崔延義，石愛平，許 寧＊，金美善，張小軍，汪 巖＊

（吉林大學(xué) 白求恩第一醫(yī)院1.泌尿外科；2.普外科；3.病理科，吉林 長春 130021）

S100A8在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)及其臨床意義

崔延義1，石愛平2，許 寧1＊，金美善3，張小軍1，汪 巖1＊

（吉林大學(xué) 白求恩第一醫(yī)院1.泌尿外科；2.普外科；3.病理科，吉林 長春 130021）

目的 探討S100A8在膀胱移行細(xì)胞癌（BTCC）組織中的表達(dá)及其臨床意義。方法應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測68例BTCC和10例癌旁正常膀胱組織中S100A8蛋白的表達(dá)，并分析其與BTCC臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果S100A8蛋白在BTCC組織中表達(dá)陽性率為55.9%（38／68），10例癌旁正常膀胱組織中表達(dá)均為陰性，兩組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；在低度惡性傾向尿路上皮乳頭狀瘤＋低分級BTCC組織中表達(dá)陽性率為29.2%（7／24），高分級BTCC組織中表達(dá)陽性率為70.5%（31／44），兩組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；在pTa-pT1期和pT2－pT4期表達(dá)陽性率分別為46.9% （23／49）和78.9%（15／19），兩組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；在復(fù)發(fā)性BTCC組織和初發(fā)性BTCC組織中表達(dá)陽性率分別為72.7%（16／22）和47.8%（22／46），兩組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論S100A8蛋白表達(dá)陽性率在BTCC組織中明顯高于癌旁正常膀胱組織，其表達(dá)與BTCC的病理分期、分級呈正相關(guān)，隨病理分期、分級的增高，S100A8蛋白表達(dá)陽性率增高，提示S100A8蛋白的表達(dá)與BTCC的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。檢測S100A8蛋白有助于BTCC預(yù)后的評估。

膀胱移行細(xì)胞癌；S100A8；免疫組織化學(xué)

（ChinJLabDiagn，2012，16：0234）

S100A8蛋白與人類多種腫瘤有關(guān)，如乳腺癌、甲狀腺癌、胃癌、結(jié)直腸腺癌、胰腺癌、前列腺腺癌，食管 鱗 狀 細(xì) 胞 癌、宮 頸 鱗 狀 細(xì) 胞 癌 等［1－7］。但S100A8在膀胱移行細(xì)胞癌（BTCC）中的表達(dá)及其臨床意義的研究，目前國內(nèi)尚未見報道。我們采用免疫組織化學(xué)方法檢測68例膀胱移行細(xì)胞癌和10例癌旁正常膀胱組織中S100A8蛋白的表達(dá)，并分析其與膀胱移行細(xì)胞癌臨床病理特征的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 臨床資料選取吉林大學(xué)第一醫(yī)院在2008年12月－2010年12月期間，手術(shù)治療的膀胱移行細(xì)胞癌患者68例蠟塊標(biāo)本，男51例，女17例；年齡35－86歲，平均64歲。其中膀胱全切患者15例，經(jīng)尿道膀胱腫瘤電切除患者53例。術(shù)后均經(jīng)病理證實為BTCC。入組標(biāo)準(zhǔn)：①腫瘤組織直徑大于1.0cm，②無其它腫瘤病史。68例BTCC病理分級根據(jù)WHO 2004分級標(biāo)準(zhǔn)：低度惡性傾向尿路上皮乳頭狀瘤（papillary urothelial neoplasms of low malignant potential，PUNLMP）6例；低分級18例；高分級44例。病理分期根據(jù)國際抗癌協(xié)會2009TNM分期標(biāo)準(zhǔn)：pTa 28例；pT121例；pT211例；pT36例；pT42例。非肌層浸潤性（pTa-pT1）49例，肌層浸潤型（pT2－pT4）19例。其中復(fù)發(fā)性膀胱癌22例。同時選取膀胱全切除標(biāo)本距腫瘤邊緣2 cm以上，經(jīng)病理證實為正常膀胱組織10例作為對照組。每個石蠟標(biāo)本切片3張，4μm厚，備染色。陽性對照為宮頸癌蠟塊標(biāo)本3例，取自我院病理科。

1.2 試劑兔抗人／小鼠S100A8單克隆抗體購自美國Epitomics公司。UltraSensitive TM S-P超敏試劑盒（鼠／兔）（包含內(nèi)源性過氧化酶阻斷劑，動物非免疫血清（羊），生物素標(biāo)記的羊抗鼠／兔IgG，鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化酶）與DAB顯色試劑盒購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。

1.3 方法采用免疫組織化學(xué)SP法檢測，染色步驟按試劑盒說明進(jìn)行。S100A8抗體稀釋濃度為1∶100。以宮頸癌組織作陽性對照，以PBS液代替一抗作陰性對照。

1.4 判斷標(biāo)準(zhǔn)陽性結(jié)果為比較鮮明的棕黃色染色，充滿胞漿，彌散分布。每張切片隨機(jī)選取5個高倍視野，每個高倍視野計數(shù)100個癌細(xì)胞，計數(shù)陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)并進(jìn)行評分：0分（0%），1分（1－25%），2分 （26－50%），3 分 （51－75%），4 分 （76－100%）；根據(jù)染色強(qiáng)度評分：0分為未著色，1分為輕度色，2分為中度色，3分為重度著色。染色強(qiáng)度評分與陽性細(xì)胞數(shù)評分相乘，0－4分為陰性表達(dá)，5－12分為陽性表達(dá)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。采用χ2連續(xù)校正檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

免疫組織化學(xué)顯示，S100A8蛋白表達(dá)陽性染色主要定位于腫瘤細(xì)胞質(zhì)中，為細(xì)胞質(zhì)彌漫性淡黃色或棕黃色，如圖1、2。在癌旁正常膀胱組織中表達(dá)陰性，如圖3。S100蛋白表達(dá)與BTCC臨床、病理的關(guān)系見表1。S100A8蛋白表達(dá)陽性率的比較在BTCC組織和癌旁正常膀胱組織比較，在非肌層浸潤性BTCC和肌層浸潤性BTCC組織比較，在低度惡性傾向尿路上皮乳頭狀瘤＋低分級BTCC組織和高分級BTCC組織比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01或P＜0.05）。隨病理分期、分級增高，S100A8蛋白表達(dá)陽性率增高。在復(fù)發(fā)性BTCC組織和初發(fā)性BTCC組織比較，在不同性別間、不同腫瘤數(shù)目間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

圖1 免疫組化方法，S100A8蛋白在BTCC組織中高表達(dá)400×

圖2 免疫組化方法，S100A8蛋白在BTCC組織中低表達(dá)400×

圖3 免疫組化方法，S100A8蛋白在癌旁正常膀胱組織中表達(dá)陰性200×

3 討論

S100A8蛋白是S100蛋白家族成員之一，由93個氨基酸組成，分子質(zhì)量為10835Da，常以二聚體形式存在。Yao、Tolson等［8，9］研究發(fā)現(xiàn)，S100A8蛋白在膀胱癌中表達(dá)上調(diào)。本實驗結(jié)果顯示：S100A8蛋白在BTCC組織中表達(dá)陽性率為55.9%，10例癌旁正常膀胱組織中表達(dá)均為陰性，兩組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。與 Yao、Tolson等報道相一致。提示S100A8蛋白表達(dá)可能與BTCC發(fā)生有關(guān)。

Kim 等［10，11］通過研究S100A8在浸潤性膀胱癌和非浸潤性膀胱癌中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)S100A8高表達(dá)與腫瘤的侵襲性有關(guān)，提示S100A8高表達(dá)是腫瘤向浸潤性進(jìn)展的分子指標(biāo)之一。Ha等［12］研究發(fā)現(xiàn)非浸潤性膀胱癌患者中有浸潤進(jìn)展的S100A8mRNA水平明顯高于沒有浸潤進(jìn)展的膀胱癌患者，S100A8是評價膀胱癌預(yù)后的獨立參數(shù)。Minami等［13］研究表明S100A8在肌層浸潤性膀胱癌與非肌層浸潤性癌的表達(dá)陽性率分別為38.3%、5.9%，兩組比較（P＜0.015），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。本實驗結(jié)果顯示：S100A8蛋白在pTa-pT1期和pT2－pT4期表達(dá)陽性率分別為46.9%和78.9%，兩組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。與文獻(xiàn)報道相一致。提示檢測S100A8蛋白的表達(dá)水平對BTCC患者的預(yù)后評估有參考價值。

表1 S100A8蛋白表達(dá)與BTCC臨床、病理的關(guān)系［例（%）］

Minami等［13］研究表明S100A8蛋白在 G1＋G2與G3膀胱癌組織中表達(dá)陽性率分別為21.6%、40.0%，兩組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。本組研究對BTCC的病理分級采用了WHO 2004病理分級標(biāo)準(zhǔn)，在低度惡性傾向尿路上皮乳頭狀瘤＋低分級BTCC與高分級BTCC中S100A8蛋白表達(dá)陽性率分別為29.2%、70.5%，兩組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。與Minami等文獻(xiàn)報道結(jié)果不一致，目前國內(nèi)外尚未見更多相關(guān)文獻(xiàn)報道，其結(jié)果有待進(jìn)一步研究證實。

本研究結(jié)果還顯示：S100A8蛋白表達(dá)陽性率在復(fù)發(fā)性BTCC和初發(fā)性BTCC中分別為72.7%、47.8%，在復(fù)發(fā)性BTCC中表達(dá)有升高趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)意義。目前國內(nèi)外尚未見相關(guān)文獻(xiàn)報道，本實驗結(jié)果，尚需進(jìn)一步研究證實。

膀胱癌的復(fù)發(fā)與浸潤進(jìn)展是臨床治療中兩大亟待解決的課題。目前臨床工作中主要依據(jù)腫瘤的病理分級和分期預(yù)測腫瘤的預(yù)后，而病理分級和分期對預(yù)測膀胱癌的生物學(xué)行為存在一定的局限性。本研究結(jié)果提示S100A8蛋白的表達(dá)與BTCC的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。因此，我們認(rèn)為，進(jìn)一步探討S100A8導(dǎo)致BTCC發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制，有望成為BTCC預(yù)后評估新的分子指標(biāo)，也可能為BTCC的靶向治療提供新的靶點。

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Expression of S100A8protein in human bladder cancer and its clinical significance

CUIYan-yi，SHIAi-ping，XUNing，etal.（TheFirstClinicalCollegeofNormanBethuneMedicalDivision，JilinUniversity，Changchun130021，China）

ObjectiveTo investigate the expression of S100A8protein in transitional cell carcinoma of bladder（BTCC）and analyze its clinical significance.MethodsThe expression of S100A8protein in 68cases of BTCC and 10 cases of adjacent normal bladder tissues was detected by immunohistochemical staining and its correlations to clinic pathologic features was then analyzed.ResultsExpression of S100A8protein was higher in BTCC than in adjacent normal bladder tissues（55.9%versus 0%，P＜0.01）.S100A8protein expression rates were 78.9%and 46.9%in pT2－pT4BTCC and pTa-pT1BTCC（P＜0.05），while 29.2%and 70.5%in PUNLMP plus low-grade BTCC and highgrade BTCC（P＜0.01），respectively.There was no difference between recurrence and non-recurrence （72.7%versus47.8%，P＞0.05）.ConclusionThe expression of S100A8protein was higher in BTCC than in the adjacent normal tissues，which was associated with pathologic grade and Stage of BTCC.The expression level of S100A8protein was getting higher with the increase of tumor pathology grade and stage.We might speculate that S100A8protein was correlated with the currency and progression of BTCC.The detection of the expression of S100A8protein is in favor of prognostic evaluation of bladder cancer.

Bladder cancer；S100A8；Immunohistochemistry

R737.14

A

1007－4287（2012）02－0234－03

＊通訊作者

2010－11－13）