劉莉 馬萍 岳宗相 孟衍健 賴宇 蒲瑋

解脲支原體感染對男性不育患者精液參數(shù)的影響

劉莉 馬萍 岳宗相 孟衍健 賴宇 蒲瑋

目的 觀察不育患者中支原體感染對常規(guī)精液分析參數(shù)和精子細胞膜滲透性的影響。方法 374例男性不育患者根據(jù)精液支原體培養(yǎng)結(jié)果分為陽性和陰性兩組，比較兩組精液參數(shù)。結(jié)果 兩組間常規(guī)精液參數(shù)無差異。結(jié)論 不育男性生殖道支原體感染可能對常規(guī)精液分析參數(shù)沒有明顯的影響。

解脲支原體; 男性不育; 精液常規(guī)參數(shù)

男性不育的流行病學(xué)調(diào)查顯示，男性不育發(fā)病率日趨增高，男性泌尿系慢性感染是導(dǎo)致男性不育不容忽視的重要因素之一［1］。生殖道感染可引起患者精液量、精子密度、精子活力、活率明顯下降，使精子畸形率明顯增高［2］。其中，解脲支原體(UU)慢性感染者由于無明顯主觀癥狀，具有臨床隱匿性而容易被臨床醫(yī)生和患者忽略。有報道顯示，男性不育患者精液中解脲支原體感染率達到40.5% ～48.9%［3］，若解脲支原體感染治療不徹底，可引起睪丸內(nèi)曲細精管廣泛病變，導(dǎo)致生精功能降低并引起精子形態(tài)和功能的改變，造成不育。但是，UU影響生育的機制仍不明確，對精子的研究多局限于UU感染的不育患者與健康人之間研究分析，不足以證明UU對精子的作用機理。為探討UU對精子是否存在負面影響和損傷，筆者對374例不育男性進行了回顧性觀察以了解解支原體感染是否對精液分析參數(shù)產(chǎn)生影響，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 374例標(biāo)本來自2008～2011年本校附屬第二醫(yī)院生殖中心就診的患者，年齡20～46歲，平均33歲，不育時間1～10年，平均3年。不育診斷標(biāo)準(zhǔn):夫婦同居12個月以上，性生活正常，未采取任何避孕措施，未使女方受孕者。無外傷及遺傳性疾病家族史，無性功能障礙病史，體檢未發(fā)現(xiàn)有明顯的睪丸、附睪及輸精管異常，無精癥患者被排除在外。根據(jù)精液UU培養(yǎng)結(jié)果不同分為陰性組和陽性組。

1.2 標(biāo)本采集 受檢者禁欲2～7 d，患者取精前排尿，消毒外生殖器及雙手，采用手淫法采集精液于無菌杯中。標(biāo)本采集后，立即置于37℃孵箱，待液化后分別進行精子密度、活率、活力及功能檢測，同時行解脲支原體培養(yǎng)檢測。

1.3 檢測指標(biāo)

1.3.1 精液相關(guān)參數(shù)分析 包括精子密度(百萬/ml)、活力、活動率(前向運動精子、C、D級精子、曲線運動速度、直線運動速度、前向性、直線性、側(cè)向擺動幅度)，采用計算機輔助精液分析儀(CASA，偉力)分析。

1.3.2 精子形態(tài)分析及其他 采用WHO(第4版)精液分析手冊推薦的改良巴氏染色方法進行精子涂片染色;鏡下觀察計數(shù)精子≥200個精子/樣本，按照WHO標(biāo)準(zhǔn)鏡下評判并計算正常精子百分率;用于檢測精子存活率的伊紅－Y染色方法亦按照WHO(第4版)手冊推薦的方法進行。

1.3.3 解脲支原體檢測 按照解脲支原體培養(yǎng)試劑盒(珠海迪爾生物工程公司)操作說明書進行操作。無菌取100 μl精液于支原體培養(yǎng)液中，CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每24 hr觀察直至接種后72 hr，結(jié)果判定。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件包對數(shù)據(jù)進行處理分析，計量資料用(±s)表示，組間比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

374例不育患者精液標(biāo)本，檢測出UU陽性194例為陽性組，占總標(biāo)本51.9%;檢出UU陰性180例為陰性組，占總標(biāo)本48.1%。

2.1 精子濃度、存活率、圓細胞、正常精子形態(tài)、精子活力比較 解脲支原體陽性組精子濃度、存活率、圓細胞、正常精子形態(tài)、精子活力各級(a+b，c，d)與陰性組精子濃度、存活率、圓細胞、正常精子形態(tài)、精子活力各級(a+b，c，d)相比較，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，見表1。

2.2 精子運動速度、直線性及運動側(cè)向擺動幅度情況比較 解脲支原體陽性組精子運動速度、直線性及側(cè)向擺動幅度情況與陰性組精子運動速度、直線性及側(cè)向擺動幅度相比較，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，見表2。

表1 精子濃度、存活率、圓細胞、形態(tài)、各級精子活動度比較(±s)

表1 精子濃度、存活率、圓細胞、形態(tài)、各級精子活動度比較(±s)

注:與陽性組比較，*P＞0.05

組別 例數(shù) 精子濃度(×106/ml)存活率(%)圓細胞(×106/ml)正常形態(tài)精子(%)前向運動精子［(a+b)%］C級精子(%)D級精子(%)前向性(STR)陽性組 194 47.07±3.38 66.86±14.19 0.47±1.20 4.91±5.38 46.49±14.19 12.55±5.15 41.02±14.63 73.12±7.44陰性組 180 45.76±3.41* 64.92±17.22*0.38±0.61*4.81±5.09*43.82±16.38* 11.68±5.20* 44.50±17.71* 73.33±8.32*

表2 精子運動速度、直線性及側(cè)向擺動幅度情況比較(±s)

表2 精子運動速度、直線性及側(cè)向擺動幅度情況比較(±s)

注:與陽性組比較，*P＞0.05

組別 例數(shù) 直線運動速度(VSL)(μm/s)直線性(LIN)曲線運動速度(VCL)(μm/s)側(cè)向擺動幅度(ALH)(μm)陽性組 194 25.69±6.18 69.04±7.3037.14±7.85 4.10±3.25陰性組 180 25.22±6.24* 68.74±10.32* 36.84±8.42* 3.74±0.90*

3 討論

目前，我國處于育齡期中大約有3500萬夫婦患有不孕不育癥，其中，由于男性因素者占55%左右［4］。在影響男性生育功能的眾多復(fù)雜因素中，慢性生殖道感染最備受關(guān)注，尤其是UU感染，有報道發(fā)現(xiàn)在男性不育精液中UU陽性檢出率達48.7%［5］，本文報道(51.9%)略高于以往報道，可能是因為對象的選擇更為嚴格。

支原體是屬于原核細胞型微生物。是一類缺乏細胞壁，呈高度多形性，能通過除菌濾器，屬于人體條件致病菌。解脲支原體屬于支原體科原體屬中的一個種類，在人類生殖道諸多種支原體感染中為最常見的種類。解脲支原體檢測被用作為男性生殖道感染和男性不育病因診斷中的一個常規(guī)檢查項目。但是，支原體感染對男性生育力的影響與否，以及其對男性精子的作用機理一直存在著爭議［6，7］。

關(guān)于解脲支原體對精子損傷的機理也有探討。研究證明支原體可附著于精子頭部、尾部，改變精子形態(tài)［8］，還可以通過誘導(dǎo)機體產(chǎn)生抗精子抗體，使精子發(fā)生凝集現(xiàn)象，影響精子活力，干擾精子的運行［9］;支原體代謝產(chǎn)生的有毒物質(zhì)，如溶神經(jīng)支原體能產(chǎn)生神經(jīng)毒素，引起細胞膜損傷;脲原體含有尿素酶，可以水解尿素產(chǎn)生大量氨，對血睪屏障破壞，干擾睪丸曲細精管生精細胞，其產(chǎn)生神經(jīng)氨酸酶樣物質(zhì)可干擾精子與卵子的結(jié)合導(dǎo)致男性生育力下降。研究顯示，生殖道支原體感染可能導(dǎo)致生殖細胞凋亡增加［10］，同樣報道支原體引起生精細胞凋亡增加的結(jié)果也見于動物實驗［11］。除此以外UU感染可以導(dǎo)致精漿的活性氧水平異常增加從而引起細胞膜的脂質(zhì)過氧化和膜流動性降低［12］，從而降低精子的受精功能。

本研究觀察了374例不育患者，按照精液支原體培養(yǎng)結(jié)果分為陽性和陰性兩組，對兩組間的精液常規(guī)分析指標(biāo)進行了比較。結(jié)果顯示，在不育男性患者中，泌尿生殖道解脲支原體感染陽性組與解脲支原體陰性組之間精子濃度、精子存活率、精液中圓細胞計數(shù)及正常形態(tài)精子百分率、前向運動精子、精子運動參數(shù)比較均未見明顯差異。對常規(guī)精液分析參數(shù)的觀察結(jié)果與國內(nèi)部分前期報道有所不同［13，14］。但即使在解脲支原體對精液指標(biāo)產(chǎn)生不利影響的報道中，各家文獻中受影響的精子質(zhì)量指標(biāo)也存在較大的差異，如Zhang等［15］報道UU可導(dǎo)致精子形態(tài)發(fā)生改變以及精液中白細胞計數(shù)增加，而Wang等［7］觀察結(jié)果顯示出感染者精液粘稠度增高、精液pH降低以及精子濃度降低。Ochsendorf［16］報道生殖道UU感染可能影響精子的活動能力和精子的DNA濃縮。相反，與本觀察結(jié)果一致，未能觀察到脲支原體陽性感染與陰性者之間存在差異的報道也見于諸多文獻，Al Sweih等［17］既未觀察到生殖道支原體感染率在不育與生育男性之間存在差異，也未觀察到感染組與非感染組之間存在精液質(zhì)量的差異。其他相似的結(jié)果見于Günyeli等［18］和Andrade－Rocha等［19］的報道。筆者認為，這些差異的產(chǎn)生可能與觀察對象的選擇、所用的支原體檢測方法，甚至與精液分析結(jié)果的準(zhǔn)確性等都有關(guān)。

本研究在對不育患者支原體感染陽性組和陰性組精液常規(guī)參數(shù)比較無明顯差異。因而，筆者認為，男性生殖道或生殖腺解脲支原體感染究竟對男性生育力的負面影響是否存在，抑或感染對精子的損傷是否表現(xiàn)在常規(guī)精液分析參數(shù)，值得進一步探討。嚴格的臨床對象及設(shè)立對照可能是獲得客觀結(jié)果的關(guān)鍵。

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The influence of Ureaplasma urealyticum infection on semen parameters

LIU Li，MA Ping，YUE Zong－xiang，et al.Chengdu university of TCM，Chengdu610000，China

ObjectiveTo observe the influence of Ureaplasma urealyticum(Uu)infection on conventional semen in the infertility patients.MethodsUu culture of semen samples from 374 cases of infertile males were conducted，and routine semen were compared between Uu positive and negative groups.ResultsNo significant difference of the semen parameters between the two groups was observed.ConclusionUu infection in the male reproductive duct may not influences routine semen parameters.

Ureaplasma urealyticum;Male infertility;Semen analysis

10.3969/j.issn.1674 －4985.2012.06.004

610000成都中醫(yī)藥大學(xué)

劉莉

2012－01－06)

(本文編輯:梅宏偉)