邢清潔

（河北省內(nèi)丘縣農(nóng)業(yè)局，河北 內(nèi)丘054200）

本人在基層從事動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)工作多年，對(duì)血樣采集實(shí)際操作中需要注意的問(wèn)題進(jìn)行了總結(jié)，報(bào)告如下。

1 掌握好采血時(shí)間

要掌握好采血時(shí)間與免疫日期的間隔。雞新城疫、禽流感、豬瘟、牛羊口蹄疫在免疫21d后采血，豬口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病在免疫后28d采血。因?yàn)橐呙缃臃N后，在動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生抗體并達(dá)到一個(gè)穩(wěn)定水平，需要時(shí)間和過(guò)程。

2 做好采樣前的準(zhǔn)備工作

采樣前，準(zhǔn)備好采樣所需的物品和防護(hù)用品，像保溫箱（保溫瓶）、冰袋、酒精棉、一次性注射器（和所需血樣量相當(dāng)?shù)淖⑸淦鳎?、記?hào)筆、自封袋、標(biāo)簽、膠皮手套、口罩、防護(hù)服、膠鞋等。

3 采前消毒，采后止血

采血前用75%酒精棉球局部消毒，以避免畜禽因采血而引起局部感染；雞的皮膚游離性比較大，采血后容易形成血腫，所以采血完畢，要及時(shí)做好止血工作，即用酒精棉球壓迫采血部位，防止血流過(guò)多。注意用酒精棉球壓迫前要擠凈酒精，防止酒精刺激引起流血過(guò)多。

4 保證質(zhì)量不溶血

獲得符合衛(wèi)生要求和高質(zhì)量的血清是采血的關(guān)鍵。采血的方法同靜脈注射，只是靜脈注射的方向是針頭要扎向近心端，而采血的方向則相反，針頭扎向遠(yuǎn)心端，這樣采血順利。采血時(shí)應(yīng)使血液沿采血管壁流入瓶中，不能讓血液直沖瓶底或滴入瓶底，容易引起溶血。

采完血不要將采血管立放，這樣血清不易析出，特別是雞血、豬血。要將采血管口塞好后平放或斜放于容器中，血清就會(huì)自然析出，也可用離心機(jī)分離出血清。血樣采好后，在來(lái)回拿取的過(guò)程中，要盡量避免震蕩，以免紅細(xì)胞破裂造成溶血而影響血清的效果。尤其是豬、牛、羊的血樣，抗體檢測(cè)要做ELISA，血清質(zhì)量要求很?chē)?yán)格，如果發(fā)生溶血，就會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果，甚至得不出結(jié)果。

5 保證采血量

在基層采血樣主要是為了做抗體效價(jià)的監(jiān)測(cè)，一份血清有可能做幾種病的抗體效價(jià)檢測(cè)，另外，還有的很可能需要復(fù)查，所以血樣的量一定要保證。一般雞、豬血不少于3mL，保證血清分離量不少于1mL。

6 抽樣要有代表性

在同群中要進(jìn)行隨機(jī)采樣。不要挑著采，更不要專(zhuān)挑那些不產(chǎn)蛋的、消瘦的、不健康或者準(zhǔn)備淘汰的雞。如果挑著采樣，樣品代表不了整群，監(jiān)測(cè)結(jié)果也就沒(méi)有意義了。抽樣監(jiān)測(cè)結(jié)果代表的是整群，從樣品的抗體合格率來(lái)反映整群的合格率，只有隨機(jī)才有代表性。

7 及時(shí)標(biāo)記、規(guī)范填寫(xiě)采樣單

采血完畢，立即于盛血樣的器皿上粘貼或?qū)懮蠘?biāo)記號(hào)碼，同時(shí)填寫(xiě)采樣單，并要一一對(duì)應(yīng)。

采樣單是對(duì)采樣群基本情況的一個(gè)簡(jiǎn)要記錄，一定要認(rèn)真填寫(xiě)，包括畜主、飼養(yǎng)量、采樣量、采樣時(shí)間、免疫時(shí)間、疫苗種類(lèi)、生產(chǎn)廠家、劑量等都要一一填寫(xiě)完整。

飼養(yǎng)量和采樣數(shù)量，抽樣量過(guò)少代表不了整群，量過(guò)大沒(méi)有必要，一般1 000只雞要采20～30只；免疫時(shí)間和采樣時(shí)間要填寫(xiě)具體、清楚，因?yàn)橐呙缭谛笄蒹w內(nèi)產(chǎn)生的抗體有一個(gè)消長(zhǎng)規(guī)律，根據(jù)免疫和采樣時(shí)間來(lái)推測(cè)畜禽應(yīng)該達(dá)到的抗體水平，是不是和實(shí)際結(jié)果相符，如果理論結(jié)果和實(shí)際結(jié)果相差比較大，就要分析原因或者重新檢測(cè)；生產(chǎn)廠家和劑量，根據(jù)抗體檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，可以得出哪個(gè)廠家的疫苗效果好，更能抵御外來(lái)病毒的侵襲，適合本地區(qū)使用，哪個(gè)廠家的疫苗成本更低，可以更好地降低養(yǎng)殖成本。

8 樣品的保存

血樣采好后，標(biāo)記、整理、歸類(lèi)，放入加有冰袋的保溫箱或者保溫瓶中24h內(nèi)（時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)發(fā)生溶血現(xiàn)象）帶到實(shí)驗(yàn)室，及時(shí)做血清分離。分離后的血清24h內(nèi)可冷藏保存，超過(guò)24h的要冷凍保存。

抗體監(jiān)測(cè)是對(duì)免疫工作的一個(gè)檢驗(yàn)，標(biāo)志著免疫工作的成敗，也是指導(dǎo)養(yǎng)殖場(chǎng)戶(hù)制定科學(xué)合理的免疫程序的一個(gè)重要依據(jù)，是動(dòng)物疫病防控的基礎(chǔ)和關(guān)鍵，而好的、有代表性的樣品是抗體監(jiān)測(cè)的基礎(chǔ)。所以，一定要做好樣品的采集、運(yùn)輸和保存。