蔡鳳萍

基層醫(yī)院HBsAg檢測方法的選擇

蔡鳳萍

目的 通過對HBsAg檢測方法的比較，選出適合基層醫(yī)院檢驗科使用的方法。方法 用酶聯(lián)免疫吸附試驗、化學(xué)發(fā)光免疫分析法、膠體金免疫層析實驗三種方法分別同時對本院住院的259例患者血清標本進行檢測。結(jié)果 酶聯(lián)免疫吸附試驗和膠體金免疫層析實驗的敏感度和特異度均低于化學(xué)發(fā)光免疫分析法，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論 酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測HBsAg靈敏度高、特異性好，適宜基層醫(yī)院應(yīng)用。

HBsAg; 酶聯(lián)免疫吸附試驗; 化學(xué)發(fā)光免疫分析法; 膠體金免疫層析實驗; 基層醫(yī)院

據(jù)世界衛(wèi)生組織報道，全球約20億人曾感染過HBV，其中3.5億人為慢性感染者，每年約有100萬人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原發(fā)性肝細胞癌。我國屬高流行區(qū)，一般人群HBsAg陽性率為9.09%，接種與未接種乙型肝炎疫苗人群HBsAg陽性率分別為4.51%和9.51%［1］。檢測HBsAg在該類疾病的預(yù)防、診斷及控制的過程中是重要的依據(jù)。然而，由于試劑的敏感性及特異性等指標的差異，部分HBsAg滴度表達很低的標本，不同方法測定的結(jié)果也有所差異，造成一定的漏診和誤診，甚至引發(fā)醫(yī)患矛盾和醫(yī)療糾紛［2］。為了找到一種適合基層醫(yī)院應(yīng)用的方法，筆者對三種方法進行了試驗觀察，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 血清標本 血清標本選自本院住院的患者共259例，其中已確診的乙肝患者126例，健康對照133例。

1.2 試劑與儀器 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)試劑由上?？迫A生物工程有限公司提供，膠體金免疫層析實驗(GICA)試紙條由藍十字生物藥業(yè)(北京)有限公司提供，化學(xué)發(fā)光免疫分析法(CLIA)試劑由羅氏生物診斷產(chǎn)品(上海)有限公司提供及Rodche170發(fā)光儀。

1.3 方法 259份標本用三種方法同步進行檢測，均嚴格按照試劑盒說明書及儀器操作規(guī)程進行操作。

1.4 檢測結(jié)果評價標準 ELISA以肉眼觀察，以陰、陽性對照孔為參照，有顏色者為陽性。CLIA以超過正常參考值為陽性，正常參考值以內(nèi)為陰性。GICA以在檢測線和質(zhì)控線位置上各出現(xiàn)一條紫紅色條帶為陽性結(jié)果，僅質(zhì)控線位置上出現(xiàn)一條紫紅色條帶為陰性結(jié)果，質(zhì)控線位置上沒有紫紅色條帶為無效結(jié)果。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用PEMS 3.1醫(yī)學(xué)統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行處理，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

對三種方法所測得結(jié)果進行統(tǒng)計分析，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。在126例陽性標本檢測中，CLIA的靈敏度最高(98.4%)，特異度為98.5%;ELISA的靈敏度為97.6%，特異度為95.5%;GICA的靈敏度為93.6%，特異度為97.0%。見表1。

表1 三種方法測得259份血清HBsAg結(jié)果

3 討論

GICA是用膠體金標記技術(shù)和蛋白質(zhì)層析技術(shù)結(jié)合的以微孔濾膜為載體的快速的固相膜免疫分析技術(shù)，交聯(lián)抗HBs單克隆抗體，與待檢血清中HBsAg結(jié)合，形成雙抗體夾心一步法測定方法，簡便快捷，標本隨到隨做，能滿足獻血員篩查以及急診患者的需要，無需儀器，但假陰性率較高，有報道顯示，對于全血標本，由于血細胞的干擾，GICA的檢測限值更高，只能達到 2 ～5 ng/ml［3］，易引起不必要的醫(yī)患糾紛，而且成本較高，在基層醫(yī)院不適宜推廣應(yīng)用。

CLIA是將發(fā)光分析和免疫反應(yīng)相結(jié)合而建立起來的一種新的檢測微量抗原或抗體的新型標記免疫分析技術(shù)。它兼有發(fā)光分析的高靈敏性和抗原抗體反應(yīng)的高特異性，無放射性污染，是近年來發(fā)展較快的新一代標記免疫分析技術(shù)。此方法靈敏度和特異度均高于其他兩種方法，操作起來也很方便，但其試劑成本貴，也需要特殊儀器，更適宜標本量較多的單位使用，絕大多數(shù)的基層醫(yī)院不適宜推廣和應(yīng)用。

ELISA基本原理是將抗體(抗原)包被在固相表面后，按不同步驟加入待測抗原(抗體)和酶標抗體(抗原)，經(jīng)充分反應(yīng)再洗滌，最后加底物，根據(jù)酶對底物催化的顯色反應(yīng)程度，而對標本中的抗原(抗體)進行定性或定量。此方法靈敏度和特異性均較好，操作也不繁瑣，成本低廉，為實驗室所喜愛，是目前各實驗室應(yīng)用最廣泛的HBsAg檢測方法［4］，也更適合在基層醫(yī)院普及和應(yīng)用。

本文通過對三種方法的實驗觀察，認為ELISA檢測HBsAg因其診斷指標較理想(靈敏度和特異度均較好)，質(zhì)量穩(wěn)定，試劑成本低，操作也簡便，較適合基層醫(yī)院應(yīng)用。

［1］倪語星.臨床微生物學(xué)與檢驗［M］.第4版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2007:445.

［2］張瑞青，尹艷霞，楊聰慧.常用乙型肝炎血清學(xué)標志物的意義及臨床評價［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2010，19(22):2827 －2827.

［3］刑培清，溫濤，方建華，等.膠體金免疫層析法檢測HBsAg在無償獻血中的應(yīng)用研究［J］.河南醫(yī)學(xué)研究，2003，12(1):17 －19.

［4］許倩.HBsAg檢測的膠體金法與ELISA法效果比較［J］.中外醫(yī)療，2008，27(13):107.

10.3969/j.issn.1674 －4985.2012.06.042

225401江蘇省泰興市腫瘤醫(yī)院

蔡鳳萍

2011－12－20)

(本文編輯:梅宏偉)