張全美，黃錦燕 王守卿

(淄博市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗所，山東淄博 255033) (淄博市淄川區(qū)農(nóng)業(yè)局，山東淄博 255033)

對羥基苯甲酸酯(Paraben)也稱為尼泊金酯，因非揮發(fā)性、良好的殺菌能力和穩(wěn)定性，而被用作防腐劑。對羥基苯甲酸酯類是世界上用量較大的防腐劑，它具有高效、低毒、廣譜、易配伍的優(yōu)點，其毒性比苯甲酸鈉低，且pH應(yīng)用范圍廣，在pH 4～8時，其抑菌作用基本不受pH的影響，對霉菌、酵母、細(xì)菌等具有廣泛的抗菌作用。我國于2002年3月批準(zhǔn)對羥基苯甲酸甲酯鈉、對羥基苯甲酸乙酯鈉和對羥基苯甲酸丙酯鈉作為食品防腐劑。近年來的研究表明，對羥基苯甲酸丙酯危害較大，吸入、攝入或經(jīng)皮膚吸收對身體有害，對眼、粘膜和上呼吸道和皮膚有刺激作用[1]，因此GB 2760-2011標(biāo)準(zhǔn)不再支持對羥基苯甲酸丙酯作為食品添加劑使用[2]。建立一個高選擇性和高靈敏度的方法來檢測食品中的對羥基苯甲酸酯，對于確保食品安全具有非常重要的意義。目前對羥基苯甲酸酯的檢測方法有固相萃取-高效液相色譜法[3]、超聲萃取-高效液相色譜法[4]、毛細(xì)管氣相色譜法[5]和國家標(biāo)準(zhǔn)方法 GB／T 5009.31-2003[6]。GB／T 5009.31-2003 規(guī)定用氣相色譜法測定對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯，適合醬油、醋、水果汁及果醬中對羥基苯甲酸酯的測定，不適合醬腌菜中對羥基苯甲酸酯的測定，且樣品前處理方法繁瑣耗時，無法滿足大批量檢測的需要。筆者采用超聲提取-毛細(xì)管氣相色譜法檢測醬腌菜中對羥基苯甲酸酯，前處理簡單，耗時短，靈敏度高，重現(xiàn)性好，適合大批量檢測的需要。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

氣相色譜儀：6890型，配FID檢測器、7890A色譜工作站、G4513A自動進(jìn)樣器，美國安捷倫科技有限公司；

離心機(jī)：TGL-16M型,長沙湘儀離心機(jī)有限公司；

漩渦混合器：GL-88B型，海門麒麟醫(yī)用儀器廠；

超聲波儀：SK 2200H型，廣州滬瑞明儀器有限公司；

乙醚：重蒸；

鹽酸溶液：取50 mL鹽酸，用水稀釋至100 mL；

對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯標(biāo)準(zhǔn)品：純度分別為99.8%，99.7%，99.2%，上海安普科學(xué)儀器有限公司。

1.2 樣品處理

將樣品在組織粉碎機(jī)中搗碎，稱取5.0 g試樣于25 mL容量瓶中，加入1 mL 1∶1鹽酸溶液酸化，漩渦混合2 min，再加入20 mL乙醚溶液，在超聲波水浴中超聲提取20 min，用乙醚溶液定容至標(biāo)線，搖勻。將溶液轉(zhuǎn)移至離心管，以3000 r／min離心10 min，取上清液上機(jī)測定。

1.3 氣相色譜條件

毛細(xì)管柱：SE30型(33 m×0.53 mm，2.65 μm)；柱溫：170℃；進(jìn)樣口、檢測器溫度：220℃；載氣：氮氣，流速為15.1 mL／min；氫氣流速：40 mL／min，空氣流速：350 mL／min；進(jìn)樣體積：1 μL。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

對羥基苯甲酸酯混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取對羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸乙酯、羥基苯甲酸丙酯標(biāo)準(zhǔn)品各0.2000 g，混合后用乙醚溶解，定容至200 mL，此溶液中對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯的含量均為1.0 mg／mL。

對羥基苯甲酸酯混合標(biāo)準(zhǔn)使用液：各取對羥基苯甲酸酯類混合標(biāo)準(zhǔn)液 0，5，10，25，50，75 mL，分別移入100 mL容量瓶中，以乙醚定容，此時標(biāo)準(zhǔn)系列的濃度分別為 0，50，100，250，500，750 μg／mL。

2 結(jié)果與討論

2.1 線性范圍及檢出限

將混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣1 μL進(jìn)行氣相色譜分析，色譜圖如圖1。

從圖1可見，對羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸乙酯、羥基苯甲酸丙酯標(biāo)準(zhǔn)樣品在1.3色譜條件下都得到了較好分離，出峰保留時間在3～6 min之間。實驗結(jié)果表明，對羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸乙酯、羥基苯甲酸丙酯在0～750 μg／mL濃度(X)范圍內(nèi)與色譜峰面積(Y)呈良好的線性關(guān)系，線性方程與相關(guān)系數(shù)見表1。由表1可知，對羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸乙酯、羥基苯甲酸丙酯的線性相關(guān)系數(shù)均大于0.999。

按照3倍信噪比計算，對羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯的檢出限分別為0.1，0.1，0.2 μg／mL。

表1 線性方程和相關(guān)系數(shù)

2.2 精密度試驗

以超聲波浸提離心的方法進(jìn)行樣品前處理，各連續(xù)測定11次，計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，測定結(jié)果列于表2。

表2 精密度試驗結(jié)果

由表2可知，對羥基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯的平均值分別為 0.068，0.084，0.054 g／kg，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為3.22%，2.61%，3.57%。

2.3 回收試驗

稱取不含對羥基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯的醬腌菜5.0 g于25 mL容量瓶中，分別加入對羥基苯甲酸酯類混合標(biāo)準(zhǔn)液 0.5，2，4，8 mL，濃度分別為20，80，160，320 μg／mL。按 1.2 樣品處理方法處理樣品并分離提取后，經(jīng)氣相色譜儀分析測定，測定數(shù)據(jù)見表3。

表3 回收試驗結(jié)果

由表3可知，對羥基苯甲酸甲酯的平均回收率在87.5%～95.4%之間，對羥基苯甲酸乙酯的平均回收率在84.5%～94.8%之間，對羥基苯甲酸丙酯的平均回收率在86.5%～97.1%之間，表明該法準(zhǔn)確度較高。

3 結(jié)語

采用超聲提取和離心處理醬腌菜樣品，氣相色譜法檢測對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯和對羥基苯甲酸丙酯，方法的精密度、準(zhǔn)確度均較好。該方法快速簡便、使用溶劑較少，適合日常大批量檢測工作的需要。

[1]黃輝，曹小彥，彭新凱.氣相色譜法快速測定檳榔中的對羥基苯甲酸酯[J].食品科技，2010(8): 336-338.

[2]GB 2760-2011 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)[S].

[3]陳春祝，謝維平，曾志定.固相萃取-高效液相色譜法測定6種常見食品添加劑[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2006(6): 49-50.

[4]劉文杰，萬英，馬玲.超聲萃取-液相色譜法測定食品中對羥基苯甲酸酯類防腐劑[J].塔里木大學(xué)學(xué)報，2006 (3): 18-20.

[5]陳利國，曹小彥，黃輝，等.毛細(xì)管氣相色譜法直接測定食品中4種對羥基苯甲酸酯[J].食品與機(jī)械，2010(1): 67-69.

[6]GB／T 5009.31-2003 食品中對羥基苯甲酸酯類的測定[S].