王 歡，王躍虎，陳麗娟，龍春林，3*

1中國科學(xué)院昆明植物研究所，昆明 650204;2云南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院，昆明，650201;3中央民族大學(xué)生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院，北京，100081

石蒜屬植物生物堿成分研究進(jìn)展

王 歡1，2，王躍虎1，陳麗娟2，龍春林1，3*

1中國科學(xué)院昆明植物研究所，昆明 650204;2云南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院，昆明，650201;3中央民族大學(xué)生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院，北京，100081

石蒜屬為東亞特有屬。該屬植物富含生物堿，且此類次生代謝產(chǎn)物具有細(xì)胞毒、抗瘧疾、抗病毒以及對乙酰膽堿酯酶的抑制作用等活性。本文概述了該屬中生物堿類成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)、藥理活性及其生源途徑。

石蒜科;石蒜屬;生物堿

石蒜科(Amaryllidaceae)石蒜屬(LycorisHerb.)為東亞特有屬，是一類兼具觀賞價值與藥用價值的經(jīng)濟(jì)植物［1］。該屬植物約有20多種，主要分布于中國和日本，少數(shù)產(chǎn)于緬甸和朝鮮。我國有16種，主要分布在長江以南地區(qū)［2］。民間將其鱗莖搗碎、敷治腫毒［3］。植物化學(xué)成分分析和現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)表明，石蒜屬植物含有多種具有藥理活性的生物堿類次生代謝產(chǎn)物。

1 生物堿類次生代謝產(chǎn)物

國內(nèi)外學(xué)者對石蒜屬的生物堿類成分進(jìn)行了系統(tǒng)性的研究，共從中得到54個生物堿(見表1及圖1)。根據(jù)這些產(chǎn)物結(jié)構(gòu)的不同，可將其劃分為十種骨架類型(圖2):石蒜堿型(Lycorine-type，Ⅰ)，加蘭他敏型(Galanthamine-type，Ⅱ)，文殊蘭堿型(Crinine-type，Ⅲ)，水仙環(huán)素型(Narciclasine-type，Ⅳ)，石蒜寧堿型(Lycorenine-type，Ⅴ)，水仙堿型(Tazettine-type，Ⅵ)，高山網(wǎng)球花堿型(Montanine-type，Ⅶ)，孤挺花定型(Belladine-type，Ⅷ)，雪花吲哚堿型(Galanthindole-type，Ⅸ)和艾斯敏型(Ismine-type，Ⅹ)。

2 藥理活性

石蒜屬生物堿類次生代謝產(chǎn)物具有多種藥理活性，主要為細(xì)胞毒、抗瘧疾以及對乙酰膽堿酯酶(Acetylcholinesterase，AChE)的抑制作用。

2.1 細(xì)胞毒活性

前人對石蒜堿型、加蘭他敏型、文殊蘭堿型、水仙環(huán)素型、石蒜寧堿型、水仙堿型和艾斯敏型生物堿的細(xì)胞毒活性進(jìn)行了研究。結(jié)果表明:石蒜堿(1)和偽石蒜堿(3)對多種癌細(xì)胞系以及人類白血病細(xì)胞系具有較強(qiáng)的抑制活性［4-8］，Lamoral-Theys等研究發(fā)現(xiàn)1通過抑制腫瘤細(xì)胞生長而不是毒殺細(xì)胞發(fā)揮抗腫瘤作用，且對腫瘤細(xì)胞的抑制活性是正常細(xì)胞的15倍［7］;網(wǎng)球花胺(29)不僅對Hela和Vero細(xì)胞系具有較強(qiáng)的抑制活性［4，5］，其濃度為10 μM時也能夠誘導(dǎo)人 T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞株(Jurkat cells)凋亡且對健康細(xì)胞無毒害［9］;石蒜西定(32)和水仙環(huán)素(33)對60多種人類腫瘤細(xì)胞具有強(qiáng)烈的抑制活性，其IC50為0.01～0.41 μM［4，5，10，11］;高石蒜堿(40)對鼠癌細(xì)胞系(L5178)具有弱的活性(IC50=28.5 μM)，但能夠提高阿霉素的抗腫瘤活性(Fix為0.63±0.05)［12］;小星蒜堿(43)不僅對Hela和Vero細(xì)胞系具有較強(qiáng)的抑制活性，還可以抑制膠原蛋白Ⅰ的侵染［4，5］;漳州水仙堿(46)對人類癌細(xì)胞系(MCF-7，HeLa和A431)以及鼠淋巴瘤細(xì)胞系(L5178)具有強(qiáng)烈的抗增殖活性(IC50為0.8～8.8 μM)［12］;而加蘭他敏型［6］、石蒜寧堿型［4，5］和艾斯敏型［12］生物堿的細(xì)胞毒活性較差。

表1 石蒜屬植物生物堿成分Table 1 Alkaloids fromLycoris

30 11-Hydroxyvittatine(O-Demethylhaemanthamine) Ⅲ L.squamigera［43］31 Vittatine(維他廷;Crinine，文殊蘭堿) Ⅲ L.radiata［38，41，49］;L.guangxiensis［36］32 Lycoricidine(石蒜西定) Ⅳ L.radiata［22，24］;L.sanguinea［48］;L.squamigera［43］;L.traubii［16］33 Narciclasine(水仙環(huán)素;Lycoricidinol，石蒜西定醇) Ⅳ L.chinensis［35］;L.radiata［22，24］;L.sanguinea［48］;L.squamigera［43］;L.traubii［16］34 Arolycoricidine Ⅳ L.sanguinea［48］35 Arolycoricidinol(Narciprimine，水仙明) Ⅳ L.sanguinea［48］36 Lycorenine(石蒜倫堿，石蒜寧堿) Ⅴ L.albiflora［32］;L.radiata［40］37 O-Methyllycorenine Ⅴ L.aurea［30］;L.radiata［24，41］38 O-Methyllycorenine N-oxide Ⅴ L.radiata［41］39 Radiatine Ⅴ L.radiata［50］40 Homolycorine(高石蒜堿;Narcipoetine) Ⅴ L.aurea［30］;L.radiata［38，40，41］;L.albiflora［32］41 9-Demethylhomolycorine Ⅴ L.radiata［24，40，41］42 Homolycorine N-oxide Ⅴ L.radiata［41］43 Hippeastrine(小星蒜堿) Ⅴ L.aurea［30］;L.radiata［24，38，40，41］44 Hippeastrine N-oxide Ⅴ L.radiata［41］45 Tazettine(水仙堿) Ⅵ L.aurea［34］;L.radiata［38，41］;L.sanguinea［48］;L.squamigera［43］46 Pretazettine(漳州水仙堿) Ⅵ L.radiata［39，40］47 8-O-Methylpretazettine Ⅵ L.squamigera［43］48 3-O-Ethyltazettinol Ⅵ L.aurea［51］49 Squamigine Ⅶ L.squamigera［43］50 Montanine(山小星蒜堿) Ⅶ L.squamigera［43］51 2R-Hydroxy-O，N-dimethylnorbelladine Ⅷ L.squamigera［43］52 Lycosinine A Ⅸ L.aurea［30］53 Lycosinine B Ⅸ L.aurea［30］54 Ismine(艾斯敏) Ⅹ L.squamigera［43］

2.2 乙酰膽堿酯酶(AChE)抑制活性

加蘭他敏(15)對AChE具有長期的競爭性可逆抑制作用(IC50= 1.9 μM)［13］，對老年性癡呆(Alzheimer's disease，AD)具有特殊的療效，其鹽酸鹽Reminyl?已批準(zhǔn)用于治療中早期的老年癡呆癥［14］。López等對隸屬于石蒜堿型、石蒜寧堿型、文殊蘭堿型、加蘭他敏型以及水仙堿型的22個生物堿進(jìn)行體外AChE抑制活性篩選，結(jié)果表明僅屬于石蒜堿型和加蘭他敏型的生物堿顯示有活性，其中Sanguinine(17)的活性是陽性對照加蘭他敏的十倍［15］。

2.3 抗瘧疾活性

體外實(shí)驗(yàn)表明，LT1(2)具有顯著的抗瘧疾活性，對惡性瘧原蟲(Plasmodium falciparum)K1和FCR3株系的IC50值分別為0.60 μg/mL和0.45 μg/ mL，選擇指數(shù)(SI)分別為13.5和18.0［16］。Sener等對石蒜堿型、文殊蘭堿型、水仙堿型和加蘭他敏型生物堿的抗瘧疾活性進(jìn)行了評價，石蒜堿(1)和網(wǎng)球花胺(29)對惡性瘧原蟲(P.falciparum)T9.96和K1株系的活性最高，其IC50值為0.38～1.03 μg/ mL;除加蘭他敏(15)外，其它生物堿的活性均高于陽性對照氯喹(IC50=6.06 μg/mL)和甲氟喹(IC50=3.94 μg/mL)［17］。Campbell等的研究也證實(shí)石蒜堿(1)具有很好的抗瘧疾活性［18］。

2.4 作用于心血管系統(tǒng)

Schmeda-Hirschmann等研究了隸屬于石蒜堿型、石蒜寧堿型、加蘭他敏型和文殊蘭堿型的20個生物堿對正常小鼠血壓的影響。在15 mg/kg的劑量下，加蘭他敏(15)、石蒜寧堿(36)、高石蒜堿(40)、9-O-去甲高石蒜堿(41)和艾斯敏(54)對血壓的降低率超過20%，持續(xù)時間為2.0～36.0 min［19］。

2.5 抗病毒活性

Szlávik等研究了石蒜堿(1)、網(wǎng)球花定(28)、網(wǎng)球花胺(29)、高石蒜堿(40)和水仙堿(45)對反轉(zhuǎn)錄病毒HIV的抑制活性，結(jié)果表明1、29和40具有較強(qiáng)的抗反轉(zhuǎn)錄病毒活性(TC50=0.75～1.0 μg/mL; ID50=0.4～7.3 μg/mL)，但治療指數(shù)較低(TI50= 1.3～1.9);而28和45沒有活性［20］。Li等的研究證實(shí)石蒜堿(1)對SARS冠狀病毒有很好的活性，其EC50為15.7±1.2 nM，CC50為14980.0±912.0 nM，選擇指數(shù)(SI)高達(dá)900［21］。

2.6 植物生長調(diào)節(jié)劑

Okamoto等研究發(fā)現(xiàn)石蒜(L.radiata)的甲醇提取物對燕麥生長和水稻種子的萌發(fā)具有強(qiáng)烈的抑制作用，并從中分離得到石蒜西定(32)和水仙環(huán)素(33);這兩個生物堿在濃度大于1 ppm時對燕麥生長和水稻的萌發(fā)具有抑制作用，并強(qiáng)烈抑制煙草愈傷組織的分化［22］。Iqbal等發(fā)現(xiàn)石蒜堿(1)作為化感物質(zhì)對周圍植物的生長具有抑制作用［23］。

2.7 昆蟲拒食活性

Numata等研究表明石蒜堿(1)和9-O-去甲高石蒜堿(41)對Eurema hecabe mandarina的幼蟲具有較強(qiáng)的拒食活性，濃度為0.05%時進(jìn)食率小于30%;石蒜寧堿(36)、6-O-甲基石蒜寧堿(37)和小星蒜堿(43)具有微弱的拒食活性［24］。

2.8 其它活性

Toriizuka等研究發(fā)現(xiàn) LT1(2)具有殺錐體蟲(Trypanosoma brucei)的活性，其 IC50值為1.9 μg/ mL，選擇指數(shù)(SI)為4.3［16］。Evidente等的研究表明水仙環(huán)素(33)對抗壞血酸(Ascorbic acid，AA)的生物合成具有強(qiáng)烈的抑制活性，當(dāng)其濃度為5 μM時抑制率為100%;石蒜堿(1)對AA的生物合成具有一定的抑制活性，當(dāng)其濃度為20 μM時抑制率為88%［25］。McNulty等研究了天然和半合成石蒜屬生物堿對細(xì)胞色素酶CYP450 3A4的抑制活性，結(jié)果表明加蘭他敏(15)和水仙環(huán)素(33)在低濃度(0.21～0.63 μM)時即對CYP450 3A4有抑制活性［26］。

3 生源途徑

從石蒜屬植物中已分離得到的10種骨架類型均是由苯丙氨酸和酪氨酸的代謝產(chǎn)物經(jīng)過一系列的生物化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的［27］。2，3-二羥基苯甲醛與酪胺縮合生成孤挺花定型生物堿去甲孤挺花定(Norbelladine)，在兒茶酚O-甲基轉(zhuǎn)移酶的作用下，由S-腺苷甲硫氨酸(SAM)提供甲基生成4'-O-methylnorbelladine，再以之為前體進(jìn)行酚-酚偶聯(lián)生成各類石蒜屬生物堿(圖3)［28］。A為對-鄰位(para-ortho')偶聯(lián)，之后由N原子提供電子形成石蒜堿型［28］;隨后，C-6與N原子斷開形成雪花吲哚堿型［29］，C-6再通過O原子與C-1相連則形成石蒜寧堿型［30］;B為對-對位(para-para')偶聯(lián)，經(jīng)N原子提供電子形成文殊蘭堿型［28］;隨后，失去C-11和C-12生成水仙環(huán)素型［11，29］，進(jìn)而C-6與N原子斷裂形成艾斯敏型;文殊蘭堿型的C-6與N斷開再通過O與C-11相連形成水仙堿型［31］。C為鄰-對(ortho-para')偶聯(lián)，經(jīng)氧化、親核攻擊和還原等反應(yīng)生成加蘭他敏型［28］。在D中4'-O-methylnorbelladine經(jīng)車瑞靈型(Cheryline-type)轉(zhuǎn)化為高山網(wǎng)球花堿型［29］。因此，石蒜屬生物堿具有相同的起源，其間生源關(guān)系如圖3所示。

4 展望

國內(nèi)外學(xué)者對石蒜屬植物中的生物堿成分進(jìn)行了大量的研究，但仍不全面有待進(jìn)一步研究。我國石蒜屬植物資源豐富，應(yīng)充分利用其資源優(yōu)勢從中尋求新的抗癌、抗病毒、抗瘧疾以及能夠治療AD的藥物或前導(dǎo)藥物;同時，深入了解石蒜屬生物堿的生物合成途徑，通過代謝工程提高藥效成分含量降低成本，從而推動我國該領(lǐng)域制藥業(yè)的蓬勃發(fā)展。

圖3 石蒜屬植物生物堿成分的可能生源途徑［28-31］Fig.3 Proposed biosynthetic pathways for theLycorisalkaloids

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Research Progress of Alkaloids from Lycoris

WANG Huan1，2，WANG Yue-hu1，CHEN Li-juan2，LONG Chun-lin1，3*

1Kunming Institute of Botany，Chinese Academy of Sciences，Kunming 650204，China;2College of Agronomy and Biotechnology，Yunnan Agricultural University，Kunming 650201，China;3College of Life and Environmental Sciences，Minzu University of China，Beijing 100081，China

Lycorisis an endemic genus to East Asia.The genus is rich in alkaoids，and these secondary metabolites have cytotoxic，antimalarial，antiviral，anticholinesterase，and other activities.In this paper，chemical structures，pharmacological activities，and biogenesis of alkaloids fromLycorishave been discussed.

Amaryllidaceae;Lycoris;Alkaloid

R282.71

A

1001-6880(2012)05-0691-08

2010-07-05 接受日期:2010-08-25

*通訊作者 E-mail:long@mail.kib.ac.cn