鄧松岳 王偉麗 張 穎 朱明偉

（商丘市食品藥品檢驗(yàn)所，河南 商丘 476000）

桃紅促孕合劑為醫(yī)院制劑[1]（豫藥制字Z04140004），由當(dāng)歸，熟地黃，赤芍，桃仁，紅花等十味藥組成，具有補(bǔ)腎化瘀、理氣和血的功效。多年的臨床應(yīng)用證明其治療月經(jīng)不調(diào)，無(wú)排卵性不孕癥功效顯著?，F(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中只有定性的薄層色譜鑒別，不能定量直觀的控制藥品質(zhì)量。當(dāng)歸為主藥之一，具有養(yǎng)血調(diào)經(jīng)的作用。阿魏酸是其有效成分，為了保證制劑的穩(wěn)定可靠，筆者采用高效液相法對(duì)制劑中的阿魏酸進(jìn)行了含量測(cè)定，該方法穩(wěn)定可靠，操作簡(jiǎn)便，專屬性強(qiáng)。

圖1 （A）陰性對(duì)照（B）阿魏酸對(duì)照品（C）樣品

1 儀器與試藥

Agilent1260高效液相色譜儀；色譜柱Agilent-C18（5μm，4.6mm×150mm），AUW220D電子天平，阿魏酸對(duì)照品（批號(hào)：110773-200611，中國(guó)藥品生物制品檢定所），桃紅促孕合劑（商丘市柘城縣人民醫(yī)院，批號(hào)為110409，110520，110525）。乙腈為色譜純，磷酸為化學(xué)純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件[2]

Agilent-C18色譜柱（150mm×4.6mm，5μm），流動(dòng)相：乙腈-0.085%磷酸溶液（14∶86），檢測(cè)波長(zhǎng)為316nm，柱溫：35℃，流速為1.0mLmin，進(jìn)樣量10μL。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

取阿魏酸對(duì)照品10.32mg，置50mL量瓶中，加70%甲醇20mL超聲溶解，稀釋至刻度，搖勻，精密量取3mL，置50mL量瓶中，加70%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 供試品溶液的制備

精密量取裝量差異項(xiàng)下供試品5mL，置100mL容量瓶中，加70%甲醇70mL，超聲處理（功率240W，頻率45kHz）30min，放冷并加70%甲醇至刻度，搖勻，即得。

2.4 陰性對(duì)照品溶液的制備

除當(dāng)歸外，其他各藥按處方量投料制成陰性對(duì)照品，并制成陰性對(duì)照品溶液的制備。

2.5 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)

取陰性對(duì)照溶液、對(duì)照品溶液、供試品溶液，注入色譜儀，記錄色譜圖（圖1）。

2.5.1 線性關(guān)系考察

取對(duì)照品溶液（12.38 μ g/m L）分別以1 μ L、5 μ L、7.5μL、10μL、15μL、20μL的量進(jìn)樣，各兩次，記錄峰面積，以阿魏酸峰面積對(duì)進(jìn)樣量進(jìn)行線性回歸，得回歸曲線y=63.209x+0.2933，r=0.9999。表明該方法在0.0124～0.2477μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5.2 精密度試驗(yàn)

取同一供試品溶液重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定其峰面積，結(jié)果，RSD =0.44% 。

2.5.3 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批號(hào)樣品6份，照“2.2”項(xiàng)下方法制備，按上述色譜條件測(cè)定，平均含量為0.0629mg/mL，RSD = 1.07 %，表明本方法重復(fù)性良好。

2.5.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一批號(hào)供試品溶液，分別于0h、1h、2h、4h、8h、12h，按上述色譜條件測(cè)定，RSD = 0.87% ，表明該供試品溶液在12h 內(nèi)穩(wěn)定。

表1 加樣回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表2 桃紅促孕合劑中阿魏酸的含量

2.5.5 加樣回收率試驗(yàn)

取已知含量的樣品9份，分別加入一定量阿魏酸對(duì)照品，照“2.3”項(xiàng)下方法制備，按上述色譜條件測(cè)定，計(jì)算。結(jié)果詳見(jiàn)表1。

3 樣品含量測(cè)定

按上述方法測(cè)定3批樣品中阿魏酸含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

4 結(jié) 論

由于其他成分的存在，在供試品制備的過(guò)程中，考察了不同提取方法，比較了超聲和回流[4]，結(jié)果，回流30min，阿魏酸為0.0574mg/mL，和超聲30min提取的效果相近，考慮到操作方法的方便，易行，所以本實(shí)驗(yàn)采取的樣品處理方法為超聲提取30min。

桃紅促孕合劑，在長(zhǎng)期的臨床實(shí)踐中證明用于調(diào)節(jié)垂體卵巢功能，促進(jìn)成熟卵記破裂排卵有良好的療效，但是長(zhǎng)期以來(lái)，只以薄層鑒別作為該制劑質(zhì)量的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，沒(méi)有定量的質(zhì)量分析方法。本實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法對(duì)該制劑中阿魏酸的含量進(jìn)行測(cè)定，目的為建立其定量控制方法，為桃紅促孕合劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提高提供參考。

[1]河南省醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑標(biāo)準(zhǔn).豫藥制字:Z04140004

[2]國(guó)家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國(guó)藥典(一部) [S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010:96.

[3]尹華,董曉燁.當(dāng)歸藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中醫(yī)藥學(xué)刊,2005,23(8):1501-1503.

[4]胡杰,馮麗莉,崔福德.當(dāng)歸川芎中阿魏酸提取的研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2004,15(11):732-733.