趙利可

昆明市疾病預(yù)防控制中心，云南 昆明 650228

1 生物安全柜的結(jié)構(gòu)原理及作用

生物安全柜由箱體、過濾器、風(fēng)機(jī)系統(tǒng)、排氣管道及電器控制系統(tǒng)組成。它的作用是：提供對(duì)人員、樣品和環(huán)境的三重保護(hù)。

1.1 風(fēng)機(jī)系統(tǒng)

風(fēng)機(jī)在電器系統(tǒng)控制提供風(fēng)量維持恒定氣流流速。

1.2 過濾器

過濾器起到過濾細(xì)菌和灰塵顆粒的作用。目前常采用的是對(duì)0.3ìm塵埃粒子擁有截流效率為99.99%的HEPA高效過濾器，以及99.9998%的截流效率的ULPA超高效過濾器。后有更佳的過濾效率、更緊密的結(jié)構(gòu)和更大的單位過濾面積，可為工作區(qū)域提供相當(dāng)于ISO3級(jí)的潔凈度。

1.3 控制和警報(bào)系統(tǒng)

安全柜的控制系統(tǒng)用于監(jiān)控生物安全柜的各項(xiàng)操作數(shù)值，及時(shí)發(fā)現(xiàn)任何故障和誤操作，以聲光警報(bào)通知用戶采取措施，并自動(dòng)采取相應(yīng)的聯(lián)鎖安全措施。系統(tǒng)帶有溫度補(bǔ)償功能的流速傳感器，可以測定真實(shí)的氣流流速，包括進(jìn)氣流、下沉氣流和外排氣流（B2）；LCD液晶顯示屏實(shí)時(shí)顯示氣流流速/流量。對(duì)氣流流速過低或不安全前窗高度，系統(tǒng)都會(huì)發(fā)出聲光警報(bào)。

2 生物安全柜依據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)及級(jí)別

2.1 現(xiàn)行的生物安全柜檢測主要標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)有

①美國NSF/ANSI 49—2002《Class II(Laminar Flow)Biosafety Cabinetry》；②JG 170-2005中華人民共和國建筑工業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《生物安全柜》；③歐盟 EN 12469：2000《Biotechnology-Peformance Criteria for Microbiological Safety Cabinets》；④YY 0569-2005 中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《生物安全柜》。

2.2 生物安全柜的級(jí)別

目前，生物安全柜有一級(jí)生物安全柜、二級(jí)生物安全柜和三級(jí)生物安全柜3中類型。

2.2.1 一級(jí)生物安全柜 一級(jí)生物安全柜可提供對(duì)人員和環(huán)境的保護(hù)，而不保護(hù)樣品，它依賴外接通風(fēng)管中的風(fēng)機(jī)帶動(dòng)氣流經(jīng)排氣口HEPA過濾器排出。但目前使用較少，是因?yàn)橐患?jí)生物安全柜不能夠保護(hù)樣品。

2.2.2 二級(jí)生物安全柜 由于可提供工作人員、環(huán)境和產(chǎn)品的保護(hù)，因此應(yīng)用最廣泛。按照《中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)生物安全柜準(zhǔn)YY0569-2005生物安全柜》中的規(guī)定，二級(jí)生物安全柜依照排氣方式、循環(huán)方式和入口氣流風(fēng)速可分為A1型，A2型，B1型和B2型4個(gè)級(jí)別。

A1型安全柜中30%的氣體通過排氣口過濾排出，70%氣體通過HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū)，前窗氣流速度最小量或測量平均值應(yīng)至少為0.38m/s。

A2型安全柜中30%的氣體通過排氣口過濾排出，70%氣體通過HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū)，前窗氣流速度最小量或測量平均值應(yīng)至少為0.5m/s。

B1型70%氣體通過排氣口HEPA過濾器排除，30%的氣體通過供氣口HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū)。

B2型為100%全排型安全柜，無內(nèi)部循環(huán)氣流，可以操作揮發(fā)性核放射物和揮發(fā)性化學(xué)品作為添加劑的微生物實(shí)驗(yàn)，又可同時(shí)提供化學(xué)性和生物性的安全控制。

2.3 三級(jí)生物安全柜

生物安全防護(hù)等級(jí)為4級(jí)實(shí)驗(yàn)室采用的是三級(jí)生物安全柜，其柜體完全氣密，通過連接在柜體的手套，俗稱手套箱，工作人員才可進(jìn)行操作，為確保不受污染，試驗(yàn)品需通過雙門的傳遞箱進(jìn)出安全柜，適用于高風(fēng)險(xiǎn)如進(jìn)行埃博拉病毒、SARS的相關(guān)實(shí)驗(yàn)等。

3 生物安全柜年度檢測檢修

生物安全柜標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范規(guī)定在如下的情況必需做檢修或檢測：①實(shí)驗(yàn)室竣工后、投入使用前；②挪動(dòng)位置后；③更換配件或?yàn)V器后；④年度常規(guī)檢測。

3.1 生物安全柜年度檢測的項(xiàng)目

生物安全柜年度檢測的項(xiàng)目可參照J(rèn)G 170-2005推薦檢測項(xiàng)目。

3.2 生物安全柜年度維護(hù)的方式

生物安全柜的維護(hù)可采用如下的方式

①選擇生物安全柜生產(chǎn)廠家或?qū)I(yè)維護(hù)公司提供的定期或不定期的維保，每年定期對(duì)生物安全柜進(jìn)行檢測檢修、更換配件并排除故障；

②選擇具有檢測資質(zhì)的檢測單位進(jìn)行檢測認(rèn)證，出具具有法律效力的檢測報(bào)告。

③委托專業(yè)公司承擔(dān)年度維護(hù)，定期檢修，并由其委托檢測單位進(jìn)行檢測。

3.3 生物安全柜年度維護(hù)的注意問題

①維護(hù)人員必須具有生物安全防護(hù)專業(yè)知識(shí)與裝備；②不得打開通風(fēng)系統(tǒng)，如因故障必須打開，打開之前必須經(jīng)過甲醛熏蒸消毒，確認(rèn)已經(jīng)有效殺滅致病性生物危險(xiǎn)因子，并可有效控制濾器所截留的致病微生物溢出、擴(kuò)散；③從生物安全柜拆卸下來的濾器，需經(jīng)滅菌處理后才能作為普通廢棄物拋棄。

3.4 生物安全柜的安全使用

3.4.1 使用單位的管理層 作為使用單位的管理層首先要高度重視，購買能滿足實(shí)驗(yàn)室工作需要的防護(hù)級(jí)別的生物安全柜，安裝完畢，經(jīng)檢測認(rèn)證，出具具有法律效力的檢測報(bào)告，以確認(rèn)相關(guān)參數(shù)在正常的范圍之內(nèi)，方能投入使用；制定后續(xù)定期維護(hù)檢測計(jì)劃，定期維護(hù)檢測；建立建全管理制度和操作規(guī)程；對(duì)操作人員進(jìn)行培訓(xùn)持證山崗。

3.4.2 操作人員 操作人員是生物安全柜發(fā)生安全事故的第一受害者，更要高度重視。持證山崗≠“安全”，定期更換過濾器≠“安全”，定期檢測仍然不能完全保證你的“安全”，只有隨時(shí)保持生物安全柜良好的性能才能真正作到“安全”。那么，怎樣才能隨時(shí)保持生物安全柜良好的性能？操作人員應(yīng)作到以下幾點(diǎn)。

①熟練掌握生物安全柜的性能、檢修、結(jié)構(gòu)原理、安全使用和檢測等方面的知識(shí)。

②掌握生物安全柜當(dāng)前性能狀況，相關(guān)參數(shù)是否在正常的范圍之內(nèi)；并弄清檢測項(xiàng)目和檢測標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)主要指標(biāo)；上次檢修、檢測時(shí)間，下次應(yīng)在什么時(shí)侯檢修、檢測；主要部件（特別是過濾器）的更換的情況。對(duì)這些基本情況要了如指掌。

③每次使用前要檢查生物安全柜性能是否處于良好狀態(tài)，在確認(rèn)以后才能使用，一經(jīng)發(fā)現(xiàn)安全隱患，立即停用。

④風(fēng)速、壓差和菌落總數(shù)這些指標(biāo)參數(shù)都很重要。對(duì)于控制系統(tǒng)無測量和顯示風(fēng)速功能的生物安全柜，建議配置風(fēng)速儀在每次使用前進(jìn)行測量；菌落總數(shù)每季度作一次檢查。

⑤請專業(yè)人員更換和維護(hù)過濾器。調(diào)整控制系統(tǒng)風(fēng)速仍達(dá)不到技術(shù)參數(shù)時(shí)，則更換高效過濾器（一次/1～2年）；定期將粗過濾器中的濾料拆下清洗（一次/3～6個(gè)月）。定期用風(fēng)速儀測量工作室的風(fēng)速（一次/2個(gè)月），如不符合則調(diào)整其風(fēng)速達(dá)到正常值。

[1]李勁松.生物安全柜應(yīng)用指南.原理使用和驗(yàn)證[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005∶71-90.