葉麗敏1，許元科1，劉 寧2，劉衛(wèi)榮1

景寧3個(gè)野生靈芝菌株的評(píng)比試驗(yàn)

葉麗敏，許元科，劉 寧，劉衛(wèi)榮

（1. 浙江省景寧畬族自治縣林業(yè)局，浙江 景寧 323500；2. 浙江博士園生物技術(shù)有限公司，浙江 景寧 323500）

對(duì)采自景寧畬族自治縣的BL09、BL11、BL12三個(gè)野生靈芝菌株與當(dāng)前景寧畬族自治縣主栽品種韓芝進(jìn)行子實(shí)體、生物學(xué)效率比較，結(jié)果表明，4個(gè)菌株在母種培養(yǎng)基上，BL09、BL11、BL12之間生長(zhǎng)速度差異不顯著，而韓芝生長(zhǎng)較慢，并與其它菌株存在極顯著的差異；BL09和BL11菌絲生長(zhǎng)濃密潔白，氣生菌絲量大，菌絲邊緣整齊，BL12和韓芝則相對(duì)較差；4個(gè)菌株在原種培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)速度，BL09和BL11之間差異不顯著，BL09、BL11與BL12、韓芝之間存在極顯著差異，BL12和韓芝之間差異不顯著；菌蓋大小為BL09 > BL11 > BL12 > 韓芝，產(chǎn)孢量大小為BL09 > BL11 > 韓芝 > BL12；BL09和BL11產(chǎn)量較高，它們與韓芝和BL12之間存在顯著差異，BL12產(chǎn)量最低，評(píng)比結(jié)果表明，BL09無論在菌絲生長(zhǎng)方面還是在子實(shí)體生長(zhǎng)方面，均優(yōu)于其它菌株，都表現(xiàn)出良好的長(zhǎng)式，是較適宜于景寧生產(chǎn)推廣的優(yōu)良菌株。

靈芝；野生菌株；品比試驗(yàn)；初報(bào)

靈芝（）屬擔(dān)子菌綱多孔菌目多孔菌科靈芝屬，是一種名貴的藥用真菌，在我國已有2 000多年的藥用歷史。《神農(nóng)本草經(jīng)》、《本草綱目》等醫(yī)藥著作中記載靈芝有扶正固本、滋補(bǔ)、健腦、強(qiáng)壯、消炎、利尿等功效。經(jīng)臨床實(shí)驗(yàn)證明，靈芝有調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、抗癌和預(yù)防艾滋病的作用。靈芝的藥理活性與靈芝中含有豐富的有機(jī)鍺、各種礦物質(zhì)、高分子多糖、三萜類化合物、甾醇等活性成份有關(guān)。景寧畬族自治縣土壤肥沃，水、氣、溫等氣候條件十分適宜靈芝的栽培，靈芝栽培種植的優(yōu)勢(shì)突出，靈芝野生資源較為豐富。為篩選出適合景寧當(dāng)?shù)卦耘嗤茝V的優(yōu)良菌株，特對(duì)采自景寧畬族自治縣的L09、BL11、BL12三個(gè)野生靈芝菌株與當(dāng)前景寧畬族自治縣主栽品種韓芝進(jìn)行比較試驗(yàn)。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 供試菌株

BL09、BL11、BL12自景寧畬族自治縣鶴溪鎮(zhèn)、渤海鎮(zhèn)、草魚塘林場(chǎng)等地野生靈芝菌株分離而得，韓芝來自浙江博士園生物技術(shù)有限公司，為目前景寧縣普遍采用的靈芝栽培菌種。

1.2 培養(yǎng)基配方

母種培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、磷酸二氫鉀3 g、硫酸鎂1.5 g、維生素B110 g、瓊脂20 g。

原種培養(yǎng)基：木屑78%，麥麩20%，石膏1%，白砂糖1%。

栽培料配方：木屑78%，麥麩20%，石膏1%，白砂糖1%或采用段木培養(yǎng)基。

1.3 母種制作

稱取200 g去皮馬鈴薯，切成薄片，沖洗，放入水1 100 ~ 1 200 mL燒煮，水開后再煮15 min，以馬鈴薯酥而不爛為度，用8層紗布過濾取濾液。如濾液不足1 000 mL則補(bǔ)足，然后加入瓊脂，燒至瓊脂完全融化，再用4 ~ 6層紗布過濾。在濾液中加入葡萄糖等，充分?jǐn)嚢瑁蛊咸烟茄杆偃诨?，趁熱分裝試管。用吊桶或漏斗分裝，將3種培養(yǎng)基分別裝入18 mm×180 mm試管中。裝入量為試管高度的1/5 ~ 1/4。注意培養(yǎng)基不要沾著試管口，塞上硅膠塞，包扎成捆，裝入高壓滅菌鍋內(nèi)，壓力升至0.12 kPa，保持30 min，待壓力表指針降至0后，打開鍋蓋，取出試管后斜放。在超凈工作臺(tái)內(nèi)定量接入平板尖端菌絲，每個(gè)菌株接20支，25℃恒溫培養(yǎng)。

1.4 原種制作

木屑78%，麥麩20%，石膏1%，蔗糖1%混勻，按料：水 = 1：1.5加水拌勻后裝入30 cm×15 cm×0.05 cm，每瓶裝折合干料0.25 kg，用塑料環(huán)套口，121℃滅菌1.5 h，冷卻后在超凈工作臺(tái)內(nèi)定量接入平板尖端菌絲，每個(gè)菌株接20袋，25℃恒溫培養(yǎng)。

1.5 栽培方法

拌料同原種，拌好后分裝到55 cm×15 cm×0.05 cm的聚乙烯塑料袋中，每袋裝折合干料0.75 kg，121℃滅菌2 h，自然冷卻后在超凈工作臺(tái)內(nèi)定量接入原種，每個(gè)菌株接20袋，25℃恒溫培養(yǎng)。菌絲滿袋后移入塑料大棚，菌袋脫去袋膜進(jìn)行覆土栽培，菌棒間留3 ~ 5 cm間隙，用含腐殖質(zhì)的園田土填實(shí)，澆透水后覆3 cm細(xì)土，出芝期溫度控制在25 ~ 28℃并保持空間濕度在80% ~ 90%，定期通風(fēng)。

1.6 試驗(yàn)結(jié)果觀測(cè)

母種萌發(fā)后每天劃線、測(cè)量并記錄菌絲生長(zhǎng)速度，記錄菌絲長(zhǎng)滿試管的時(shí)間以及菌絲的濃密程度、氣生菌絲量等情況。原種待菌絲長(zhǎng)到瓶肩部時(shí)開始沿菌絲生長(zhǎng)邊緣劃線，測(cè)量并記錄菌絲生長(zhǎng)速度、滿瓶時(shí)間以及菌絲的濃密程度等。栽培中觀察記錄原基形成時(shí)間、采收時(shí)間、觀察子實(shí)體的生物學(xué)性狀，包括菌蓋顏色、菌蓋直徑、菌柄長(zhǎng)度，并記錄每潮芝產(chǎn)量，計(jì)算生物學(xué)效率等數(shù)據(jù)，本試驗(yàn)共出3潮靈芝。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同菌株母種試驗(yàn)結(jié)果

各菌株母種生長(zhǎng)情況見表1。

由表1可見，4個(gè)菌株在母種培養(yǎng)基上菌絲的生長(zhǎng)速度平均為6.2 mm/d，種間差異顯著性比較（q檢驗(yàn)）結(jié)果顯示，BL09、BL11、BL12之間生長(zhǎng)速度差異不顯著，而韓芝生長(zhǎng)較慢并與其它菌株存在極顯著的差異。從菌絲生長(zhǎng)的形態(tài)上看，BL09和BL11濃密潔白，氣生菌絲量大，菌絲邊緣整齊，BL12和韓芝則相對(duì)較差。

表1 各菌株母種生長(zhǎng)情況

2.2 不同菌株原種試驗(yàn)結(jié)果

各菌株原種生長(zhǎng)情況見表2。

表2 各菌株原種生長(zhǎng)情況

由表2可見，4個(gè)菌株在原種培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)速度平均為5.8 mm/d，種間差異顯著性比較（q檢驗(yàn)）結(jié)果顯示，BL09和BL11之間差異不顯著，BL09、BL11與BL12、韓芝之間存在極顯著差異，BL12和韓芝之間差異不顯著。

2.3 菌株栽培試驗(yàn)結(jié)果

2.3.1 不同菌株子實(shí)體生物學(xué)性狀比較 由表3可見，韓芝原基形成較早，BL12較晚且原基形成率較低。BL09和BL12為單生，BL11和韓芝為叢生；BL11和韓芝菌柄較長(zhǎng)，BL09最短但較粗；菌蓋大小為BL09 > BL11 > BL12 > 韓芝，BL09和韓芝為圓形紫芝為腎形，除BL11號(hào)較薄外其它均較厚。子實(shí)體顏色BL12較深為紫色，其它為紅褐色和橙紅色，韓芝顏色最淺。從整體形狀來看，BL09、BL12和韓芝較規(guī)整，BL12形狀不規(guī)則趨光性較強(qiáng)。產(chǎn)孢量多少為BL09 > BL11 > 韓芝 > BL12。

表3 各菌株生物學(xué)形狀比較

2.3.2 不同菌株生物學(xué)效率比較 由表4可見，BL09和BL11產(chǎn)量較高二者之間無顯著差異，它們與韓芝和BL12存在顯著差異，BL12產(chǎn)量最低。

表4 各菌株產(chǎn)量比較

3 小結(jié)

不同菌株生物學(xué)效率與菌絲生長(zhǎng)速度和密度存在一定的相關(guān)性。4個(gè)菌株的綜合評(píng)比試驗(yàn)表明，BL09無論在菌絲生長(zhǎng)方面還是在子實(shí)體生長(zhǎng)方面，均優(yōu)于其它菌株，都表現(xiàn)出良好的長(zhǎng)勢(shì)，菌絲潔白濃密，氣生菌絲量較多不易發(fā)生污染現(xiàn)象，原基出現(xiàn)較早，原基形成率高，菌蓋大、形狀好，菌柄粗壯，生物學(xué)效率高。BL11號(hào)菌柄彎曲，菌蓋不規(guī)則，適于做靈芝盆景。BL12菌絲生長(zhǎng)速度慢，菌絲較細(xì)弱，栽培時(shí)有污染發(fā)生產(chǎn)量低，綜上所述BL09是較適宜于生產(chǎn)推廣的優(yōu)良菌株。

[1] 林志彬. 靈芝的現(xiàn)代研究[M]. 北京：北京醫(yī)科大學(xué)出版社，2001.

[2] 章靈華，王會(huì)賢，王立為，等. 靈芝孢子粉提取物在體內(nèi)外的免疫效應(yīng)[J]. 中國免疫學(xué)雜志，1994，10（3）：169－172.

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[4] 藺麗，方能虎，吳旦. 靈芝的主要生物活性研究概況[J]. 中國食用菌，2002，21（3）：38－40.

Variety Comparative Test of 3Strains in Jingning

YE Li-min，XU Yuan-ke，LIU Ning，LIU Wei-rong

（）

Comparative tests were conducted on fruitbody and biological efficiency of three wild strains(BL09, BL11, BL12) ofand, the main cultivar in Jingning, Zhejiang province. The result showed that growth ofHG was the slowest and had great difference with the other tested 3 strains cultivated on stock culture. The growth of BL09 had not evident difference with that of BL11, similar as the relation of BL12 with HG, but the first two strains had great difference with the later two ones. The size of pileus was ordered by BL09>BL11>BL12>HG, and yield of conidia production by BL09>BL11>HG>BL12. The test demonstrated that BL09 had advantages of white and abundant mycelium, more aerial mycelium, earlier primordium growth with higher survival rate, larger pileus, etc. The test resulted that BL09 was the best in the tested strains in the views of mycelial and fruitbody growth, and recommended to be cultivated in Jingning.

; wild strain; variety comparative test

1001-3776（2012）04-0061-03

S567.31

B

2012-04-18；

2012-06-11

葉麗敏（1970－），女，浙江景寧人，工程師，從事林業(yè)生產(chǎn)與技術(shù)推廣工作。