董昕欣，顧小雪

（中國動物疫病預(yù)防控制中心，北京 100125）

借助農(nóng)業(yè)部“中加動物健康推廣服務(wù)項目工作計劃”項目的支持，赴加拿大對2個加拿大食品檢驗署（Canada Food Inspection Agency，CFIA）實驗室，2個省級動物衛(wèi)生實驗室（Animal Health Lab，AHL），1個省級疾控中心實驗室，1個醫(yī)院微生物實驗室的職業(yè)健康與安全，實驗室質(zhì)量管理、信息管理等內(nèi)容與各類實驗室在疫病防控中發(fā)揮的作用進(jìn)行了考察。

1 加拿大獸醫(yī)實驗室工作概況

加拿大實行中央垂直和省以下垂直相結(jié)合的獸醫(yī)管理體制，因此政府部門的獸醫(yī)實驗室也可分為聯(lián)邦（中央）級與省級（及以下）兩類。前者直接由聯(lián)邦政府垂直管理，后者則歸口各省農(nóng)業(yè)廳管理。

1.1 聯(lián)邦獸醫(yī)實驗室

聯(lián)邦獸醫(yī)實驗室均由加拿大食品檢驗署（CFIA）統(tǒng)一管理。CFIA隸屬于加拿大農(nóng)業(yè)和農(nóng)業(yè)食品部，是監(jiān)管全國食品、動物和植物衛(wèi)生和安全的聯(lián)邦行政機(jī)構(gòu)。其內(nèi)部組織機(jī)構(gòu)分為運(yùn)營、項目與政策、人力資源、法人服務(wù)和科學(xué)等5個部門（圖1）。CFIA的實驗室均隸屬于其組織架構(gòu)中的科學(xué)部門，它們主要負(fù)責(zé)實驗室分析、實驗方法研發(fā)、風(fēng)險評估、研究以及提供專業(yè)意見。

CFIA實驗室現(xiàn)有900名員工，包括300名專業(yè)工作者和50名研究科學(xué)家。共有14個實驗室，分布在西部、安大略、魁北克、大西洋4個區(qū)域，其中5個為獸醫(yī)實驗室，分別是安大略省渥太華的動物疫病研究所、馬尼托巴省溫尼伯格的加拿大人類和動物健康科學(xué)中心、阿爾伯塔省萊斯布里奇的動物疫病研究所、薩斯喀徹溫省薩斯卡通的動物衛(wèi)生實驗室、魁北克省的動物和食品衛(wèi)生實驗室?？疾旖M參觀了前2個實驗室。

1.1.1 渥太華實驗室

安大略省的動物疫病研究所共有禽病中心、布病中心、種質(zhì)中心、肺結(jié)核病中心、狂犬病中心、傳染性海綿狀腦病中心（CWD和羊癢?。⑸镏破吩u估中心和植物中心等8個研究中心，其中布病和羊癢病為OIE參考實驗室。該實驗室主要從事加拿大本國已有動物疫病的診斷與研究。

1.1.2 溫尼伯格實驗室

馬尼托巴省溫尼伯格的加拿大人類和動物健康科學(xué)中心由加拿大公共衛(wèi)生局（PHAC）的國家微生物實驗室（NML）和CFIA的國家外國動物疾病中心（NCFAD）共同組成，NCFAD主要為外來動物疫病提供快速準(zhǔn)確的科學(xué)實驗鑒定，包括診斷、技術(shù)開發(fā)和研究、培訓(xùn)和提供科學(xué)建議及國際咨詢等功能。其中豬瘟和禽流感為OIE參考實驗室。

該中心是加拿大唯一的BSL-4級生物安全實驗室，也是世界上第一所同時具備人類醫(yī)學(xué)和動物研究的BSL-4級生物安全實驗室。

1.2 省級獸醫(yī)實驗室

加拿大省級獸醫(yī)實驗室（AHL）歸口各省農(nóng)業(yè)廳管理。加拿大共10個省3個地區(qū)，各省均有1個或以上的省級實驗室?？疾旖M分別參觀了不列顛哥倫比亞省和安大略省的省級實驗室。省級實驗室主要負(fù)責(zé)當(dāng)?shù)貐^(qū)域的獸醫(yī)診斷工作，此外也協(xié)助CFIA和省農(nóng)業(yè)廳監(jiān)測以及預(yù)防控制動物疫病。省級實驗室根據(jù)各省畜牧養(yǎng)殖情況的不同，重點側(cè)重不同的動物疫病診斷。

除政府類實驗室外，加拿大5所獸醫(yī)學(xué)院也均有實驗室，另外也有部分私人經(jīng)營的實驗室提供診斷服務(wù)。

1.3 獸醫(yī)實驗室在動物疫病診斷和疫情監(jiān)測中所起的作用

加拿大動物健康監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)（Canadian Animal Health Surveillance Network，CAHSN）（圖2）將聯(lián)邦、省級、大學(xué)的實驗室有效地聯(lián)合起來，在暴發(fā)動物疫情時會共同發(fā)揮作用以做到及時、快速地診斷疫病。而且通過與公共衛(wèi)生局合作，人醫(yī)系統(tǒng)與獸醫(yī)系統(tǒng)可以實現(xiàn)資源共享。這些要素共同組成強(qiáng)大的監(jiān)控網(wǎng)絡(luò)，形成動物疫病的國家早期預(yù)警系統(tǒng)，是食品安全和公共衛(wèi)生的有力保障。

加拿大的動物疫病診斷程序通常是先由執(zhí)業(yè)獸醫(yī)為動物看診，再將樣品或動物尸體（活體動物）送由省級實驗室進(jìn)行解剖和進(jìn)一步檢測，待省級實驗室將檢測結(jié)果反饋給執(zhí)業(yè)獸醫(yī)，執(zhí)業(yè)獸醫(yī)綜合臨床癥狀和實驗室診斷結(jié)果給予農(nóng)場主治療建議。但省級實驗室沒有診斷需上報疫病的權(quán)利，如果省級實驗室發(fā)現(xiàn)可疑外來病或嚴(yán)重傳染性疫病時需立即上報CFIA，由CFIA實驗室進(jìn)行診斷。

加拿大的動物疫病監(jiān)測分為兩種不同類型。一類是聯(lián)邦監(jiān)測疫病，如布病、高致病性禽流感。這類疫病由CFIA實驗室統(tǒng)一組織監(jiān)測，若需要省級實驗室配合，則通過簽訂協(xié)議將監(jiān)測任務(wù)委托給省級實驗室完成；一類是非聯(lián)邦監(jiān)測疫病，如藍(lán)耳?。≒RRS）。這類疫病不由聯(lián)邦政府統(tǒng)一組織監(jiān)測，通常由各生產(chǎn)者協(xié)會自主監(jiān)測，協(xié)會一般也通過與省級實驗室簽訂協(xié)議的方式委托監(jiān)測任務(wù)，由省級實驗室完成監(jiān)測計劃。

2 加拿大實驗室安全與管理

2.1 職業(yè)健康與安全（OHS）

加拿大獸醫(yī)實驗室職業(yè)健康與安全包括通用健康安全與實驗室生物安全兩部分，主要由加拿大各省的工人補(bǔ)償管理委員會（WCB）統(tǒng)一管理，同時，實驗室生物安全也要符合WHO與OIE的有關(guān)要求。

2.2.1 通用健康與安全

工人補(bǔ)償管理委員會（WCB）出臺的工人補(bǔ)償法案規(guī)定雇主、部門主管和雇員都有相應(yīng)的責(zé)任以保證一個健康、安全的工作環(huán)境。WCB通過“聯(lián)合健康與安全委員會”與“工作場所有害物質(zhì)信息系統(tǒng)（WHMIS）”實現(xiàn)這一目的。

2.2.1.1 聯(lián)合健康與安全委員會

WCB規(guī)定超過20個雇員的單位雇主必須成立健康與安全委員會，此委員會負(fù)責(zé)制定和完善安全與健康規(guī)劃，報告、處理工作中的危害情況和員工投訴。安全與健康安全委員會必須由至少4名工人和管理層安全代表組成。

考察組培訓(xùn)所在的SILLIKER JR實驗室每個部門都有相應(yīng)的安全代表，質(zhì)量保證部門主管兼任安全主管。安全代表每月都要進(jìn)行其部門及其他部門的內(nèi)部安全檢查，檢查內(nèi)容包括樓層、儀器、實驗方法和操作以及是否遵守OHS程序，而各部門主管負(fù)責(zé)糾正檢查中發(fā)現(xiàn)的安全問題。安全事故發(fā)生時，委員會需對事故進(jìn)行調(diào)查并報告WCB。

2.2.1.2 工作場所有害物質(zhì)信息系統(tǒng)（WHMIS）

WHMIS通過鑒定工作場所中所有受控物品危害性的方式減少工作人員對有害物質(zhì)的接觸，從而降低工作人員的職業(yè)傷害。此系統(tǒng)包含3個基本元素：WHMIS標(biāo)簽、物品安全數(shù)據(jù)記錄表（MSDSs）、WHMIS培訓(xùn)計劃，WHMIS標(biāo)簽又分為供應(yīng)商標(biāo)簽和工作場所標(biāo)簽，分別由供應(yīng)商和雇主提供。

生產(chǎn)廠家供應(yīng)產(chǎn)品（試劑等原材料）時需提供WHMIS標(biāo)簽（供應(yīng)商標(biāo)簽）和MSDSs，雇主則提供工作場所標(biāo)簽和對員工進(jìn)行WHMIS培訓(xùn)，有了以上內(nèi)容，員工就可以充分了解工作場所各種物品的危害程度、預(yù)防危害的安全操作程序以及遇到危險時的急救程序。

WHMIS在加拿大聯(lián)邦和省級均有立法保障，聯(lián)邦立法規(guī)定來自生產(chǎn)廠商、進(jìn)口商、銷售商或分銷商的所有產(chǎn)品必須受控于WHMIS；各省立法規(guī)定WHMIS必須包含所有工作場所的有害物質(zhì)并會明確雇主的責(zé)任。

2.2.2 實驗室生物安全

實驗室生物安全是指通過規(guī)范的實驗室設(shè)計建造、實驗設(shè)備的配置及個人防護(hù)裝備的使用、標(biāo)準(zhǔn)化的工作程序和管理規(guī)程的嚴(yán)格執(zhí)行，確保操作生物有害物質(zhì)的工作人員不受實驗對象的傷害，周圍環(huán)境不受其污染。

實驗室主要通過初級防護(hù)屏障和次級防護(hù)屏障來防護(hù)生物有害物質(zhì)。初級防護(hù)屏障指各種個人防護(hù)器具（PPE）和生物安全設(shè)備，PPE包括實驗服、手套、護(hù)目鏡和呼吸器（口罩）；生物安全設(shè)備包括生物安全柜（BSC）和動物隔離器。次級防護(hù)屏障的內(nèi)容包括實驗室分區(qū)和室內(nèi)氣壓梯度，這需要根據(jù)實驗室的安全要求進(jìn)行設(shè)計。

WHO根據(jù)病原微生物的危害程度將其分為4類，生物安全實驗室也相應(yīng)分為BSL1-4級。BSL-3級以上實驗室在初級防護(hù)屏障上要求必須有PPE（4級需要正壓防護(hù)服）和Ⅱ級以上的BSC；在次級防護(hù)屏障上要求實驗室與外界物理隔離，緩沖間要安裝互鎖門，進(jìn)出空氣要經(jīng)過HPEA過濾系統(tǒng)，室內(nèi)要有負(fù)壓系統(tǒng)并有高壓滅菌和化學(xué)消毒裝置處理實驗室內(nèi)排出的廢棄物。

考察組參觀的加拿大聯(lián)邦、省級和人醫(yī)系統(tǒng)的-2、2+、3、4級實驗室都遵循以上原則。以溫尼伯格的國家外國動物疾病中心（NCFAD）為例，其BSL-4級實驗室上層是空氣處理區(qū)，下層是廢物處理區(qū)，中層為真正的BSL-4區(qū)，設(shè)計原則是將它們置于“盒子中的盒子”。一是有標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)出程序，進(jìn)入時穿上保護(hù)衣——經(jīng)密封門進(jìn)入實驗室——穿上保護(hù)靴、接氣喉，離開時經(jīng)過化學(xué)淋浴——脫掉保護(hù)衣后以水淋??；二是有進(jìn)出實驗室的氣流管制，在實驗室之間及其內(nèi)部的氣壓均受嚴(yán)格監(jiān)控，房與房之間的氣壓以50Pa逐步遞減，在BSL-3級中排氣最少通過一次HEPA過濾，在BSL-4級中供氣經(jīng)過一次過濾，排氣則經(jīng)過兩級過濾；三是有專門的生物廢棄物處理裝置，從BSL-3、4級實驗室排出的廢液會在三個有5000公升容量的消毒處理器中做第二輪處理，固體廢棄物則由一個絞碎分解器處理。

2.3 實驗室質(zhì)量管理體系-質(zhì)量保證與質(zhì)量控制（QA/QC）

20世紀(jì)70年代，實驗室質(zhì)量保證與質(zhì)量控制（QA/QC）進(jìn)入全面質(zhì)量管理（TQM）階段。其中QA是指在質(zhì)量管理中為完成質(zhì)量要求提供足夠的支持，QC是指在質(zhì)量管理中完成質(zhì)量要求。QA/QC能夠確保實驗室數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性、可靠性和可重復(fù)性，在生物安全實驗室，QA/QC還能確保員工、公眾和環(huán)境的安全。

2.3.1 質(zhì)量管理體系介紹

質(zhì)量管理體系主要有ISO 9001：2000、ISO 17025、GMP和GLP。在加拿大，ISO 9001：2000由質(zhì)量管理協(xié)會（QMI）負(fù)責(zé)注冊；ISO 17025由加拿大標(biāo)準(zhǔn)化委員會（SCC）負(fù)責(zé)認(rèn)可；GMP由加拿大健康署（Health Canada）頒發(fā)許可證；GLP由SCC通過經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織（OECD）認(rèn)可。

以上四種管理體系中經(jīng)常被獸醫(yī)實驗室采用的是ISO 17025和GLP。ISO 17025的產(chǎn)生是主要就是針對標(biāo)準(zhǔn)化校準(zhǔn)和檢測實驗室，它由國際實驗室認(rèn)可合作組織（ILAC）進(jìn)行管理。ILAC在亞太地區(qū)的機(jī)構(gòu)包括了加拿大標(biāo)準(zhǔn)化委員會（SCC）和中國合格評定國家認(rèn)可委員會（CNAS）。除ILAC外，北美存在一個專門針對獸醫(yī)實驗室的質(zhì)量管理體系——美國獸醫(yī)實驗室診斷專家協(xié)會（AAVLD），其內(nèi)容與ISO 17025相似，但對實驗室要求稍低。GLP是針對研究開發(fā)藥物的實驗室所設(shè)置的質(zhì)量管理體系，因此只有部分研究藥物實驗室需要遵循GLP原則，這種實驗室在加拿大并不多，考察組沒有參觀到此類實驗室。

所有質(zhì)量管理體系都要經(jīng)過階段性審核以確保實驗室仍具有其資格，ISO 17025每年審核一次，AAVLD每5年審核一次。GLP每2年審核一次。除了外部階段性審核外，實驗室也由QA/QC部門定期組織內(nèi)部審核，內(nèi)審有利于及時發(fā)現(xiàn)、改正質(zhì)量管理問題。在內(nèi)部審核2周后要進(jìn)行管理評審，管理層會根據(jù)內(nèi)部審核報告，分析評估整個質(zhì)量管理體系。

2.3.2 ISO 17025在實驗室中的應(yīng)用

良好的ISO 17025質(zhì)量管理體系通過控制一切與實驗室運(yùn)行相關(guān)的內(nèi)容來達(dá)到質(zhì)量保證與質(zhì)量控制。

一是質(zhì)量管理文件受控。包括質(zhì)量手冊、標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）、作業(yè)指導(dǎo)書和質(zhì)量記錄。SOP包括官方標(biāo)準(zhǔn)和內(nèi)部SOP（實驗方法SOP、儀器設(shè)備SOP、安全SOP、人員SOP等），每個SOP都有其獨立的編號，實驗室應(yīng)有獨立的QA/QC部門負(fù)責(zé)保存所有SOP的清單（Master List），并嚴(yán)格控制SOP的使用權(quán)限，當(dāng)SOP更新時同時更新文件清單、改成新版本，質(zhì)量記錄一般要保存7—10年。

二是實驗室物品受控。實驗室內(nèi)所有物品的供應(yīng)商都必須經(jīng)過認(rèn)可或具有相關(guān)資格，所有儀器、試劑耗材也要列有清單，QA/QC部門負(fù)責(zé)保存相應(yīng)的說明書和MSDSs以保證實驗室物品的可追溯性。

三是實驗室環(huán)境、設(shè)施受控。這就要求環(huán)境溫度、濕度和設(shè)備狀態(tài)、檢查、維修均要有記錄。

四是實驗室運(yùn)行過程受控。作為診斷實驗室，從接收樣品到各部門檢測樣品，再到廢棄物處理都必須遵從各類SOP。

五是內(nèi)部變化受控。實驗室原始數(shù)據(jù)和原始記錄要歸檔，新程序產(chǎn)生時必須首先經(jīng)過部門主管的同意，再提交QA/QC部門，最終由管理層決定。

2.3.3 加拿大獸醫(yī)實驗室的質(zhì)量管理情況

考察組參觀的所有獸醫(yī)實驗室均有QA/QC部門（全職或兼職），他們均按要求維持實驗室的質(zhì)量管理系統(tǒng)并組織內(nèi)部審核。其中聯(lián)邦獸醫(yī)實驗室均要求認(rèn)可ISO 17025（包括診斷和研究兩方面），省級獸醫(yī)實驗室對認(rèn)可沒有強(qiáng)制性要求，可根據(jù)實驗室的條件認(rèn)可ISO 17025或者AAVLD，而存在藥物開發(fā)工作的實驗室則需同時認(rèn)可GLP。

3 實驗室信息管理系統(tǒng)（LIMS）

LIMS將實驗室所有信息錄入電腦，通過電腦系統(tǒng)整合、分析、處理數(shù)據(jù)，大大提高了工作效率。它同實驗室質(zhì)量管理體系相輔相成，共同達(dá)成良好管理實驗室的目標(biāo)。

3.1 記錄了實驗室所有人員、物品、供應(yīng)商和客戶的信息，保證以上信息的受控和方便查找，無論是樣品、標(biāo)準(zhǔn)品還是SOP都有對應(yīng)的編號，尤其是人員信息中包含了培訓(xùn)信息，每位員工上崗前都要進(jìn)行培訓(xùn)并將結(jié)果記錄在LIMS上的個人信息中，只有培訓(xùn)合格者方能打開LIMS模塊，輸入實驗數(shù)據(jù)，保證了員工能夠各司其職。

3.2 使實驗室各步驟環(huán)環(huán)相扣，接收樣品時錄入需要檢測的項目，檢測人員即能進(jìn)行實驗分析、錄入檢測結(jié)果，系統(tǒng)即能直接生成結(jié)果報告且每個步驟都會記錄在LIMS中，保證其可追溯性。

3.3 在關(guān)鍵點設(shè)立關(guān)卡以保證實驗結(jié)果的可靠，檢測人員錄入數(shù)據(jù)后必須先后得到部門主管和QA/QC主管的同意系統(tǒng)才能輸出結(jié)果報告。

3.4 整合信息，計算出員工、部門的工作量以及實驗室收益，管理層可進(jìn)入LIMS隨時查看各部分報告。

考察組培訓(xùn)與參觀的實驗室基本均使用實驗室信息管理系統(tǒng)，但是名稱不盡相同，如NCFAD采用LSTS，渥太華醫(yī)院微生物實驗室采用Cerner。其中，SILLIKER JR實驗室的LIMS包含有最豐富的內(nèi)容，例如職工信息、客戶信息、供應(yīng)商信息、儀器和試劑耗材目錄、檢測方法信息、結(jié)果分析、質(zhì)量控制和診斷報告等均可用LIMS查找或操作。

4 學(xué)習(xí)體會與建議

4.1 健全國家級獸醫(yī)實驗室質(zhì)量管理系統(tǒng)，推動各級獸醫(yī)實驗室實行認(rèn)可實驗室制度。加拿大聯(lián)邦獸醫(yī)實驗室均要求通過ISO 17025系統(tǒng)的認(rèn)證，省級獸醫(yī)實驗室也在逐步通過ISO 17025或AAVLD的認(rèn)證?？疾旖M所參觀的加拿大獸醫(yī)實驗室均有完整的質(zhì)量管理部門（專職或兼職）負(fù)責(zé)診斷與研究的質(zhì)量控制，實驗室各種程序都有相應(yīng)成文的SOP記錄在案，這使得實驗室完全處于受控狀態(tài)，充分保障了加拿大獸醫(yī)實驗室診斷、研究結(jié)果的可信性及標(biāo)準(zhǔn)化。

我國國家級獸醫(yī)實驗室雖然多數(shù)由CNAS評審?fù)ㄟ^實驗室認(rèn)可或通過國家計量認(rèn)證，但仍待進(jìn)一步完善，我國獸醫(yī)實驗室應(yīng)成立完整的質(zhì)量管理部門，進(jìn)一步做好計量認(rèn)證工作和逐步通過實驗室認(rèn)可。同時應(yīng)推動國內(nèi)各級獸醫(yī)實驗室建立健全實驗室認(rèn)可制度，這對提高我國獸醫(yī)實驗室診斷、監(jiān)測水平，出具真實可靠、國際認(rèn)可的診斷報告具有重要意義。

4.2 加強(qiáng)獸醫(yī)實驗室安全管理，完善各級生物安全實驗室硬件和軟件建設(shè)。加拿大獸醫(yī)實驗室的安全管理是一個大概念，包括通用健康安全和生物安全兩方面，實驗室有專門的部門或人員負(fù)責(zé)安全管理工作，所有員工在上崗前首先要通過OHS培訓(xùn)，再根據(jù)其工作崗位的不同接受有針對性的安全培訓(xùn)。據(jù)了解，溫尼伯格的國家外國動物疾病中心的工作人員在進(jìn)入BSL-4級實驗室工作前要經(jīng)過嚴(yán)格的培訓(xùn)程序，先在澳大利亞動物健康實驗室（AAHL）進(jìn)行生物安全基礎(chǔ)理論培訓(xùn)，再在不存在致病性病原微生物的狀態(tài)下熟悉4級實驗室工作程序，最后才能在4級實驗室中從事正常工作。

我國目前許多獸醫(yī)實驗室都在建設(shè)BSL-3級實驗室，除完善生物安全實驗室初級、次級防護(hù)屏障等硬件設(shè)施建設(shè)，達(dá)到國際標(biāo)準(zhǔn)和國家標(biāo)準(zhǔn)外，更要加強(qiáng)人員培訓(xùn)、管理等軟件建設(shè)水平，充分保證生物安全實驗室高效、安全運(yùn)行。

4.3 建立獸醫(yī)實驗室信息管理系統(tǒng)，提高信息化管理水平。LIMS不僅提高了實驗室各部門的工作效率，還將各部門聯(lián)系成為一個有機(jī)整體，同時利用電腦系統(tǒng)設(shè)置權(quán)限，嚴(yán)防實驗室資料外泄。加拿大SILLIKER JR實驗室更是將實驗室信息與人力資源、財務(wù)等綜合部門信息整合，便于單位的全面管理。據(jù)了解，我國出入境檢驗檢疫系統(tǒng)已經(jīng)實行簡易的LIMS系統(tǒng)，我國應(yīng)建立有效信息管理系統(tǒng)，并推動國內(nèi)獸醫(yī)實驗室逐步建立此系統(tǒng)，有效提高實驗室信息化管理水平。

4.4 加強(qiáng)獸醫(yī)與人醫(yī)實驗室的合作與交流，推動公共衛(wèi)生系統(tǒng)的發(fā)展。加拿大除人類和動物健康科學(xué)中心是獸醫(yī)實驗室和人醫(yī)實驗室共用一套設(shè)施外，考察組參觀的不列顛哥倫比亞省的省級獸醫(yī)實驗室和人醫(yī)CDC的人畜共患病實驗室合作良好，經(jīng)常互相交流人畜共患病的診斷、研究工作。我國獸醫(yī)系統(tǒng)和衛(wèi)生系統(tǒng)應(yīng)加強(qiáng)合作，尤其在禽流感等重要人畜共患病問題上加強(qiáng)交流，實現(xiàn)資源共享，共同推動我國公共衛(wèi)生事業(yè)的發(fā)展，有效保障國民健康。

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