王慶敏，唐 瑛，時(shí)粉周，沈 俊，劉秋紅，戴圣龍

哺乳動(dòng)物近日節(jié)律的研究進(jìn)展

王慶敏，唐 瑛，時(shí)粉周，沈 俊，劉秋紅，戴圣龍

近日節(jié)律是一種以近似24 h為周期的節(jié)律，起著調(diào)控機(jī)體生命活動(dòng)的作用。它主要依賴中樞振蕩器、外周振蕩器和外界的因素來共同維持其正常運(yùn)行。在外界環(huán)境因素(導(dǎo)引因子)的影響下，近日節(jié)律能夠被重新設(shè)置，使哺乳動(dòng)物自身機(jī)體活動(dòng)與外界同步、處于最佳狀態(tài)。這些導(dǎo)引因子包括光、食物、社會(huì)因子、某些化學(xué)物質(zhì)(如褪黑素、激素等)。本文綜述了這一進(jìn)展，并展望導(dǎo)引近日節(jié)律在各領(lǐng)域應(yīng)用的前景。

近日節(jié)律;導(dǎo)引因子;哺乳動(dòng)物

人類經(jīng)過長(zhǎng)時(shí)間、大量的科學(xué)實(shí)驗(yàn)與觀察證實(shí)，隨著漫長(zhǎng)的空間、時(shí)間和物質(zhì)的不斷演化，地球上的生物體在適應(yīng)這種演化的過程中，從單個(gè)細(xì)胞到高等動(dòng)植物以及人類自身，均存在著按照一定規(guī)律運(yùn)行的、周期性的生命活動(dòng)現(xiàn)象，這種生命活動(dòng)現(xiàn)象經(jīng)過大量的實(shí)驗(yàn)研究證明是明顯的節(jié)律性活動(dòng)，稱為生物節(jié)律。根據(jù)周期的長(zhǎng)短，生物節(jié)律可分為近日節(jié)律(又稱晝夜節(jié)律，circadian rhythm)、超日節(jié)律(ultradian rhythm)和亞日節(jié)律(infradian rhythm)。近日節(jié)律通常是指周期在24 h左右的生物節(jié)律。

近日節(jié)律是內(nèi)源性的，它是生物體在進(jìn)化過程中為抵御自然環(huán)境，如射線、氣溫、光照等周期變化的影響，而逐漸形成機(jī)體內(nèi)在的生物節(jié)律，并表現(xiàn)出與自然環(huán)境的周期性變化相似。人體的許多生命活動(dòng)，如睡眠與覺醒、饑餓與口渴、血壓、心臟收縮次數(shù)、體溫、激素水平、免疫系統(tǒng)的活動(dòng)等都隨著白天和黑夜的交替而發(fā)生著變化，呈現(xiàn)出固有的近日節(jié)律現(xiàn)象。近日節(jié)律的破壞會(huì)導(dǎo)致機(jī)體功能紊亂及疾病發(fā)生，如紊亂的近日節(jié)律會(huì)增加女性乳腺癌的發(fā)病危險(xiǎn)。有些節(jié)律一旦遭到破壞，生命就要停止。

1 哺乳動(dòng)物近日節(jié)律生物學(xué)基礎(chǔ)

近日節(jié)律是生物體生命活動(dòng)的固有屬性和內(nèi)在規(guī)律?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)機(jī)體具有產(chǎn)生調(diào)控近日節(jié)律的系統(tǒng)和機(jī)制。這一系統(tǒng)的核心是一組能自律地產(chǎn)生震蕩信號(hào)的腦內(nèi)結(jié)構(gòu)，即震蕩器(oscillator)［1］。其中起主導(dǎo)作用的是起搏器(pace-maker)。震蕩器通過特定的感受器和感覺傳入通路，接受環(huán)境授時(shí)因子(zeitgeber)的導(dǎo)引作用，使其與環(huán)境節(jié)律同步;同時(shí)，它發(fā)出震蕩信號(hào)(周期性變化的神經(jīng)信號(hào)或體液因素)去影響其他各生理機(jī)能系統(tǒng)，使它們的活動(dòng)按一定的節(jié)律進(jìn)行。

1.1 中樞振蕩器

不同種屬的生物，其中樞起搏器結(jié)構(gòu)及震蕩機(jī)制不盡相同。對(duì)于哺乳類動(dòng)物節(jié)律的組成和機(jī)能原理，Moore等提出多震蕩器系統(tǒng)假說(multiple oscillator system，MOS)，認(rèn)為哺乳類動(dòng)物的生物節(jié)律是由多級(jí)震蕩器的協(xié)同作用所產(chǎn)生和調(diào)制的，并指出視交叉上核(SCN)是此震蕩器的重要成分，稱為主震蕩器［2-3］。該處的神經(jīng)元中一組與生物節(jié)律有關(guān)的基因(稱為近日鐘基因)在自身表達(dá)調(diào)控形成一個(gè)自激振蕩的環(huán)路而不斷的自激振蕩下去，這種自激振蕩過程完成一個(gè)周期大約要24 h，形成了近日節(jié)律，然后通過傳出途徑將這種自激振蕩產(chǎn)生的近日節(jié)律傳導(dǎo)出去，形成機(jī)體各種生物變量(如行為、生理、代謝等生物變量)的近日節(jié)律。環(huán)境中的各種授時(shí)因子需要通過它的耦聯(lián)作用才能產(chǎn)生致同步作用。在體和離體實(shí)驗(yàn)均已證實(shí)SCN神經(jīng)元呈周期約為24 h的晝夜性變化。光信號(hào)和某些化學(xué)物質(zhì)(如褪黑素等)可導(dǎo)引SCN的節(jié)律性活動(dòng)。因此，SCN又稱為節(jié)律的“中樞起搏點(diǎn)”。

1.2 松果體(pineal gland，PG)

PG是近日節(jié)律的神經(jīng)內(nèi)分泌轉(zhuǎn)換器，主要通過PG細(xì)胞合成和分泌的褪黑素(melatonin，Me1)參與近日節(jié)律調(diào)控［4-5］。由于存在視交叉上核(SCN)-室旁核-PG的纖維通路，Mel的合成在SCN的調(diào)控下呈現(xiàn)明顯的晝低夜高節(jié)律性。Mel經(jīng)循環(huán)通路到達(dá)身體各個(gè)部位，與 Mel受體結(jié)合后，才能有效調(diào)節(jié)24 h時(shí)相效應(yīng)。Mel可分布于包括SCN在內(nèi)的廣大范圍的中樞神經(jīng)系統(tǒng)、視網(wǎng)膜、副淚腺、腸道、肝、腎、脾、性腺、胸腺、外周血細(xì)胞等，它不僅參與調(diào)節(jié)這些器官系統(tǒng)的功能，同時(shí)將外界光照周期信號(hào)更為有效地以近日節(jié)律的形式輸送到體內(nèi)各個(gè)組織和器官，所以PG被認(rèn)為是神經(jīng)內(nèi)分泌轉(zhuǎn)換器。而Mel又可通過SCN中Mel受體反過來作用于SCN，從而調(diào)節(jié)機(jī)體的近日節(jié)律。所以Mel被稱為內(nèi)源性的授時(shí)因子。PG中Mel的表達(dá)呈晝低夜高的趨勢(shì)，該表達(dá)趨勢(shì)可能與其內(nèi)的鐘基因(Clock、NAT、Per等)調(diào)控有關(guān)。

2 近日節(jié)律導(dǎo)引的研究

在自然環(huán)境調(diào)節(jié)下，生物體的活動(dòng)性總是與環(huán)境變化相同步，兩者間形成固定的聯(lián)系。近日節(jié)律雖然是內(nèi)源性產(chǎn)生的，但受環(huán)境因素的影響。研究表明，光照、溫度、飲食、社會(huì)因素、多種化學(xué)物質(zhì)(如激素、維生素、氨基酸、血清等)對(duì)近日節(jié)律都具有重新調(diào)節(jié)設(shè)置的作用［6-8］。當(dāng)機(jī)體受到環(huán)境中某些因素的刺激時(shí)，近日節(jié)律會(huì)發(fā)生一定的變化，主要是節(jié)律相位轉(zhuǎn)移，表現(xiàn)為超前或滯后。機(jī)體節(jié)律因外界環(huán)境刺激而發(fā)生的相位改變，稱為相位反應(yīng)。刺激因子性質(zhì)不同，影響相位反應(yīng)的方向(超前或遲后)和大小(相位移動(dòng)的時(shí)間長(zhǎng)短)不同。

2.1 近日節(jié)律導(dǎo)引機(jī)制研究

近年來研究發(fā)現(xiàn)，環(huán)境授時(shí)因子對(duì)近日節(jié)律的導(dǎo)引作用是通過兩種不同的方式實(shí)現(xiàn)的，一種是環(huán)境授時(shí)因子(如光暗周期等時(shí)間信息)通過視網(wǎng)膜的非成像感光系統(tǒng)—晝夜光感受系統(tǒng)，感受明暗周期光信號(hào)變化，并經(jīng)視網(wǎng)膜丘腦下部束(RHT)途徑作用于SCN，而對(duì)內(nèi)源性節(jié)律產(chǎn)生導(dǎo)引作用，這一模式稱為視網(wǎng)膜光性傳感模式(retinal photo transduction，RP)，通過這一途徑發(fā)揮導(dǎo)引作用的授時(shí)因子稱為光性授時(shí)因子。這一模式對(duì)內(nèi)源性節(jié)律導(dǎo)引的特點(diǎn)是光信息在受試者主觀夜間(subjective night)起作用，在夜間的前半期引起相位滯后，而在后半期引起相位超前。其傳入途徑是視網(wǎng)膜丘腦下部束(Pd-IT)，該束影響SCN的遞質(zhì)被認(rèn)為是興奮性氨基酸谷胺酸、天門冬胺酸。光周期是影響近日節(jié)律基因表達(dá)進(jìn)而調(diào)控生物節(jié)律的主要環(huán)境因子，它們對(duì)生物鐘基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制存在著保守性和特異性。

另一種模式是視網(wǎng)膜外的非光性時(shí)間信息，如社會(huì)因素、視網(wǎng)膜外的光刺激、食物、社會(huì)因子、藥物、特定的行為活動(dòng)等，對(duì)SCN的作用可能是通過視網(wǎng)膜外的途徑而實(shí)現(xiàn)，這種模式稱為視網(wǎng)膜外光傳感模式(extraocular photo transduction，EP)，這一途徑可能是經(jīng)神經(jīng)和體液光受體傳導(dǎo)(humoral photoreceports，HP)而實(shí)現(xiàn)的，外側(cè)膝狀體間小葉(intergeniculate leaftlet，IGL)在EP模式中的神經(jīng)傳導(dǎo)中起重要作用，IGL通過膝丘束(genicu lohypothalamic tract，GHT)作用于SCN。這一模式對(duì)內(nèi)源性節(jié)律導(dǎo)引作用與RP模式剛好相反，其作用主要在白天，在受試者主觀白天(subjective day)引起相位超前作用，在夜間，特別是在后半夜引起相位滯后。

2.2 近日節(jié)律的導(dǎo)引研究

2.2.1 光信息導(dǎo)引節(jié)律的研究

早在19世紀(jì)50年代，Pittendrigh就發(fā)現(xiàn)果蠅羽化在持續(xù)黑暗中沒有明顯的節(jié)律，然而，其節(jié)律可以被光誘導(dǎo)。通過單個(gè)短暫的脈沖光照，果蠅羽化出現(xiàn)明顯的節(jié)律。這是最早的有關(guān)光照調(diào)節(jié)近日節(jié)律的研究。隨后Pittendrigh和De-Coursey等測(cè)定了動(dòng)物近日節(jié)律對(duì)光照刺激相位反應(yīng)，并作出了相位反應(yīng)曲線，其相位反應(yīng)的模式為在主觀白天，對(duì)光線沒有明顯的反應(yīng)，稱為不應(yīng)區(qū);主觀夜間的早期給予光刺激可引起相位滯后，在主觀夜間的后期給予光刺激則引起相位超前。Lewy和他的同事們證明了明亮的白光在夜間能夠抑制人體Mel的分泌，使夜間人體Mel的水平與日間持平從而可以調(diào)節(jié)人體的近日節(jié)律，他們通過該原理來治療季節(jié)性情緒紊亂癥。后來，研究發(fā)現(xiàn)不同的光照波長(zhǎng)可以對(duì)Mel合成產(chǎn)生不同的影響，短波光源相對(duì)于長(zhǎng)波光源更容易影響人體的近日節(jié)律。Wright等［9］用不同波長(zhǎng)的LED的光源與標(biāo)準(zhǔn)光源分別對(duì)健康志愿者進(jìn)行夜間2 h的光照，次日收集唾液標(biāo)本，觀察其夜間唾液中Mel分泌的水平及時(shí)相變化。結(jié)果顯示，光刺激下可出現(xiàn)顯著的Mel分泌抑制，藍(lán)/綠LED光源產(chǎn)生最大抑制，這表明不同波長(zhǎng)的光對(duì)近日節(jié)律的影響效果不同。

人體在近日節(jié)律的生理變化中，體溫的變化是一個(gè)重要的方面。在夜間睡眠時(shí)人的核心溫度下降，而在白天覺醒時(shí)體溫則升高，研究者也常常通過檢測(cè)體溫來間接反映近日節(jié)律的變化。Morita和Tokura［10］的實(shí)驗(yàn)表明：人體在夜間睡眠前暴露于高色溫光源，能明顯抑制夜間體溫的下降和Mel分泌的升高，而同樣照度的低色溫的紅光抑制作用不明顯，這說明不同的光源色溫對(duì)近日節(jié)律的影響是不同的。在國(guó)外，利用光刺激來調(diào)節(jié)民航飛行員的近日節(jié)律、提高警覺性，從而來保障飛行任務(wù)的完成。美國(guó)科學(xué)家也利用光刺激來調(diào)節(jié)機(jī)體睡眠和近日節(jié)律，打算將該措施應(yīng)用于調(diào)節(jié)太空中宇航員的生物節(jié)律。

2.2.2 非光信息導(dǎo)引節(jié)律的研究

近10余年來時(shí)間生物學(xué)在非光性相位轉(zhuǎn)移方面研究進(jìn)展很大，人們發(fā)現(xiàn)一些藥物、食物、社會(huì)因子、某些新異的環(huán)境、特定的行為活動(dòng)等刺激都能導(dǎo)引節(jié)律相位的轉(zhuǎn)移［6-8］，其位相響應(yīng)曲線(PRC)與光性轉(zhuǎn)移迥然有別，主要表現(xiàn)為在受試對(duì)象主觀白天引起相位超前作用，在夜間，特別是后半夜呈現(xiàn)相位滯后。其中對(duì)于5-HT1A/7受體亞型激動(dòng)劑82-OHDPAT的研究較為成熟，Shibata等［11］證實(shí)82-OHDPAT導(dǎo)引的相位反應(yīng)與經(jīng)典光性反應(yīng)模式截然不同，呈典型的非光性反應(yīng)，表現(xiàn)為在主觀白天中午引起相位超前，在主觀夜間的后期引起相位滯后。是目前常用于研究非光性授時(shí)因子的經(jīng)典藥物。我國(guó)研究者開展了用針刺來調(diào)節(jié)近日節(jié)律的研究，魏焦祿等［12］的研究表明針刺是一種授時(shí)因子，可以引起金黃地鼠近日節(jié)律的相位改變，于CT6、CT9電針導(dǎo)引金黃地鼠自發(fā)活動(dòng)相位超前，而在CT18、CT21則使其相位遲后，其余時(shí)相點(diǎn)無明顯相位轉(zhuǎn)移作用。

3 展望

采用各種導(dǎo)引因子來導(dǎo)引人體的近日節(jié)律有著廣闊的應(yīng)用前景，如應(yīng)用在：時(shí)差綜合癥;輪班工作;抑郁癥;季節(jié)性情感障礙;特殊職業(yè)節(jié)律的導(dǎo)引，如航空航天專業(yè)、潛艇專業(yè)領(lǐng)域、航海領(lǐng)域(如長(zhǎng)航)等。在特殊職業(yè)中進(jìn)行節(jié)律的導(dǎo)引，主要目的在于通過節(jié)律的調(diào)節(jié)使機(jī)體內(nèi)部的節(jié)律與工作環(huán)境同步，從而保持人體的作業(yè)效率。

分子生物學(xué)的誕生把生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)從宏觀帶入了微觀世界，引起了生命科學(xué)的一場(chǎng)革命。在基礎(chǔ)理論研究方面，雖然目前近日節(jié)律的生物基礎(chǔ)已經(jīng)基本明確，但更深入的機(jī)制尚待進(jìn)一步闡明，如在中樞振蕩器和外周振蕩器中的近日節(jié)律基因如何被調(diào)控、其中存在哪些信號(hào)傳導(dǎo)通路等。這些都需要依賴日新月異的分子生物學(xué)手段來實(shí)現(xiàn)。

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R338.5

A

1009-0754(2012)01-0061-03

海軍醫(yī)學(xué)研究所所基金(10HY51)

200433 上海，海軍醫(yī)學(xué)研究所航空醫(yī)學(xué)研究室(王慶敏、時(shí)粉周、沈俊、劉秋紅、戴圣龍)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(唐瑛)

1.3 外周振蕩器

不僅下丘腦存在晝夜振蕩器，外周器官如肝、腎、淋巴結(jié)等均可表達(dá)一種或多種生物鐘基因，存在外周振蕩器。外周振蕩器自振蕩產(chǎn)生近日節(jié)律，但是外周的近日節(jié)律通常受中樞近日節(jié)律的調(diào)控而與中樞同步。

2011-04-08)

(本文編輯：林永麗)