李 亞

河南省商丘市第一人民醫(yī)院輸血科，河南商丘 476100

TP-ELISA法檢測(cè)心臟病患者易產(chǎn)生假陽(yáng)性的原因分析

李 亞

河南省商丘市第一人民醫(yī)院輸血科，河南商丘 476100

目的探討應(yīng)用梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（TP-ELISA）檢測(cè)心臟病患者易產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果的原因方法采用TP-ELISA法分別檢測(cè)本院1 350例心臟病患者和2 780例非心臟病患者的血清，結(jié)果陽(yáng)性者再用TPPA法進(jìn)行確診，并對(duì)兩組患者的梅毒特異性抗體假陽(yáng)性率進(jìn)行對(duì)比分析結(jié)果TP-ELISA法檢測(cè)心臟病患者假陽(yáng)性率明顯高于非心臟病患者組，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。 結(jié)論 脂質(zhì)異常和年齡因素是造成TP-ELISA法檢測(cè)梅毒抗體易發(fā)生假陽(yáng)性的原因。

TP-ELISA；心臟??；梅毒抗體；假陽(yáng)性

近年來(lái)，梅毒患者數(shù)量呈逐年上升趨勢(shì)，血液傳播、性傳播和母嬰垂直傳播是梅毒的主要傳播途徑。免疫血清學(xué)試驗(yàn)是診斷梅毒的重要途徑之一，它對(duì)梅毒的診斷、治療及研究均有重要意義[1]，其檢測(cè)價(jià)值已經(jīng)超出術(shù)前及輸血前的范疇，筆者在近年的工作中發(fā)現(xiàn)TP-ELISA在心臟病患者中陽(yáng)性率遠(yuǎn)高于其他人群，現(xiàn)將本院2012年1月～2012年6月TPELISA檢測(cè)結(jié)果分析如下：

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇2012年1～6月住院患者4 130例，其中，心臟病患者組1 350例，非心臟病患者組2 780例。

1.2 儀器及試劑

儀器采用帝肯全自動(dòng)酶標(biāo)免疫檢測(cè)儀。梅毒抗體ELISA法試劑盒由上?？迫A生物有限試劑公司提供，TPPA法試劑盒由日本東京富士瑞必歐株式會(huì)社提供。

1.3 檢測(cè)方法

先用TP-ELISA法檢測(cè)住院患者血清中梅毒特異性抗體，陽(yáng)性者再用梅毒螺旋體診斷試劑TPPA進(jìn)行確診。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

TP-ELISA法檢測(cè)心臟病患者組梅毒特異性抗體有54例陽(yáng)性，以TPPA法8例陽(yáng)性為標(biāo)準(zhǔn)，TP-ELISA法存在46例假陽(yáng)性，假陽(yáng)性率為3.41%（46/1 350）；TP-ELISA法檢測(cè)非心臟病患者組梅毒特異性抗體有69例陽(yáng)性，以TPPA法35例陽(yáng)性為標(biāo)準(zhǔn)，TP-ELISA法存在34例假陽(yáng)性，假陽(yáng)性率為1.22%（34/2 780）。ELISA法檢測(cè)心臟病患者組梅毒特異性抗體假陽(yáng)性率明顯高于非心臟病患者組假陽(yáng)性率，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=17.18，P<0.01），見表 1。

表1 兩組間梅毒抗體檢測(cè)結(jié)果比較（n）

3 討論

蒼白螺旋體蒼白亞種俗稱梅毒螺旋體，患者是梅毒螺旋體的惟一天然宿主，也是唯一傳染源[2]，主要通過性接觸傳播，可引起人體多器官病變、功能失常，組織破壞甚至死亡[3]。患者感染梅毒后由于TP與宿主之間的相互作用，病程可持續(xù)很長(zhǎng)。癥狀的輕重、發(fā)病的時(shí)間也因人而異，不全相同。因此，診斷梅毒不僅需要豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)，還需要直接或間接發(fā)現(xiàn)和證明體內(nèi)TP的存在。

梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（TP-ELISA）法價(jià)格低廉、操作方便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、可批量化、自動(dòng)化檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)，是目前醫(yī)院檢測(cè)梅毒特異性抗體常用的免疫學(xué)方法，對(duì)梅毒抗體IgG、IgM都有很好的檢測(cè)能力[4]。在ELISA檢測(cè)梅毒抗體陽(yáng)性的患者中，有一些確實(shí)是梅毒螺旋體的感染者，但有一部分陽(yáng)性者無(wú)梅毒的任何癥狀與體征，無(wú)輸血史、手術(shù)史、吸毒史等高危行為，除血清學(xué)實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性，沒有診斷梅毒的任何依據(jù)。這就要求臨床醫(yī)師結(jié)合臨床綜合分析。通過對(duì)本院2012年1～6月的TP檢測(cè)結(jié)果分析，發(fā)現(xiàn)心臟病患者的梅毒假陽(yáng)性率明顯高于非心臟病患者，也表明對(duì)于TP-ELISA陽(yáng)性者要結(jié)合臨床表現(xiàn)綜合分析。

梅毒感染過程中，92KD、47KD、45KD、17KD、15KD、42KD、37KD等梅毒的特異性蛋白可被檢測(cè)到，其中，蛋白47KD、45KD、17KD、15KD為梅毒螺旋體外膜的脂蛋白，且具有較好的免疫活性[5]。TP-ELISA試劑盒主要選用以上的分子抗原和人血清白蛋白與之鏈接，合成的多肽直接作為試劑抗原使用，由于抗原不提純和使用人血清清蛋白，增加了意外假抗原位點(diǎn)的可能性，老年患者易出現(xiàn)免疫功能低下，會(huì)產(chǎn)生針對(duì)聯(lián)接用的白蛋白抗體或者是一些異常蛋白質(zhì)，從而干擾了梅毒抗體的ELISA反應(yīng)[6]。而心臟病患者大多是老年人群。心臟系統(tǒng)疾病中有好多種可以引起梅毒假陽(yáng)性，像心血管疾病可能使機(jī)體釋放誘導(dǎo)產(chǎn)生抗-TP抗體的交叉抗原引起假陽(yáng)性；風(fēng)濕性心臟病患者體內(nèi)含有類風(fēng)濕因子，其在反應(yīng)過程中有一定的吸附作用，產(chǎn)生顯色造成假陽(yáng)性。細(xì)菌性心內(nèi)膜炎時(shí)感染的細(xì)菌菌體內(nèi)可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶（此酶為TP-ELISA標(biāo)記酶），也會(huì)與底物產(chǎn)生非特異性反應(yīng)而造成假陽(yáng)性等。 另外，心血管疾病的患者大都存在血脂異常，體內(nèi)大部分都存在抗類脂抗體，也是引起假陽(yáng)性的原因之一。

梅毒的血清學(xué)試驗(yàn)陽(yáng)性只能提示所測(cè)標(biāo)本中有抗類脂抗體或抗TP抗體存在，不能作為患者感染梅毒螺旋體的絕對(duì)診斷依據(jù)，陰性結(jié)果也不能完全排除梅毒螺旋體感染，檢測(cè)結(jié)果應(yīng)結(jié)合臨床表現(xiàn)等綜合分析[7-8]。所以，在工作中，對(duì)于那些TP-ELISA法梅毒螺旋體陽(yáng)性而無(wú)臨床癥狀的患者，尤其是老年心臟病患者，應(yīng)做TPPA或者其他確證實(shí)驗(yàn)，排除假陽(yáng)性。

[1]龍振華.梅毒血清學(xué)與臨床[J].中華內(nèi)科雜志，1994，42（7）：438-439.

[2]洪秀華.臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2004：337-338.

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Reason analysis of false-positive which is easy to produce detected by TPELISA method from patients with heart disease

LI Ya

Department of Blood Transfusion,the First People's Hospital of Shangqiu City in He′nan Province,Shangqiu 476100,China

ObjectiveTo explore the reason of false-positive which is easy to produce detected by treponema pallidum enzyme-linked immuno sorbent assay(TP-ELISA)method from patients with heart disease.MethodsThe serum from 1 350 cases of patients with heart disease and 2 780 cases of patients without heart disease were respectively detected by TPELISA.The results with positive were definitely diagnosed by TPPA method.The false positives of syphilis specificity antibody in two groups of patients were compared and analyzed.ResultsThe false positives rate for patients with heart disease detected by TP-ELISA method was higher than the group of patients without heart disease with significant difference(P<0.01).ConclusionLipids abnormal and age factor are the causes of false-positive for syphilis antibody which is easy to produce detected by TP-ELISA method.

Treponema pallidum enzyme-linked immuno sorbent assay (TP-ELISA);Heart disease;Syphilis antibody;False positive.

R446.61

A

1674-4721（2012）10（c）-0096-02

2012-07-24 本文編輯：陳 ?。?/p>