瞿 巍
湖北省十堰市衛(wèi)生局東風分局職業(yè)病防治中心,湖北十堰 442000
血液分析作為一基礎檢查項目由于其操作簡便、快捷目前已作為臨床診斷、治療及體檢、觀察病情的一重要指標。自動化儀器的使用讓血液分析在效率上有了很大程度的提高,因此而被廣泛應用于各實驗室成為血液細胞有形成分(紅細胞RBC、白細胞WBC、血小板PLT)分析的基礎手段。它作為血常規(guī)檢驗的一個新的飛躍越來越受到臨床醫(yī)務工作者和臨床實驗室的青睞,在各大實驗室中占據(jù)著重要的地位。但隨著現(xiàn)代化儀器的使用,它在提高效率的同時也存在一定的弊端,然而儀器畢竟是儀器再現(xiàn)代化、自動化的儀器都是靠人來完成其操作,在儀器的使用過程中人為因素更起著至關重要的作用?,F(xiàn)就血液常規(guī)檢驗中容易出現(xiàn)的問題和差錯做如下分析。
血液樣品的采集應盡可能使用真空采血管靜脈采集,這樣才能反映患者的實際情況,也可以避免樣品中混入組織液等其它液體引起的細胞聚集。靜脈穿刺是否順利、規(guī)范都會對檢驗結果造成一定的影響,如果操作較慢、采血不順利血液處于半凝狀態(tài)將會影響計數(shù)結果。血液樣品采集后要立刻混勻且動作需輕緩以防劇烈振蕩造成細胞破裂、微小氣泡和溶血,這些都直接影響分析結果。
抗凝劑使用國際化學標準化委員會(ICSH)推薦的對細胞形態(tài)和計數(shù)影響較小的抗凝劑EDTA- K2(1.5 mg/mL),日常工作中由于檢驗項目多、采血難度等原因抗凝劑的比例常會略高(2 mL抗凝管采血量只有1~1.5 mL),這樣勢必造成細胞腫脹、破裂等形態(tài)改變而使分析結果發(fā)生變化,因此采血時應盡量按比例要求采集2 mL。
現(xiàn)在的實驗室血液常規(guī)分析自動化分析儀越來越占據(jù)著主導地位,而儀器的工作狀態(tài)將直接影響分析結果的正確與否,所以人工的儀器保養(yǎng)和儀器維護顯得格外重要。首先要做好定期的儀器校準、質控、開機時的背景計數(shù)檢測、每日樣品測試前的質量控制,保證整個管路的清潔暢通,做好日常清洗和定期維護,為了保證儀器的正常工作狀態(tài)最好使用滲透壓和離子強度達到規(guī)定的與儀器相配套的試劑,這樣會避免很多不必要的干擾[1]。其次應將儀器放置于一個不受振蕩、磁場、潮濕、灰塵、溫度干擾的環(huán)境、地線接觸良好,這些都是保證儀器能正常運行的前提。
很多研究顯示血液從采集到上機測試最好在2 h以內(nèi)但也不能即刻檢測,應放置5~15 min后上機較為理想[2],這樣才能與抗凝劑充分混合,PLT的假性聚集(PLT離體后形態(tài)立即改變形成絲狀偽足相互纏繞形成可逆聚集體)發(fā)生解聚[3],從而得到最真實的檢驗結果。全血標本需不斷混勻,為了防止標本老化最好在6~8 h內(nèi)完成測試。上機前先用混勻振蕩器混勻再用手緩慢上下顛倒至少20次,以保證上機時血液與抗凝劑充分融合,檢測時要保證測試針在血液的液面以下,不能靠近管壁也不能接觸管底保證進樣量的準確。標本量較大時在檢測達到一定數(shù)量后必須進行一次背景計數(shù)檢測,以免出現(xiàn)管路問題使背景值偏高影響后面樣品的測試。在檢測過程中往往會出現(xiàn)一些問題,如機器報警顯示計數(shù)錯誤、WBC堵塞、RBC堵塞等這時需執(zhí)行自動清洗,嚴重時要用專用清洗液對檢測部進行清洗,以便洗去管路中的臟污雜質解除堵塞。又如電腦顯示W(wǎng)BC計數(shù)為0、無法分類、PLT計數(shù)異?!霈F(xiàn)這些問題有的是因為受周圍環(huán)境影響溫度較低儀器工作異常、血液中的寒冷凝集素干擾使細胞無法正常計數(shù),升高室溫或放置37℃水浴后即可改善。有的則是地線接觸不良導致線路異常造成干擾使儀器不能正常運轉。還有的可能是儀器的管路或某部件出現(xiàn)故障需要專業(yè)人員檢修后才能解決。這些都要認真觀察仔細分析排除干擾來解決分析中出現(xiàn)的問題。
上機測試完成并不代表分析步驟的結束。一個工作認真負責的檢驗人員在測試完成后一定會仔細審查檢測結果,尤其對于那些異常結果和各項參數(shù)間出現(xiàn)矛盾的要結合檢驗數(shù)據(jù)、直方圖的變化進行分析,必要時進行重復檢驗。在排除其它因素干擾外仍有疑問的還可再次采血重新復檢,及時與臨床醫(yī)生和被檢對象溝通結合手工計數(shù)和顯微鏡檢查以便得到最真實的檢測結果。
血細胞由于體積小容易發(fā)生粘連、變性破壞等形態(tài)改變,分析測試受生理、病理、飲食、藥物、人為操作因素的干擾波動較大,容易對結果造成一定影響。血液分析測試是由人工來進行操作和控制,因此分析結果的準確與否成敗關鍵主要是“人”的因素,分析檢驗的過程中經(jīng)常會出現(xiàn)某些故障、疑問只要在工作中注意觀察,認真分析報警和直方圖的變化,及時查找原因排除干擾。從樣品采集、抗凝、混勻、放置時間、上機測試、分析結果、儀器狀態(tài)等各操作環(huán)節(jié)著手認真仔細就能發(fā)現(xiàn)問題結合實際去解決它,從而得到準確、可靠的檢驗數(shù)據(jù)指導臨床,為醫(yī)生、病人提供滿意的檢驗結果減少不必要的麻煩。每個實驗室應根據(jù)實際需要、檢驗對象、儀器性能、檢驗水平等具體情況制定相應的復查制度來排除人為因素對結果的影響。
[1] 從玉隆.當代血液分析技術與臨床[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1997:39.
[2] 洪宗之.抗凝靜脈血放置時間對血常規(guī)檢測結果的影響[J].西醫(yī)結合雜志,2005,14(2):23.
[3] 朱忠勇.準確計數(shù)血小板方法學研究進展[J].國外醫(yī)學:臨床生物化學與檢驗學分冊,2002,23(3):131-132.