＜0.05)。結(jié)論 中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉均具有免疫調(diào)節(jié)作用，而中國(guó)被毛孢免疫抑制及增強(qiáng)天然免疫系統(tǒng)作用要優(yōu)于蝙蝠蛾擬青霉，而對(duì)適應(yīng)性免疫系統(tǒng)增強(qiáng)作用蝙蝠蛾擬青霉優(yōu)于中國(guó)被毛孢。

中國(guó)被毛孢;蝙蝠蛾擬青霉;小鼠;免疫功能調(diào)節(jié)

冬蟲(chóng)夏草(Cordyceps sinensis)是我國(guó)傳統(tǒng)滋補(bǔ)中藥材，但由于價(jià)格的昂貴及野生資源的枯竭，人們逐漸使用人工蟲(chóng)草菌粉來(lái)替代天然冬蟲(chóng)夏草。從上個(gè)世紀(jì)80年代起，我國(guó)研究人員陸續(xù)從天然冬蟲(chóng)夏草中分離到多個(gè)菌種，文獻(xiàn)報(bào)道已有22個(gè)學(xué)名，涉及13個(gè)屬［1］。隨著分子生物學(xué)手段發(fā)展，越來(lái)越多的證據(jù)顯示中國(guó)被毛孢為冬蟲(chóng)夏草的無(wú)性型［2～4］。但楊金玲等［5］發(fā)現(xiàn)冬蟲(chóng)夏草除了中國(guó)被毛孢菌寄生外，還存在著蝙蝠蛾擬青霉等內(nèi)寄生菌，進(jìn)而認(rèn)為冬蟲(chóng)夏草功效可能歸因于中國(guó)被毛孢、蝙蝠蛾擬青霉及其它內(nèi)寄生菌的不同代謝產(chǎn)物共同作用。因此，本文以天然冬蟲(chóng)夏草作對(duì)照，分別觀察中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉對(duì)小鼠免疫功能的影響，比較兩者在調(diào)節(jié)免疫功能方面的差異，為臨床使用提供依據(jù)。

1 材料

1.1 藥物和試劑

1.1.1 藥物:中國(guó)被毛孢(Hirsutella sinensis，HS)，黃色粉末;蝙蝠蛾擬青霉(Paecilomyces hepiali，PH)，黃色粉末，均由杭州泰士生物科技有限公司提供。冬蟲(chóng)夏草(Cordyceps sinensis，CS):產(chǎn)地青海玉樹(shù)，購(gòu)自青海藥材公司，打粉并60目過(guò)篩。以上三種藥物避光干燥、常溫(25℃以下)保存，臨用前用生理鹽水溶解至所需濃度。

1.1.2 印度墨汁(080321，北京中西遠(yuǎn)大);碳酸鈉(051109，上海虹光化工廠);二硝基氟苯(20081011，上?；瘜W(xué)試劑公司);都氏試劑(031114，寧波慈城生化);刀豆素(20071001，sigma);脂多糖(024K4067，sigma);噻唑藍(lán)溶液(27196EJ，sigma);二甲基亞砜(20060607，無(wú)錫海碩生物);YAC－1細(xì)胞(中科院上海細(xì)胞所);綿羊紅細(xì)胞懸液(綿羊外頸靜脈取血，除去纖維蛋白，加入10倍量的保存液);補(bǔ)體(取5只豚鼠全血，分離出血清，將1mL壓積SRBC加入到5mL豚鼠血清中，放4℃冰箱30 min，離心取上清，－70℃保存)。

1.1.2 動(dòng)物:SPF級(jí) ICR小鼠，體重 18～22 g，雄性，210只，SPF級(jí) BALB/c小鼠，體重 18～22 g，雄性，36只，由中國(guó)科學(xué)院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心/上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供［生產(chǎn)許可證:SCXK(滬)2007－0005］。

1.1.3 儀器設(shè)備:半自動(dòng)生化分析儀，荷蘭 Merck Vitalab Micro;FA1004型分析天平，上海天平儀器廠;TG－16型高速冷凍離心機(jī)，上海安亭科技儀器公司;725型－86℃低溫冰箱，美國(guó) FORMA;128C－340型酶標(biāo)儀:奧地利 CliniBio;CB－150型 CO2培養(yǎng)箱:德國(guó)Binder;ZEISS AXIOVERT 200倒置顯微鏡:德國(guó)ZEISS。

1.2 方法［6-8］

1.2.1 對(duì)小鼠體內(nèi)碳粒廓清功能影響:取體重為18～22 g的雄性ICR小鼠70只，按體重隨機(jī)分為7組，即正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、HS低劑組(1.0 g/kgHS)、HS高劑組(3.0 g/kg HS)、PH 低劑組(1.0 g/kg PH)、PH高劑組(3.0 g/kg PH)和 CS組(1.0 g/kg CS)，每組10只，連續(xù)灌胃給藥7 d，每日一次。末次給藥24 h后，除正常對(duì)照組尾靜脈注射生理鹽水，其余各組小鼠尾靜脈注射稀釋4倍的印度墨汁(0.1mL/10g體重)，注入墨汁后 2、10 min，分別從內(nèi)眥靜脈叢取血10 uL，并立即將其加到1mL 0.1%Na2CO3溶液中。在600 nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值。取小鼠肝臟和脾臟，吸干臟器表面血污后稱(chēng)重。計(jì)算吞噬指數(shù) =(體重/肝脾重)×［(logOD2－logOD10)/(T10－t2)］1/3。

1.2.2 對(duì)二硝基氟苯誘導(dǎo)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)影響:取體重為18～22 g的雄性ICR小鼠70只，按體重隨機(jī)分為7組，即正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、HS低劑組(0.5 g/kg HS)、HS高劑組(1.5 g/kg HS)、PH低劑組(0.5 g/kg PH)、PH高劑組(1.5 g/kg PH)和CS組(0.5 g/kg CS)，每組10只，連續(xù)灌胃給藥13 d，每日一次，給藥第7天時(shí)致敏，小鼠腹部皮膚用脫毛(3cm×3cm)，用1%DNFB溶液50 μL均勻涂抹致敏。致敏5 d后，用 DNFB溶液10 μL均勻涂抹于小鼠右耳(兩面)進(jìn)行攻擊，攻擊后24 h頸椎脫臼處死小鼠，剪下左右耳廓。用打孔器取下直徑8mm的耳片，用分析天平精密稱(chēng)重，并計(jì)算耳腫脹度，取脾臟和胸腺，稱(chēng)重計(jì)算脾臟和胸腺指數(shù)。

1.2.3 對(duì)SRBC致小鼠溶血素抗體生成影響:取體重為18～22 g的雄性ICR小鼠70只，按體重隨機(jī)分為7組，即正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、HS低劑組(1.0 g/kg HS)、HS高劑組(3.0 g/kg HS)、PH 低劑組(1.0 g/kg PH)、PH高劑組(3.0 g/kg PH)和 CS組(1.0 g/kg CS)，每組10只，各組分別給予相應(yīng)濃度的相應(yīng)藥物，每日一次，連續(xù)給藥7 d，腹腔注射20%SRBC0.2mL免疫4 d后，小鼠眼眶取血，取血清用SA緩沖液稀釋500倍。將稀釋后的血清1mL置試管內(nèi)，依次加入10%(v/v)SRBC 0.5mL，補(bǔ)體1mL(用SA液按1∶8稀釋)。另設(shè)不加血清的對(duì)照管(以SA液代替)。置37℃恒溫水浴中保溫30 min后，冰浴終止反應(yīng)。2000 r/min離心10 min。取上清液1mL，加都氏試劑 3mL，同時(shí)取 10%(v/v)SRBC 0.25mL加都氏試劑至4mL，充分混勻，放置10 min，于540 nm處以對(duì)照管作空白，分別測(cè)定各管光密度值，計(jì)算樣品管半數(shù)溶血值(HC50)，HC50=(樣品的吸光度值/SRBC半數(shù)溶血時(shí)的吸光度值)×稀釋倍數(shù)。

1.2.4 對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)和NK細(xì)胞活性影響:取體重為18～22 g的雄性BALB/c小鼠36只，按體重隨機(jī)分為6組，即空白對(duì)照組、HS低劑組(1.0 g/kg HS)、HS高劑組(3.0 g/kg HS)、PH 低劑組(1.0 g/kg PH)、PH高劑組(3.0 g/kg PH)和 CS組(1.0 g/kg CS)，每組6只，連續(xù)給藥7 d后，進(jìn)行脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)和NK細(xì)胞活性測(cè)定。

1.2.4.1 脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng):小鼠無(wú)菌取脾于培養(yǎng)基中，搗碎，使細(xì)胞分散均勻，過(guò)濾，離心，去上清，培養(yǎng)液洗滌2次。脾細(xì)胞制成10×106個(gè)/mL，布板:96孔板每孔加細(xì)胞200 μL，每一樣重復(fù)4孔，同時(shí)設(shè)立空白對(duì)照。樣品孔加 ConA2.5 μg/mL或LPS5.0 μg/mL，對(duì)照孔不加，37℃ 5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 72 h。加入 MTT 10 μL，繼續(xù)培養(yǎng) 4 h，棄上清液，加入二甲基亞砜 150 μL，充分振蕩，于 570 nm測(cè)OD值。計(jì)算刺激指數(shù):刺激指數(shù) =加 ConA或LPS細(xì)胞孔的平均OD值÷對(duì)照孔的平均OD值。

1.2.4.2 NK細(xì)胞活性檢測(cè):取 YAC－1靶細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞各100 μL(效靶比50∶1)，加入96孔培養(yǎng)板中;靶細(xì)胞自然釋放孔加靶細(xì)胞和培養(yǎng)液各100 μL，靶細(xì)胞最大釋放孔加靶細(xì)胞和1%NP40各100 μL;設(shè)三個(gè)復(fù)孔，于 37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 h，然后將96孔培養(yǎng)板以1500 r/min離心5 min，每孔吸取上清100 μL置平底96孔培養(yǎng)板中，同時(shí)加入LDH基質(zhì)液100 μL，反應(yīng)3 min，每孔加入1 mol/L的HCl 30μL，在酶標(biāo)儀490 nm處測(cè)定光密度值(OD)。NK細(xì)胞活性(NK cell activity，%)=(ODT－(ODS－ODE))/ODT×100%，ODT:靶細(xì)胞空白光密度值，ODS:樣品光密度值，ODE:效應(yīng)細(xì)胞空白光密度值。

2 結(jié)果

2.1 中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉對(duì)小鼠體內(nèi)碳粒廓清功能影響

由表1可見(jiàn)，與模型對(duì)照組比較，給予3.0 g/kg中國(guó)被毛孢、3.0 g/kg蝙蝠蛾擬青霉和1.0 g/kg冬蟲(chóng)夏草后，小鼠碳粒吞噬指數(shù)均顯著升高(P＜0.05);而1.0 g/kg中國(guó)被毛孢和1.0 g/kg蝙蝠蛾擬青霉有升高小鼠碳粒吞噬指數(shù)的趨勢(shì)，但無(wú)顯著差異(P＞0.05)。

表1 中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉對(duì)小鼠體內(nèi)碳粒廓清功能影響(±s，n=10)Tab.1 The effects in carbon clearance function by HS and PH in mice(±s，n=10)

表1 中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉對(duì)小鼠體內(nèi)碳粒廓清功能影響(±s，n=10)Tab.1 The effects in carbon clearance function by HS and PH in mice(±s，n=10)

注:與正常對(duì)照組比較，ΔP ＜0.05，ΔΔP ＜0.01;與模型對(duì)照組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01Note:compared withnormal control group，ΔP ＜ 0.05，ΔΔP ＜0.01;compared with model control group，*P ＜ 0.05，＊＊P＜0.01

組別/Groups給藥劑量/Drugs吞噬指數(shù)/Phagocytic index正常對(duì)照組 NS20mL/kg 0.680±0.864模型對(duì)照組 NS20mL/kg 3.650±0.257△△HS低劑組 1.0g/kg 3.831±0.318 HS高劑組 3.0 g/kg 3.941±0.213*PH低劑組 1.0 g/kg 3.836±0.405 PH高劑組 3.0 g/kg 3.959±0.229*CS組 1.0g/kg 3.977±0.330*

2.2 中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉對(duì)二硝基氟苯誘導(dǎo)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)影響

由表2可見(jiàn)，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠經(jīng)二硝基氟苯(DNFB)誘導(dǎo)后，耳廓明顯腫脹和脾臟顯著增大(P＜0.01)，胸腺略有增大，但無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。給予不同劑量的中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉后均具有不同程度的抑制小鼠耳廓腫脹、脾臟增大，與模型對(duì)照組比較，1.5 g/kg中國(guó)被毛孢的小鼠耳廓腫脹顯著降低(P＜0.01)，0.5 g/kg中國(guó)被毛孢、0.5－1.5 g/kg蝙蝠蛾擬青霉和0.5 g/kg冬蟲(chóng)夏草對(duì)小鼠耳廓腫脹度均明顯降低(P＜0.05);1.5 g/kg中國(guó)被毛孢、蝙蝠蛾擬青霉和0.5 g/kg冬蟲(chóng)夏草能明顯抑制脾臟增大的作用(P＜0.05)，1.5 g/kg中國(guó)被毛孢高和0.5 g/kg冬蟲(chóng)夏草能顯著抑制胸腺增大的作用(P＜0.01，P＜0.05)。

表2 中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉對(duì)DNFB誘導(dǎo)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)影響(±s，n=10)Tab.2The effects in DNFB－induced delayed type hypersensitivity by HS and PH in mice(±s，n=10)

表2 中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉對(duì)DNFB誘導(dǎo)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)影響(±s，n=10)Tab.2The effects in DNFB－induced delayed type hypersensitivity by HS and PH in mice(±s，n=10)

注:與正常對(duì)照組比較，ΔP ＜0.05，ΔΔP ＜0.01;與模型對(duì)照組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01Note:compared with normal control group，ΔP ＜0.05，ΔΔP ＜ 0.01;compared with model control group，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01.

組別/Groups 給藥劑量/Drugs dose 耳腫脹度/Ear swelling(mg)胸腺系數(shù)/Thymus index(mg/10 g)正常對(duì)照組 NS10mL/kg 0.47±3.50 37.74±7.32 20.65±2.31模型對(duì)照組 NS10mL/kg 28.83±8.37△△ 57.52±9.76△△ 22.04±4.25 HS低劑組 0.5g/kg 20.94±3.59* 50.28±6.04 21.05±3.11 HS高劑組 1.5 g/kg 19.30±4.57＊＊ 46.55±4.69* 17.01±2.37＊＊PH低劑組 0.5 g/kg 21.11±5.77* 51.80±8.34 19.23±5.94 PH高劑組 1.5 g/kg 20.03±6.03* 47.23±11.27* 19.30±5.32 CS組 0.5 g/kg 20.78±5.22* 49.41±4.09* 18.03±2.91脾臟系數(shù)/Spleen index(mg/10 g)*

2.3 中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉對(duì)SRBC致小鼠溶血素抗體生成影響

由表3可見(jiàn)，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組的小鼠半數(shù)溶血值明顯升高(P＜0.01);與模型對(duì)照組比較，3.0 g/kg中國(guó)被毛孢、1～3.0 g/kg蝙蝠蛾擬青霉和1.0 g/kg冬蟲(chóng)夏草均能顯著升高小鼠的半數(shù)溶血值(P＜0.01)，1.0 g/kg中國(guó)被毛孢對(duì)SRBC免疫小鼠的半數(shù)溶血值有明顯升高作用(P＜0.05)。

表3 中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉對(duì)SRBC致小鼠溶血素抗體生成影響(±s，n=10)Tab.3 The effects in SRBC－induced hemolysin antibody by HS and PH in mice(±s，n=10)

表3 中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉對(duì)SRBC致小鼠溶血素抗體生成影響(±s，n=10)Tab.3 The effects in SRBC－induced hemolysin antibody by HS and PH in mice(±s，n=10)

注:與正常對(duì)照組比較，ΔP ＜0.05，ΔΔP ＜0.01;與模型對(duì)照組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01.Note:compared with normal control group，ΔP ＜ 0.05，ΔΔP ＜0.01;compared with model control group，*P ＜ 0.05，＊＊P＜0.01.

組別/Groups 給藥劑量/Drugs dose 半數(shù)溶血值/HC50正常對(duì)照組 NS20mL·kg－1 53.06±1.44模型對(duì)照組 NS20mL·kg－1 309.74 ±38.76△△HS低劑組 1.0 g·kg－1 341.94±29.26*HS 高劑組 3.0 g·kg－1 355.69 ±26.87＊＊PH 低劑組 1.0 g·kg－1 354.84 ±28.66＊＊PH 高劑組 3.0 g·kg－1 363.88 ±14.70＊＊CS 組 1.0 g·kg－1 350.60 ±13.80＊＊

2.4 中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)和NK細(xì)胞活性影響

由表4可見(jiàn)，與空白對(duì)照組比較，中國(guó)被毛孢、蝙蝠蛾擬青霉高劑量(3.0 g/kg)組和擬青霉低(1.0 g/kg)劑量、冬蟲(chóng)夏草組均能顯著提高T淋巴細(xì)胞增殖作用(P＜0.01)，中國(guó)被毛孢低劑量組也能顯著提高T淋巴細(xì)胞增殖作用(P＜0.05)，但作用明顯低于擬青霉低劑組(P＜0.05);中國(guó)被毛孢、擬青霉、冬蟲(chóng)夏草低劑量組還能促進(jìn)B淋巴細(xì)胞增殖作用，而中國(guó)被毛孢低劑量組無(wú)顯著作用。與正常對(duì)照組比較，被毛孢高劑量組(3.0 g/kg)和低劑量(1.0 g/kg)以及冬蟲(chóng)夏草組均能顯著性提高NK細(xì)胞活性(P＜0.05)，被毛孢低劑量(1.0 g/kg)提高NK細(xì)胞活性的作用明顯強(qiáng)于蝙蝠蛾擬青霉低劑量(1.0 g/kg)，蝙蝠蛾擬青霉無(wú)論高、低劑量組對(duì)NK細(xì)胞活性均無(wú)顯著性差異。

表4 中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)和NK細(xì)胞活性影響(±s，n=6)Tab.4The effects in Splenocyte proliferation and NK cell activity by HS and PH in mice(±s，n=6)

表4 中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)和NK細(xì)胞活性影響(±s，n=6)Tab.4The effects in Splenocyte proliferation and NK cell activity by HS and PH in mice(±s，n=6)

注:與空白對(duì)照組比較，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;與 HS低劑組比較，aP＜0.05Note:compared withblank control group，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01;compared with model control group，aP ＜0.05

組別/Groups 給藥劑量/Drugs dose T淋巴細(xì)胞SI值/T lymphocytes SI value NK細(xì)胞活性/NK cell activity(%)空白對(duì)照組 NS20mL/kg 2.355±0.372 1.546±0.309 21.09±4.51 HS低劑組 HS1.0g/kg 2.785±0.404* 1.726±0.184 27.38±4.81*HS高劑組 3.0 g/kg 3.135±0.390＊＊ 1.827±0.136* 27.63±4.88*PH 低劑組 1.0 g/kg1 3.438±0.513＊＊a 1.805±0.135* 21.38±2.44aPH高劑組 3.0 g/kg 3.638±0.824＊＊ 1.906±0.253* 23.54±4.30 CS組 1.0 g/kg 3.311±0.416＊＊ 1.801±0.126* 26.94±5.24 B淋巴細(xì)胞SI值/B lymphocytes SI value*

3 討論

中國(guó)被毛孢菌粉和蝙蝠蛾擬青酶已有很多文獻(xiàn)報(bào)道均有免疫調(diào)節(jié)功能，其增強(qiáng)或抑制作用取決于機(jī)體的生理狀態(tài)，即炎癥跡象的程度，在無(wú)炎癥跡象時(shí)，冬蟲(chóng)夏草促進(jìn)DCs向Th1型免疫，反過(guò)來(lái)，就抑制Th1型超敏反應(yīng)，在一定程度上體現(xiàn)了中醫(yī)藥對(duì)機(jī)體調(diào)控作用的特色［9］。本文通過(guò)免疫藥效功能評(píng)價(jià)體系對(duì)中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉一同進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)作用研究，觀察兩者是否具有差異。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，中國(guó)被毛孢、蝙蝠蛾擬青霉和冬蟲(chóng)夏草均具有免疫調(diào)節(jié)作用，但兩者在作用程強(qiáng)和作用靶向性各有傾向。在免疫增強(qiáng)方面，中國(guó)被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉均可顯著提高小鼠吞噬指數(shù)和半數(shù)溶血值;同時(shí)也均能促進(jìn) T、B淋巴細(xì)胞增殖能力，但蝙蝠蛾擬青霉作用要強(qiáng)于中國(guó)被毛孢;中國(guó)被毛孢還能顯著提高NK細(xì)胞活性，而蝙蝠蛾擬青霉在本研究中未發(fā)現(xiàn)。在免疫抑制方面，中國(guó)被毛孢除能抑制小鼠耳廓腫脹程度外，還能抑制小鼠脾臟和胸腺增大，而蝙蝠蛾擬青酶對(duì)胸腺增大無(wú)作用，中國(guó)被毛孢免疫抑制作用要強(qiáng)于蝙蝠蛾擬青霉。

因此，通過(guò)檢測(cè)中國(guó)被毛孢菌粉和蝙蝠蛾擬青霉菌粉對(duì)先天性免疫系統(tǒng)NK活性、吞噬指數(shù)的影響及對(duì)適應(yīng)性免疫系統(tǒng)細(xì)胞免疫、體液免疫的影響，結(jié)果表明中國(guó)被毛孢、蝙蝠蛾擬青霉均具有免疫調(diào)節(jié)作用，但中國(guó)被毛孢免疫抑制作用及增強(qiáng)天然免疫系統(tǒng)作用要強(qiáng)于蝙蝠蛾擬青霉，而對(duì)適應(yīng)性性免疫系統(tǒng)增強(qiáng)作用蝙蝠蛾擬青霉略強(qiáng)于中國(guó)被毛孢。

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Comparison and Characterization on Immunomodulatory Function of Hirsutella sinensis and Paecilomyces hepiali in Mice

FU Hui－ying1，ZHANG Li－zong2，SHOU Qi－yang2，ZHOU Wei－min2，TU Jue2，CHEN Min－li2
(1.The Second Clinical Medical College，Zhejiang Chinese Medical University，Hangzhou 310053，China;2.Laboratory Animal Research Center，Zhejiang Chinese Medical University.Hangzhou 310053，China)

Objective Compare with the immunomodulatory function by Hirsutella sinensis and Paecilomyces hepiali in vivo.Method After the mice were administrated by Hirsutella sinensis and Paecilomyces hepiali.Observed carbon particle clearance function，delayed type hypersensitivity，hemolytic antibody，lymphocyte proliferation and NK cell activity in mice，and Cordyceps sinensis as a positive control.Result 3.0g/kg Hirsutella sinensis and Paecilomyces hepiali can significantly improve the phagocyte index and half of hemolysis value(P＜0.01).3.0 g/kg Hirsutella sinensis and Paecilomyces hepiali can significantly improve the T，B lymphocyte proliferation(P＜0.01，P＜0.05).3.0 g/kg Hirsutella sinensis can significantly enhance the activity of NK cells(P＜0.05).0.5～1.5 g/kg Hirsutella sinensis can significantly inhibit the ear edema in mice(P＜0.01，P＜0.05)，at the same time 1.5 g/kg Hirsutella sinensis can inhibit the spleen and thymus increases(P＜0.01，P＜0.05).Conclusion Hirsutella sinensis and Paecilomyces hepiali have Immunomodulatory effects.Hirsutella sinensis.The Hirsutella sinensis were better than Paecilomyces hepiali in immunosuppression and enhance the role of the innate immune system.Paecilomyces hepiali were better than the Hirsutellasinensis in enhanced adaptive immune system.

Hirsutella sinensis;Paecilomyces hepiali;Mice;Immunomodulatory function.

R285.5 R332

A

1671－7856(2012)09－0016－05

10.3969.j.issn.1671.7856.2012.009.004

2012－08－25

浙江省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(Y2110727);浙江省中醫(yī)藥科學(xué)研究基金計(jì)劃(2011ZA021)。

傅惠英(1980－)，女，研究方向:中藥藥理學(xué)，E－mail:fhy131@126.com。

壽旗揚(yáng)(1979－)，男，研究方向:中藥藥理與比較醫(yī)學(xué)，E－mail:sqy133@126.com。