朱萱萱，李七一，吳旭彤，王海丹

(南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院基礎(chǔ)藥理室，210029)

高脂血癥和動(dòng)脈粥樣硬化等心腦血管疾病嚴(yán)重影響人類的身體健康和生活質(zhì)量，雖然他汀類降脂藥物已在臨床廣泛應(yīng)用，但心腦血管病發(fā)病率仍呈上升趨勢。因此，有必要研究和開發(fā)新的降脂和抗動(dòng)脈粥樣硬化藥物。我院心內(nèi)科總結(jié)多年臨床治療冠心病實(shí)踐，以益氣滋陰、活血化淤法組方的制劑冠心平臨床被用于治療氣陰兩傷、痰血阻滯型冠心病引起的胸悶氣短、心悸、心前區(qū)疼痛等癥，效果顯著[1-5]。筆者在本實(shí)驗(yàn)中通過建立高脂血癥及動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成金黃地鼠模型，探討冠心平顆粒對冠心病血管功能的影響，為該藥防治心血管系統(tǒng)疾病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試藥冠心平顆粒(南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院制劑部提供，批號:100330)，辛伐他汀(魯南貝特制藥有限公司，批號:100410)，總膽固醇/三酰甘油(total cholesterol/triglyeride，TC/TG)試劑盒(Human生產(chǎn))，低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)試劑盒(日本第一化學(xué)藥品株式會(huì)社生產(chǎn))。

1.2 儀器AR1140電子天平[梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司制造]，日本東芝120全自動(dòng)生化分析儀，尼康顯微鏡。

1.3 動(dòng)物金黃地鼠，體質(zhì)量(150±10)g，雌雄各半，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，合格證號:SCXK(京)2006-0009。

1.4 模型的制備將動(dòng)物分籠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，隨機(jī)取10只作為正常對照組，其余40只喂高脂飼料[基礎(chǔ)飼料(94%)+膽固醇(1%)+豬油(5%)配制]，喂養(yǎng)4周，制備高脂血癥金黃地鼠模型[6-7]。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法將經(jīng)高脂飼料喂養(yǎng)4周的金黃地鼠40只隨機(jī)分為4組:①模型組，②冠心平顆粒低劑量組(8.38 g·kg－1·d－1);③冠心平顆粒高劑量組(16.75 g·kg－1·d－1)，④辛伐他汀組(5 mg·kg－1·d－1)。各給藥組按照上述劑量灌胃給藥8周，模型組與正常對照組灌胃給予0.9%氯化鈉溶液。繼續(xù)高脂飼料喂養(yǎng)8周，觀察各組金黃地鼠體質(zhì)量變化[8]。

1.6 檢測指標(biāo)分別于給藥后4和8周末檢測金黃地鼠血清TC、TG、低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)。給藥8周末采用蘇木精-伊紅(HE)染色檢測主動(dòng)脈及肝組織病理改變。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 15.0軟件分析，組間對比分析采用配對t檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 體質(zhì)量測定結(jié)果見表1。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，高脂飼料喂養(yǎng)金黃地鼠后，模型組體質(zhì)量不同程度增加。冠心平顆粒高、低劑量組體質(zhì)量較模型組降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;給藥5周后，辛伐他汀組動(dòng)物體質(zhì)量較模型組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。提示冠心平顆粒對高脂飼料喂養(yǎng)動(dòng)物的體質(zhì)量無明顯影響。

2.2 血脂測定結(jié)果見表2。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組金黃地鼠TC、TG和LDL-C水平均明顯升高，與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);冠心平顆粒高劑量組第4，8周TC、TG和LDL-C水平明顯降低，與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);冠心平顆粒低劑量組第4周TC、TG和LDL-C水平降低，第8周TC和LDL-C水平下降，與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01，P＜0.05)。提示冠心平顆?？山档透咧暳衔桂B(yǎng)金黃地鼠的血脂。

2.3 主動(dòng)脈及肝組織病理改變正常對照組肝小葉結(jié)構(gòu)清楚，肝索呈放射狀排列;肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，細(xì)胞核居中，無變性、壞死;小葉內(nèi)無炎性細(xì)胞浸潤，無竇旁細(xì)胞增生;匯管區(qū)有少量炎性細(xì)胞浸潤，主動(dòng)脈血管壁分層清楚，管壁完整光滑，內(nèi)皮細(xì)胞無明顯腫脹。模型組肝小葉內(nèi)大部分肝細(xì)胞體積增大，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)大小不等的空泡，部分區(qū)域散在小灶性肝細(xì)胞體積明顯增大，細(xì)胞質(zhì)淡染，內(nèi)充滿巨大空泡，如同氣球樣變，為肝細(xì)胞變性，局灶性炎性細(xì)胞浸潤;主動(dòng)脈管壁全層內(nèi)出現(xiàn)散在針狀或泡沫狀空隙，彈力纖維斷裂，局部內(nèi)皮細(xì)胞缺損。主動(dòng)脈管壁彌漫性脂質(zhì)沉積。與模型組比較，冠心平顆粒高、低劑量組肝臟病變程度和范圍明顯減輕，主動(dòng)脈管壁全層可見散在針狀或泡沫狀空隙，彈力纖維斷裂，與模型組比較，病變程度略輕。提示冠心平顆粒具有延緩冠狀動(dòng)脈硬化形成和防止肝組織損傷作用(圖1，2)。

表1 5組金黃地鼠不同時(shí)間體質(zhì)量測定結(jié)果Tab.1Effect of guanxinping granule on weight of 5 groups of mesocricitus auratus at different timeg，±s，n=10

表1 5組金黃地鼠不同時(shí)間體質(zhì)量測定結(jié)果Tab.1Effect of guanxinping granule on weight of 5 groups of mesocricitus auratus at different timeg，±s，n=10

與模型組比較，*1P＜0.05;與正常對照組比較，*2P＜0.05，*3P＜0.01Compared with model group，*1P＜0.05;compared with normal control group，*2P＜0.05，*3P＜0.01

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表2 5組金黃地鼠給藥后不同時(shí)間血脂測定結(jié)果Tab.2Effect of guanxinping granule on blood fat of 5 groups of mesocricitus auratus at different timemmol·L－1，±s

表2 5組金黃地鼠給藥后不同時(shí)間血脂測定結(jié)果Tab.2Effect of guanxinping granule on blood fat of 5 groups of mesocricitus auratus at different timemmol·L－1，±s

與模型組同時(shí)點(diǎn)比較，*1P＜0.01，*2P＜0.05;與正常對照組同時(shí)點(diǎn)比較，*3P＜0.01Compared with model group at the same time point，*1P＜0.01，*2P＜0.05;compared with normal control group at the same time point，*3P＜0.01

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3 討論

動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，參與因素眾多。其中高脂血癥可造成動(dòng)脈內(nèi)皮功能損害，引起內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙或血管壁功能和結(jié)構(gòu)損傷，從而影響血管功能。近年來，中醫(yī)藥治療血脂異常和血管內(nèi)皮損傷的研究取得了較大進(jìn)展，已有研究證明中醫(yī)藥可從多種途徑調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，并具有血管內(nèi)皮保護(hù)作用。

南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院心內(nèi)科李七一教授根據(jù)臨床經(jīng)驗(yàn)，提出慢性心臟病的病機(jī)是氣陰兩虛、痰淤互阻，并采用益氣滋陰、活血化痰法擬定冠心平顆粒組方。該組方由黃精、當(dāng)歸、三七、瓜蔞皮等組成。冠心平顆粒藥效物質(zhì)和作用機(jī)制清楚，臨床治療慢性心臟病療效確切，符合當(dāng)今慢性心臟病疾病譜和疾病表現(xiàn)的新變化。臨床研究表明，冠心平顆粒對氣陰兩虛、痰淤互阻型穩(wěn)定性心絞痛有效，同時(shí)還可作為心肌梗死的輔助用藥，可緩解患者病情，改善預(yù)后。未見有明顯不良反應(yīng)，可以長期服用[9]。

筆者對金黃地鼠連續(xù)給予4周高脂飼料，建立高脂血癥金黃地鼠及動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成模型，并以冠心平顆粒干預(yù)8周，探討冠心平顆粒防治高脂血癥和干預(yù)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成的作用及其可能機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，冠心平顆粒可顯著降低高脂血癥動(dòng)物血脂水平。形態(tài)學(xué)檢查結(jié)果表明，冠心平顆粒各劑量組主動(dòng)脈內(nèi)膜泡沫細(xì)胞形成和局部內(nèi)皮細(xì)胞缺損顯著少于高脂血癥模型組。表明冠心平顆?？赏ㄟ^降低血脂，阻抑高脂血癥動(dòng)物主動(dòng)脈內(nèi)膜泡沫細(xì)胞和脂質(zhì)條紋的形成，有延緩動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成的作用。

[1]李七一，張洪兵.冠心平治療冠心病心絞痛56例分析[J].中醫(yī)藥學(xué)刊，2003，21(10):1752－1753.

[2]王令諄，李七一.中西醫(yī)結(jié)合治療急性心肌梗死20例臨床研究[J].江蘇中醫(yī)藥，2009，41(12):21－22.

[3]王令諄，李七一.冠心病內(nèi)皮功能紊亂的中醫(yī)藥診治進(jìn)展[J].南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，2(3):238－240.

[4]王道成.李七一治療冠心病經(jīng)驗(yàn)擷萃[J].江蘇中醫(yī)藥，2010，42(1):17－18.

[5]李七一.心腦血管疾病中醫(yī)診治[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，2001.

[6]金永娟，李宏妹，朱文云，等.高脂血癥對血細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷[J].實(shí)驗(yàn)研究，2002，6(1):22－24.

[7]郝鈺，杭小同，吳珺，等.溫脈通對高脂致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，30(4):229－231.

[8]王建新.黃精降糖降脂作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國中醫(yī)藥，2009，7(1):93－94.

[9]韓旭，李七一，賴仁勝，等.ApoE基因多態(tài)性與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病中醫(yī)證型的相關(guān)性研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2009，27(11):2323－2330.