尹懷文，羅曉梅(遂寧市中心醫(yī)院藥劑科，四川遂寧629000)

地呋乳膏系醫(yī)院常用制劑，以呋喃西林和醋酸地塞米松為主藥，為局部抗菌藥，用于神經(jīng)性皮炎、慢性濕疹、蟲咬性皮炎及瘙癢性皮膚病的治療，在臨床上使用較為廣泛。由于目前尚未見同時測定呋喃西林和醋酸地塞米松含量的方法報道，且其處方中基質(zhì)成分復雜，故筆者參考有關(guān)文獻[1-3]，建立以高效液相色譜(HPLC)法同時測定地呋乳膏中上述2個組分含量的方法。經(jīng)過試驗，證實該方法快速、簡便，重復性好，結(jié)果可靠，可用于地呋乳膏的質(zhì)量控制。

1 儀器與試藥

LC-20 AD型HPLC儀，包括LC-20 AD型泵、SIL-20 A型自動進樣器、SPD-M20 A型二極管陣列檢測器(190～800 nm)(日本島津公司)；AUW 220 D型雙量程分析天平(日本島津公司，感量:0.1 mg/0.01 mg)。

呋喃西林對照品(蘇州第五制藥廠有限公司，批號:20110205)；醋酸地塞米松對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號:100122-200805)；地呋乳膏(自制，批號:110701、110708、110712、110715，規(guī)格:每10 g含呋喃西林20 mg與醋酸地塞米松5 mg)；甲醇(美國天地公司，色譜純)；水為自制重蒸餾水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

Agilent TC-C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流動相:甲醇-水(60∶40)；流速:0.8mL·min－1；檢測波長:240nm；柱溫:30℃；進樣量:10 μL。

2.2 溶液的配制

混合對照品溶液:取呋喃西林、醋酸地塞米松對照品適量，精密稱定，加流動相溶解并稀釋制成每1 mL約含呋喃西林40 μg、醋酸地塞米松10 μg的混合溶液，即得。

供試品溶液:取本品適量(約相當于呋喃西林2 mg、醋酸地塞米松0.5 mg)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，稱定重量，置70℃水浴中加熱至完全溶解，放冷至室溫，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，置冰浴中放置1 h，濾過，取續(xù)濾液，即得。

空白對照溶液:按地呋乳膏處方制備不含呋喃西林和醋酸地塞米松的陰性樣品，再按照供試品溶液的制備方法制備空白對照溶液。

2.3 空白干擾試驗

按“2.1”項下色譜條件，取呋喃西林和醋酸地塞米松混合對照品溶液、供試品溶液、空白對照溶液各10μL，分別注入HPLC儀，記錄色譜，見圖1。由圖1可知，供試品溶液色譜圖中在與對照品溶液色譜圖主峰相應的位置上有相同的色譜峰，而空白對照溶液色譜圖中在與對照品溶液色譜圖主峰相應的位置上無相同的色譜峰，說明空白對照溶液無干擾。

2.4 線性關(guān)系考察

精密稱取醋酸地塞米松對照品12.55 mg，置于10 mL量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液Ⅰ。精密稱取呋喃西林對照品10.11 mg，再精密量取對照品貯備液Ⅰ1 mL，置于50 mL量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液Ⅱ。精密量取對照品貯備液Ⅱ0.5、1、2、3、5 mL，分別置于10 mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，配制成系列溶液。分別取上述系列溶液及對照品貯備液Ⅱ各10 μL，進樣測定。以峰面積(A)為縱坐標，濃度(C)為橫坐標，繪制標準曲線，得呋喃西林回歸方程為A＝43203C－18997(r＝0.9999，n＝6)，醋酸地塞米松回歸方程為A＝104101C－14183(r＝0.9999，n＝6)。結(jié)果表明，呋喃西林和醋酸地塞米松檢測濃度分別在10.11～202.20μg·mL－1和2.51～50.20 μg·mL－1范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。

2.5 精密度試驗

精密量取“2.2”項下的對照品溶液，連續(xù)進樣5次測定。結(jié)果，呋喃西林峰面積的RSD＝0.71%，醋酸地塞米松峰面積的RSD＝0.48%，表明儀器精密度良好。

2.6 重復性試驗

取同一批(批號:110701)樣品6份，按照“2.2”項下方法平行處理樣品并測定。結(jié)果，呋喃西林含量為標示含量的99.11%，RSD＝0.83%；醋酸地塞米松含量為標示含量的100.50%，RSD＝0.49%，表明該方法重復性良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗

取“2.2”項下的供試品溶液1份，于室溫(20～25℃)下放置，在不同時間點(0、2、4、8、12、16、24h)分別進樣測定。結(jié)果，呋喃西林峰面積的RSD＝0.91%，醋酸地塞米松峰面積的RSD＝1.57%，說明供試品溶液在24 h內(nèi)含量保持穩(wěn)定。

2.8 加樣回收率試驗

取已知含量的地呋乳膏(批號:110701)粉末9份，每份約0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別精密加入呋喃西林、醋酸地塞米松混合對照品溶液(濃度分別為0.21、0.055 mg·mL－1)4、5、6 mL，各3份，混合均勻后再按“2.2”項下方法制備供試品溶液，測定其含量并計算加樣回收率，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率試驗結(jié)果(n＝9)Tab 1Results of recovery tests(n＝9)

2.9 樣品含量測定

取不同批號的地呋乳膏，按“2.2”項下方法制備供試品溶液，測定呋喃西林和醋酸地塞米松的含量，結(jié)果見表2。

表2 樣品含量測定結(jié)果(n＝5)Tab 2 Content determination of samples(n＝5)

3 討論

從呋喃西林和醋酸地塞米松的紫外吸收光譜圖可知，呋喃西林分別在波長260、371 nm處具有最大吸收，醋酸地塞米松在波長240 nm處具有最大吸收，由于處方中呋喃西林的量約為醋酸地塞米松的4倍，且根據(jù)圖譜數(shù)據(jù)結(jié)果顯示，呋喃西林色譜峰明顯高于醋酸地塞米松色譜峰。為提高醋酸地塞米松的檢測靈敏度，使2個成分色譜峰匹配，試驗選擇240 nm作為紫外檢測波長，以優(yōu)化2個成分的響應值。

[1-3]，本試驗最終選用的流動相為甲醇-水(60∶40)，組成簡單，呋喃西林與醋酸地塞米松2個主成分峰之間分離度良好。同時，發(fā)現(xiàn)2個主成分峰之間有一色譜峰，保留時間約為8.2min，經(jīng)研究證實為基質(zhì)中羥苯乙酯的色譜峰。此峰與2個主成分峰分離度良好。

使用SPD-M20 A型二極管陣列檢測器對樣品峰的起點、頂點和終點進行3點峰純度檢查。結(jié)果，呋喃西林與醋酸地塞米松的峰純度因子均大于0.9999，表明兩峰均為純峰，輔料及雜質(zhì)對測定無干擾。

留樣觀察中發(fā)現(xiàn)，制劑中醋酸地塞米松性質(zhì)不穩(wěn)定，貯存時樣品中醋酸地塞米松含量有降低趨勢，經(jīng)研究分析是制劑中醋酸地塞米松分解成地塞米松的緣故。因此，該制劑應注意低溫避光保存，并且留樣觀察含量測定結(jié)果，制定合理的有效期。

參考文獻

[1]倪曉霞，鄭紹衷.高效液相色譜法測定醋酸地塞米松乳膏中醋酸地塞米松含量[J].海峽藥學，2010，22(11):64.

[2]曲彩紅，蘇向陽，張平，等.高效液相色譜法測定復方尿素地米乳膏中醋酸地塞米松的含量[J].兒科藥學雜志，2010，16(1):47.

[3]胡毅堅，吳春芳.高效液相色譜法測定復方醋酸地塞米松霜中2組分的含量[J].中國藥房，2006，17(20):1585.