許 芳，莊利棟，胡 宏，吳華新

（四川省綿陽(yáng)市中心醫(yī)院：1.血液科；2.流式細(xì)胞檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室 621000）

陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿（PNH）是造血干細(xì)胞基因突變的克隆性疾病，臨床上以血細(xì)胞膜上糖基磷脂酰肌醇（GPI）生成障礙，GPI錨定的CD55、CD59表達(dá)降低，最終導(dǎo)致血管內(nèi)溶血為主要特征。臨床上常表現(xiàn)為骨髓衰竭、深靜脈血栓、溶血等。作為重要的GPI錨聯(lián)蛋白，CD55、CD59在外周血細(xì)胞表面表達(dá)缺陷常被作為診斷PNH的敏感性指標(biāo)。文獻(xiàn)顯示健康人群、常見的幾類貧血性疾病也可存在CD55、CD59不同程度的表達(dá)下降［1］。為此，現(xiàn)對(duì)本院連續(xù)收治的176例貧血患者CD55、CD59免疫表型進(jìn)行了比較分析，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2008年6月30日至2011年6月30日期間綿陽(yáng)市中心醫(yī)院血液科病房連續(xù)收治的，因貧血、骨髓衰竭、且診斷明確可評(píng)價(jià)的患者，共176例，其中男96例，女80例。年齡范圍10～93歲，中位年齡（48±18）歲。各種貧血的診斷均參照《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》［2］。

1.2 方法 抽取患者外周血，EDTA抗凝，常規(guī)CD55、CD59標(biāo)記，流式細(xì)胞分別檢測(cè)紅細(xì)胞、粒細(xì)胞表面CD55、CD59的表達(dá)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，各組檢測(cè)指標(biāo)用表示，組間比較進(jìn)行方差分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

PNH組CD55、CD59在紅細(xì)胞、粒細(xì)胞表面均有不同程度下降，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；再生障礙性貧血（AA）組外周血CD55、CD59與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；自身免疫性溶血性貧血患者外周血CD59在紅細(xì)胞表面的陰性率較對(duì)照有所增加；骨髓增生異常綜合征患者CD55在中性粒細(xì)胞表面表達(dá)下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。AA、自身免疫性溶血性貧血（AIHA）、骨髓增生異常綜合征（MDS）組間各數(shù)據(jù)的兩兩比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 各類貧血外周血粒細(xì)胞、紅細(xì)胞CD55、CD59陰性百分率的比較

3 討 論

CD55、CD59陰性克隆與PNH發(fā)病的相關(guān)性在以往的研究中已得到廣泛的認(rèn)可，但越來越多的研究顯示CD55、CD59的下降可出現(xiàn)于 MDS、AA患者；甚至有研究顯示，健康人外周血細(xì)胞表面同樣可能存在不同程度的CD55、CD59表達(dá)缺陷，但在各細(xì)胞群表達(dá)的百分率均在90%以上［1］。CD55、CD59下降多少可診斷PNH，國(guó)外的研究沒給出確切的界定；國(guó)內(nèi)關(guān)于PNH的診斷認(rèn)為：PNH患者中CD55或CD59陰性中性粒細(xì)胞或紅細(xì)胞需大于10%，5%～10%｀為可疑［2］。本研究顯示，常見的貧血性疾病尤其是AIHA、MDS患者外周血中性粒細(xì)胞、紅細(xì)胞仍可能存在不同程度的CD55、CD59表達(dá)缺陷，但以CD59的表達(dá)缺陷最為顯著。作為診斷PNH目前最為敏感、特異性高的指標(biāo)，CD55、CD59的表達(dá)下降并非僅僅存在于PNH，因此，仍需要結(jié)合臨床表現(xiàn)、酸試驗(yàn)、糖水試驗(yàn)、Rous試驗(yàn)等傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室檢查來提高PNH診斷的準(zhǔn)確率。更新的研究顯示：多參數(shù)的流式細(xì)胞檢測(cè)有利于提高PNH小克隆的檢出率［3－4］，這對(duì)PNH的診斷提出了更高的要求。

CD59是膜補(bǔ)體溶血抑制因子，CD55是衰亡加速因子，二者對(duì)膜補(bǔ)體均有較強(qiáng)的破壞作用，但以CD59的缺失對(duì)膜溶解破壞抑制作用更強(qiáng)，用CD59單抗篩查PNH很少漏診并且CD59的缺失較CD55缺失更易檢出，因此CD59的缺失被認(rèn)為在PNH的診斷中最為可 靠［1，5－6］。另外，PNH患者的外周血中，CD59陰性紅細(xì)胞所占的比例較CD55陰性細(xì)胞高。本研究同樣印證了這一結(jié)論：100%PNH患者存在紅細(xì)胞CD59表達(dá)下降；56%PNH患者存在粒細(xì)胞CD59表達(dá)的下降；63%PNH患者存在紅細(xì)胞CD55表達(dá)下降；75%PNH患者存在粒細(xì)胞CD55表達(dá)下降。近期研究甚至認(rèn)為CD59在診斷PNH過程中是個(gè)優(yōu)于CD55的指標(biāo)［7］。但據(jù)此認(rèn)為：紅細(xì)胞CD59的下降是診斷PNH的必要的，獨(dú)立條件尚需大宗病例研究證實(shí)。

如何解釋PNH以外的其他類型貧血患者存在CD55、CD59表達(dá)的缺失？文獻(xiàn)報(bào)道：除了PNH，很多干細(xì)胞疾病患者存在CD55、CD59陰性克隆，如再生障礙性貧血、骨髓增生異常綜合征、骨髓纖維化等。甚至有研究認(rèn)為：含少量CD55、CD59陰性克隆的再生障礙性貧血、骨髓增生異常綜合征患者與無CD55、CD59缺失異常的患者相比，對(duì)免疫抑制劑治療反應(yīng)更好，且預(yù)后更好［8－9］。本文同樣顯示 MDS、AIHA患者分別存在CD55、CD59的檢測(cè)下降，與文獻(xiàn)報(bào)道不同的是AA組未發(fā)現(xiàn)CD55、CD59表達(dá)的下降。另外AIHA患者CD55、CD59檢測(cè)結(jié)果的下降多系自身抗體封閉血細(xì)胞膜上CD55、CD59造成的假陰性，能否據(jù)此推測(cè)這類患者的免疫抑制治療的療效有待于更進(jìn)一步的臨床研究。

綜上所述，CD55、CD59表達(dá)缺陷是PNH的主要臨床特征之一，CD55、CD59在PNH患者紅細(xì)胞、粒細(xì)胞上表達(dá)的下降較其他貧血更具普遍性，但部分非PNH患者仍可能存在CD55、CD59的表達(dá)缺陷；越來越多的研究已提示PNH小克隆的存在，在實(shí)驗(yàn)室診斷方面也在不斷改進(jìn)，諸如FLAER法等，現(xiàn)階段，在更精確的檢測(cè)方法普及之前，PNH診斷仍需結(jié)合臨床及其他傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室檢查。

［1］歐陽(yáng)紅梅，張芹，甸自金，等.CD55、CD59在健康者紅細(xì)胞及中性粒細(xì)胞上表達(dá)的研究［J］.國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，31（2）：109－111.

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