夏廣軍 嚴(yán)昌國(guó) 劉成名

（1.延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院，吉林延吉133000；2.延邊天一畜牧有限公司，吉林琿春133000）

反芻動(dòng)物日糧添加植物油能夠改善乳脂的脂肪酸組成，提高乳脂中功能性脂肪酸——共軛亞油酸（conjugated linoleic acid，CLA）的含量。研究發(fā)現(xiàn)，在日糧脂肪酸向乳脂脂肪酸的轉(zhuǎn)變過程中，血液起到了非常重要的作用。乳脂中十八碳以上的長(zhǎng)鏈脂肪酸主要是乳腺通過血液攝取脂肪酸生成。因此，血液是聯(lián)接日糧脂肪酸與乳脂脂肪酸的樞紐和通道。

目前，國(guó)內(nèi)有關(guān)植物油對(duì)反芻動(dòng)物肌肉組織十八碳脂肪酸含量影響的報(bào)道較少。所以，本試驗(yàn)選擇不同脂肪酸構(gòu)成的豆油、紅花油、葵花油混合物為脂肪源，探討日糧添加混合植物油后對(duì)提高肌肉中十八碳脂肪酸含量的效果和血漿與肌肉中十八碳脂肪酸含量間的關(guān)系，以及對(duì)肌肉氨基酸含量的影響，為闡明植物油對(duì)牛肉品質(zhì)的影響機(jī)制提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選用體重相近、健康無疾病的延邊黃牛(公牛)16頭，采用單因子隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，試驗(yàn)處理分別為：4%植物油組、5%植物油組、6%植物油組和對(duì)照組。在延邊天一畜牧有限公司進(jìn)行為期88 d的飼養(yǎng)試驗(yàn)（其中，預(yù)試期10 d，正試期78 d）。

1.2 試驗(yàn)日糧

將豆油、紅花油、葵花油按55%、25%、20%的比例混合并攪拌均勻，按基礎(chǔ)日糧的4%、5%、6%添加于精料中并混勻。即4%植物油組飼喂4%混合植物油+基礎(chǔ)日糧，5%植物油組飼喂5%混合植物油+基礎(chǔ)日糧，6%植物油組飼喂6%混合植物油+基礎(chǔ)日糧，對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 飼養(yǎng)管理

所有供試牛在試驗(yàn)前用“蟲克星”驅(qū)除體內(nèi)、體外寄生蟲，并且口服健胃散。牛入舍前，舍內(nèi)及器具均徹底消毒。預(yù)飼期讓牛逐漸適應(yīng)新的環(huán)境和飼養(yǎng)管理方式，在此期間精料的喂量由少至多，到第10 d完全改為正式期的試驗(yàn)日糧，日糧飼喂時(shí)間為早5:00和晚4:00。此期間由專人負(fù)責(zé)管理，自由采食和飲水，保持牛體清潔，被毛柔順。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 血漿脂肪酸的測(cè)定

血樣的采集：于宰前一周，晨飼前頸靜脈采血，3 000 r/min離心15 min，將血漿放入帶蓋離心管中，于-70℃保存。

血漿中脂肪酸的測(cè)定：根據(jù)中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB—9695.2—88。本標(biāo)準(zhǔn)同時(shí)采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)ISO5508—1978《動(dòng)植物油脂-脂肪酸甲酯的氣相色譜分析》和國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)ISO5509—1978《動(dòng)植物油脂-脂肪酸甲酯的制備》。并參照了Raes等[1]的方法。

1.4.2 肌肉脂肪酸的測(cè)定

試驗(yàn)動(dòng)物按常規(guī)方法屠宰后取12～13肋骨處的背最長(zhǎng)肌，鋁箔密封，真空-20℃保存，以備分析。肌肉脂肪酸的測(cè)定參照尚秀國(guó)[2]的脂肪酸分析方法。

1.4.3 肌肉氨基酸含量的測(cè)定

氨基酸的測(cè)定按照中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB—T18246—2000進(jìn)行。酸水解和氧化水解使用日立L-8800氨基酸分析儀，堿水解使用島津SPD-10A液相色譜儀。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均用SPSS軟件11.5進(jìn)行方差分析，試驗(yàn)結(jié)果表示為±SD。

2 結(jié)果與分析

2.1 肉牛血漿中的十八碳脂肪酸含量（見表2）

表2 血漿中十八碳脂肪酸含量（mg/g）

從表2可以看出，血漿中硬脂酸(C18∶0)含量各試驗(yàn)組高于對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05）。油酸(C18∶1)含量各試驗(yàn)組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），且隨植物油水平的提高呈上升趨勢(shì)。亞油酸(C18∶2)含量各試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，差異顯著（P＜0.05），其中6%植物油組最高。共軛亞油酸(c9，t11CLA)含量各試驗(yàn)組高于對(duì)照組,但差異不顯著(P＞0.05)。亞麻酸(C18∶3)含量各試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，差異顯著（P＜0.05），其中，5%植物油組最高。血漿中硬脂酸(C18∶0)、油酸(C18∶1)、亞油酸(C18∶2)、共軛亞油酸(c9，t11CLA)和亞麻酸(C18∶3)含量，各試驗(yàn)組間差異不顯著(P＞0.05)。

2.2 肉牛肌肉中的十八碳脂肪酸含量（見表3）

表3 肌肉中十八碳脂肪酸含量（mg/g）

從表3可以看出，牛肉中的硬脂酸(C18∶0)含量，各試驗(yàn)組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)；油酸(C18∶1)含量，各試驗(yàn)組均高于對(duì)照組，但差異不顯著(P＞0.05)，隨植物油水平的提高呈上升趨勢(shì)；牛肉中的亞油酸(C18∶2)含量，各試驗(yàn)組極顯著高于對(duì)照組（P＜0.01），試驗(yàn)組間差異不顯著(P＞0.05)；亞麻酸（C18∶3）含量，各試驗(yàn)組極顯著高于對(duì)照組（P＜0.01），各試驗(yàn)組間差異不顯著；共軛亞油酸（c9，t11 CLA）含量，各試驗(yàn)組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），各試驗(yàn)組間差異不顯著(P＞0.05)，隨著植物油水平的提高，共軛亞油酸（c9，t11 CLA）含量呈上升趨勢(shì)。

2.3 肉牛肌肉中的氨基酸含量（見表4）

表4 肌肉中氨基酸含量（%）

從表4可以看出，肌肉中的必需氨基酸、非必需氨基酸、總必需氨基酸和總非必需氨基酸含量各試驗(yàn)組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)，各試驗(yàn)組之間差異不顯著(P＞0.05)。

3 討論

3.1 添加混合植物油對(duì)肉牛血漿十八碳脂肪酸含量的影響

日糧脂肪酸在瘤胃微生物的氫化作用下，主要終產(chǎn)物為硬脂酸(C18∶0)，在氫化過程會(huì)產(chǎn)生一系列的中間產(chǎn)物如共軛亞油酸（c9，t11CLA）、反式油酸（t11-C18∶1）等，這些中間產(chǎn)物會(huì)通過瘤胃壁被吸收或隨著食糜流到小腸被吸收入血。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧添加植物油顯著提高了血漿中油酸(C18∶1)、亞油酸(C18∶2)和亞麻酸(C18∶3)的含量，試驗(yàn)組血漿中油酸（C18∶1）含量隨植物油水平的提高呈上升趨勢(shì)，亞油酸（C18∶2）和亞麻酸(C18∶3)含量隨植物油水平提高無明顯變化趨勢(shì)。有研究表明血漿中的長(zhǎng)鏈脂肪酸主要來源于日糧[3]，本試驗(yàn)日糧添加的豆油、葵花油和紅花油，提高了瘤胃中的亞油酸和亞麻酸等不飽和脂肪酸含量，同時(shí)因瘤胃不飽和脂肪酸含量的增加，為氫化反應(yīng)提供了充足的底物，進(jìn)而提高了瘤胃中反式油酸（t11-C18∶1）的產(chǎn)量。研究表明，從反式油酸（t11-C18∶1）到硬脂酸（C18∶0）的氫化速度慢于其它反應(yīng)，從而造成反式油酸（t11-C18∶1）在瘤胃液中的大量累積[4]。Noble等(1972)[5]在試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，山羊補(bǔ)飼玉米油后十二指腸的trans-C18∶1流量增加，進(jìn)而吸收到血漿中的trans-C18∶1也增加，不飽和脂肪酸生物加氫中間體trans-C18∶1的含量與植物油中的亞油酸(C18∶2)和亞麻酸(C18∶3)含量呈正相關(guān)。因此本試驗(yàn)日糧添加植物油后有更多的亞油酸、亞麻酸和反式油酸(t11-C18∶1)通過瘤胃壁和小腸吸收入血液。這與前人研究結(jié)果相一致。

3.2 添加混合植物油對(duì)肉牛肌肉中十八碳脂肪酸含量的影響

本試驗(yàn)日糧添加植物油極顯著提高了肌肉中的亞油酸（C18∶2）、亞麻酸（C18∶3）含量，與血漿中亞油酸（C18∶2）、亞麻酸（C18∶3）含量變化一致。這與報(bào)道相一致。

大量研究表明，日糧添加植物油可使乳汁中共軛亞油酸含量大量增加，而提高牛肉中共軛亞油酸含量的研究報(bào)道較少。

根據(jù)Griinar等(1997)[6]提出的共軛亞油酸來源的理論。反芻動(dòng)物產(chǎn)品中共軛亞油酸含量取決于瘤胃中共軛亞油酸與t11-C18∶1的產(chǎn)量和組織中△9去飽和酶的活性。本試驗(yàn)結(jié)果表明,日糧添加植物油顯著提高了牛肉中共軛亞油酸(c9,t11 CLA)含量,并且隨植物油添加量的增加而提高。本試驗(yàn)日糧添加植物油對(duì)肉牛血漿中的共軛亞油酸(c9,t11 CLA)含量影響不顯著,但顯著提高了血漿中油酸(C18∶1)的含量,為肌肉組織合成共軛亞油酸(c9，t11 CLA)提供了酶所作用的底物，這可能是本試驗(yàn)牛肉中共軛亞油酸含量提高的主要原因。也間接說明肌肉組織能合成共軛亞油酸。朱成明等[7]研究表明，添加膨化全脂大豆可以誘導(dǎo)乳腺△9脫氫酶mRNA的表達(dá),使其表達(dá)量提高了77.77%。誘導(dǎo)乳腺△9脫氫酶mRNA的表達(dá)是膨化全脂大豆提高牛奶中共軛亞油酸(c9,t11 CLA)含量的重要因素。而本研究添加植物油對(duì)肌肉組織△9脫氫酶mRNA表達(dá)的影響，尚需進(jìn)一步研究。

3.3 添加混合植物油對(duì)肉牛肌肉中氨基酸含量的影響

牛肉的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值主要體現(xiàn)在蛋白質(zhì)上，而蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值又主要取決于氨基酸的種類和數(shù)量。試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)組和對(duì)照組牛背最長(zhǎng)肌中的人體必需氨基酸和非必需氨基酸的含量差異不顯著。說明本試驗(yàn)添加的植物油水平不影響牛肉中各種氨基酸的含量。

4 結(jié)論

①日糧中添加混合植物油顯著提高了血漿中油酸（C18∶1）、亞油酸（C18∶2）和亞麻酸（C18∶3）的含量（P＜0.05）。

②日糧中添加混合植物油顯著提高了牛肉中的共軛亞油酸(c9，t11 CLA)的含量（P＜0.05）；極顯著提高了牛肉中必需脂肪酸亞油酸、亞麻酸含量（P＜0.01）。

③日糧中添加混合植物油對(duì)牛肉中氨基酸含量無影響。

[1]K.Raes,G.Huyghebaert,S.De Smet,et al.The deposition of con?jugated linoleic acid in eggs of laying hens fed diets varying in fat level and fatty acid profile[J].The Journal of Nutrition,2002,132(2):182-189.

[2]尚秀國(guó).共軛亞油酸對(duì)蛋黃脂肪酸組成調(diào)控機(jī)理的研究[D].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué),2004.

[3]D.L.Palmquist,T.C.Jenkins.Fat in lactation rations:Review[J].Journal of Dairy Science,1980,63(1):1-14.

[4]侯俊財(cái),劉艷平,桂仕林,等.大豆油對(duì)瘤胃培養(yǎng)液中共軛亞油酸及氫化中間產(chǎn)物累積規(guī)律的影響[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào),2008,39:449-454.

[5]R.C.Noble,W.Steele,J.H.Moore.The metabolism of linoleie ac?id by the young lamb[J].British Journal of Nutrition,1972,27(3):503-508.

[6]J.M.Griinari,M.A.McGuire,D.A.Dwyer,et al.Role of Insulin in the Regulation of MilkFat Synthesis in Dairy Cows[J].Journal of Dairy Science,1997,80(6):1076-1084.

[7]朱成明,蔣林樹,劉萬香,等.添加膨化全脂大豆對(duì)奶牛肝臟和乳腺中△9脫氫酶mRNA表達(dá)量的影響[G].中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)分會(huì)第十次學(xué)術(shù)研討會(huì),2008.