樸順福

2例體檢人員乙型肝炎表面抗原檢測弱陽性反應(yīng)的分析

樸順福

資料與方法

1.一般資料:在近期在本院體檢的1000例人員中，有2例人員出現(xiàn)乙型肝炎表面抗原檢測弱反應(yīng)，采用的ELISA方法，顯示為陽性。該2例人員血、尿常規(guī)檢測正常，生化肝、腎功能指標均正常。2例人員不相信這次的檢測結(jié)果，要求進一步檢測。

2.評定方法:體檢人員再用ELISA方法復(fù)查，仍舊陽性。改用金標方法復(fù)查HBsAg，結(jié)果甲為陰性。工作人員又檢測了甲標本的HBV－DNA含量，結(jié)果為低于檢測值下線。而乙仍然是陽性。最后評定甲為陰性，乙為弱陽性。

分析:對弱反應(yīng)樣本作雙例復(fù)檢，復(fù)檢雙孔陰性報陰性，復(fù)檢雙孔陽性報陽性，復(fù)檢雙孔一陰一陽加做確認試驗?；蛘哌M行其他方式的檢測作為補充，或者H BsAg定量或者 H BV-DNA檢測來綜合分析報告［2］。

對甲人員的臨床原因進行分析，首先排除了試劑的問題，再次檢測，排除了操作的問題，最后進行風濕四項檢測時，發(fā)現(xiàn)甲人員的RF(+)，這使得陰性的標本產(chǎn)生了弱反應(yīng)，表現(xiàn)為陽性。

對乙人員的分析，最后依然被確定為HBsAg(+)，最后進行的H BsAg定量顯示了H BsAg低水平表達。以及H BV－DNA的表達，該患者并具有一定的傳染性。

討 論

乙型肝炎表面抗原檢查是最常用的檢驗乙型肝炎病原體的試驗。乙肝表面抗原(HBsAg)是乙肝病毒的外殼，對乙肝病毒DNA起到保護作用。單項乙肝表面抗原陽性并不能確定有沒有乙肝病毒的存在，因為很多表現(xiàn)單項乙肝表面抗原陽性者體內(nèi)病毒已經(jīng)完全清除，而有些人體內(nèi)仍可以檢測到乙肝病毒。當人體發(fā)現(xiàn)乙肝表面抗原了，這只能說明人體內(nèi)有乙肝病毒外殼，但是外殼里面有沒有乙肝病毒DNA還要通過乙肝PCR檢查來確定。

乙肝(乙型病毒性肝炎)表面抗原弱陽性第一種:就是表面抗原的血清轉(zhuǎn)換，也即乙肝(乙型病毒性肝炎)表面抗原陰轉(zhuǎn)，表面抗體陽轉(zhuǎn)。此時是恢復(fù)期的表現(xiàn)是好事。但是還要定期的復(fù)查，防止第二種情況的發(fā)生。乙肝(乙型病毒性肝炎)表面抗原弱陽性第二種:體內(nèi)的乙肝(乙型病毒性肝炎)病毒DNA發(fā)生變異，檢測不到大量的HBV－DNA的存在。而HBV卻在人體內(nèi)大量的復(fù)制，患者的肝功能會進一步的遭到破壞。

HBsAg的檢查方法很多，有瓊脂免疫擴散法、對流電泳法、反向被動血凝法(RPHA)、酶聯(lián)免疫法、固相放射免疫法等。但前二者靈敏度不夠，已很少用。RPHA法操作簡單快速，不需特殊儀器，靈敏度高于前二者，為目前應(yīng)用較多之方法，但其靈敏度與特異性仍不如酶聯(lián)免疫法，故將會被酶聯(lián)免疫法所取代。放射免疫法雖然靈敏、特異，但須同位素標記，試劑來源不足，不宜推廣［3－4］。

檢驗人員在利用ELISA法監(jiān)測HBsAg時要詳細閱讀試劑說明書及掌握ELISA法作業(yè)指導(dǎo)書的內(nèi)容。從加樣、洗板、加酶液、上酶標儀測試及最后判定結(jié)果［5］，其中每一步都得具有責任性強，嚴格每一步的操作規(guī)程。

乙肝表面抗原陽性說明機體已經(jīng)感染了乙肝病毒，屬于乙肝患者，需要根據(jù)患者的肝功能情況，乙肝病毒dna的情況以及肝臟受損情況等判斷乙肝病情輕重情況，從而及時采取適當?shù)脑\療措施。但在臨床上有不少的人員報道乙型肝炎表面抗原檢測有假陽性或者假陰性的結(jié)果。但對于體檢人群HBsAg的報告更應(yīng)謹慎，弱反應(yīng)標本產(chǎn)生的假陽性結(jié)果造成的誤診，可能會影響體檢人群身心健康。因此，對這些弱反應(yīng)標本的處理和報告必須引起檢驗工作者的重視。

酶標儀測得吸光度值(A)小于0.07為陰性，大于0.2為陽性，在0.07～0.2之間判讀為弱反應(yīng)。能導(dǎo)致弱反應(yīng)的原因有多種:①確實有一部分血清 H BsAg存在低水平表達狀態(tài);②一些內(nèi)源性干擾因素包括類風濕因子(RF)、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等和一些外源性干擾因素包括標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存時間過長和標本凝固不全等，這些因素可以使陰性的標本成為弱反應(yīng)標本甚至陽性標本;③由于試劑材料純度和來源不同，以及定性試劑檢測存在變異系數(shù)大等因素均會造成結(jié)果差異，也影響到弱反應(yīng)結(jié)果的報告［6－7］。

因此，建議HBsAg測定結(jié)果為弱反應(yīng)的標本，應(yīng)通過確認試驗來確定到底是陽性還是陰性，或者可采用H BsAg定量或者H BV－DNA檢測來綜合分析報告，復(fù)檢可以減少外源性干擾，復(fù)檢結(jié)果不一致的再做確認試驗［5］，其目的是要排除內(nèi)源性的干擾因素，得到最準確的結(jié)果，以對群眾的身心健康負責。

1 張家均.酶聯(lián)免疫吸附法測乙肝病毒表面抗原假陽性原因的分析及解決方法［J］.現(xiàn)代檢測醫(yī)學雜志，2005，20:88.

2 許斌，朱虎定.ELISA檢測HBsAg影響因素的探討［J］.臨床檢驗雜志，2000，18:232.

3 李金明.感染性疾病血清學檢驗中應(yīng)重視對弱反應(yīng)性標本的確認［J］.中華檢驗醫(yī)學雜志，2006，29(7):577-580.

4 張運洪，秦蘇，何靜波，等.ELISA法結(jié)合MEIA能有效檢測低水平 H BsAg［J］，臨床檢驗雜志，2002，20(2):103.

5 陳傳德，冷霜.ELISA一步法檢測HBsAg影響因素分析［J］.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2003，13(3):853.

6 肖征，周薇薇，徐雅萍，等.乙型肝炎表面抗原檢測中的偶然誤差及對策［J］.中華醫(yī)院感染學雜志，2003，13(3):292-294.

7 葉千紅，張麗霞.關(guān)于標本因素對ELISA檢測結(jié)果影響的分析［J］.中國實驗診斷學，2003，7:440-441.

133300 吉林省琿春市婦幼保健所

在體檢中，HBsAg檢測是最常規(guī)的體檢項目之一，其結(jié)果的準確性非常重要。HBsAg的檢查方法很多，有瓊脂免疫擴散法、對流電泳法、反向被動血凝法(RPHA)、酶聯(lián)免疫法、固相放射免疫法等，其中以酶聯(lián)免疫法的靈敏度與特異性較高，為目前應(yīng)用較多的方法［1］。但在測定中影響其結(jié)果的因素很多，可能會造成假陽性或假陰性的結(jié)果。觀察臨床常規(guī)檢測乙型肝炎表面抗原(HB sA g)中出現(xiàn)假陽性或者假陰性的原因以及探討相應(yīng)的解決辦法?，F(xiàn)就近期體檢中發(fā)現(xiàn)的2例假陽性結(jié)果分析如下。