肖 寒 付雯雯 周小涵 曲紹春 于曉風(fēng) 睢大筼 (吉林大學(xué)藥學(xué)院藥理教研室，吉林 長(zhǎng)春 3002)

心悅膠囊是以西洋參(Panax Quinquefolium Linn)莖葉總皂苷為原料研制的國(guó)家中藥二類新藥，具有益氣養(yǎng)心、和血功能，主要用于冠心病心絞痛屬于氣陰兩虛證者。藥理研究表明，西洋參莖葉總皂苷能明顯改善急性心肌梗死犬心臟血流動(dòng)力學(xué)，降低心肌耗氧量〔1〕，縮小心肌缺血大鼠的心肌梗死面積，降低血清肌酸磷酸激酶、乳酸脫氫酶活性〔2〕。由于心腦血管缺血缺氧疾病與中醫(yī)的“血瘀證”密切相關(guān)，而目前有關(guān)心悅膠囊防治血瘀證及其辨證分型的研究尚未見報(bào)道。本文擬評(píng)價(jià)心悅膠囊的活血化瘀作用。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 清潔級(jí)Wistar大鼠，雌雄各半，210～240 g，合格證號(hào)SCXK-(吉)2007-0003，由吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥品及儀器 心悅膠囊由吉林省集安益盛藥業(yè)股份有限公司提供，批號(hào):20111015，規(guī)格:每粒裝0.3 g(相當(dāng)于西洋參莖葉總皂苷50 mg)，用法用量:口服，2粒/次，3次/d，以0.5%羧甲基纖維素鈉配制成混懸液。復(fù)方丹參片由上海雷允上藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，每片280 mg，批號(hào):20111202，以0.5%羧甲基纖維素鈉配制成混懸液。0.1%鹽酸腎上腺素注射液，1 mg/ml，北京永康制藥廠出品，批號(hào):2009103029。LBY-N6A旋轉(zhuǎn)式血液黏度計(jì)，LBY-NJ2型血小板聚集儀:北京普利生集團(tuán)產(chǎn)品;XN3型紅細(xì)胞電泳計(jì)時(shí)器:上海第一醫(yī)學(xué)院產(chǎn)品。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 60只大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、復(fù)方丹參組及心悅膠囊150、300、600 mg/kg組，每組10只。藥物組每天灌胃給藥1次，連續(xù)6 d，對(duì)照組及模型組給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉2 ml/kg。除對(duì)照組外，其他各組大鼠均皮下注射0.1%腎上腺素0.8 ml/kg，2 h后將大鼠浸入冰水中5 min，2 h后再按0.1%腎上腺素0.6 m/kg注射一次以復(fù)制急性血瘀模型〔3〕。大鼠復(fù)制急性血瘀模型后禁食不禁水12 h，第7天給藥后1 h，每組動(dòng)物以戊巴比妥鈉30 mg/kg腹腔注射麻醉，腹主動(dòng)脈取血，肝素抗凝。從加有抗凝劑的4 ml全血中取出1 ml加入LBY-N6A旋轉(zhuǎn)式血液黏度計(jì)，分別測(cè)定全血低切(10/s)、中切(80/s)及高切(160/s)黏度，余下 3 ml全血以3 000 r/min離心10 min，取上層血漿1 ml加入黏度計(jì)測(cè)定血漿黏度(160/s)。以微量熱沉淀法〔4〕測(cè)定血漿纖維蛋白原(Fib)濃度;腹主動(dòng)脈取血 1.5 ml，109 mmol/L枸櫞酸鈉抗凝。1 500 r/min離心5 min，取上層富血小板血漿(PRP)，余血3 000 r/min離心10 min，取貧血小板血漿(PPP)，用PPP調(diào)PRP至血小板數(shù)6×1011/L～7×1011/L。以LBY-NJ2型血小板聚集儀按比濁法〔5〕測(cè)定血小板聚集活性，求出1、3、5 min的血小板聚集率(PAG)及最大血小板聚集率(MPAG);以微量毛細(xì)管法〔6〕測(cè)定紅細(xì)胞壓積(Hct);通過(guò)XN3型紅細(xì)胞電泳計(jì)時(shí)器測(cè)定紅細(xì)胞電泳時(shí)間(RCET);測(cè)血沉(ESR);進(jìn)一步推算出紅細(xì)胞聚集指數(shù)(EAI)及紅細(xì)胞剛性指數(shù)(ERI)。

2 結(jié)果

2.1 心悅膠囊對(duì)大鼠急性血瘀模型全血及血漿黏度的影響模型組大鼠全血低、中、高切黏度及血漿黏度均明顯增加，與對(duì)照組比較具有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)。心悅膠囊300、600 mg/kg組可使全血低、中、高切及血漿黏度均明顯降低，與模型組比較具有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)，其作用效果與復(fù)方丹參片200 mg/kg相當(dāng)。心悅膠囊150 mg/kg組對(duì)全血低、中、高切黏度及血漿黏度均無(wú)明顯影響(P＞0.05)。見表1。

2.2 心悅膠囊對(duì)急性血瘀模型大鼠血小板聚集功能的影響模型組大鼠1、3、5 min PAG及MPAG均明顯升高，與對(duì)照組比較具有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)。心悅膠囊 300、600 mg/kg組均可使1、3、5 min PAG及MPAG明顯降低，與模型組比較具有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)，其作用效果與復(fù)方丹參片200 mg/kg相當(dāng)。心悅膠囊 150 mg/kg組對(duì)1、3、5 min PAG及MPAG均無(wú)明顯影響(P＞0.05)。見表2。

2.3 心悅膠囊對(duì)急性血瘀模型大鼠血液流變學(xué)的影響 模型組大鼠血漿 Fib、ESR、Hct、EAI及 ERI均明顯增加，RCET 明顯延長(zhǎng)，與對(duì)照組比較具有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)。心悅膠囊600 mg/kg組可使大鼠血漿Fib、ESR及Hct明顯降低，與模型組比較具有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)，對(duì)EAI、ERI及RCET均無(wú)明顯影響(P＞0.05)。心悅膠囊 150、300 mg/kg組對(duì)上述血液流變學(xué)的異常變化均無(wú)明顯改善作用(P＞0.05)。見表3。

表1 心悅膠囊對(duì)急性血瘀模型大鼠血液黏度的影響(±s，n=10)

表1 心悅膠囊對(duì)急性血瘀模型大鼠血液黏度的影響(±s，n=10)

與對(duì)照組比較:1)P＜0.05，2)P＜0.01;與模型組比較:3)P＜0.05，4)P＜0.01;下表同

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表2 心悅膠囊對(duì)急性血瘀模型大鼠血小板聚集功能的影響(±s，n=10，%)

表2 心悅膠囊對(duì)急性血瘀模型大鼠血小板聚集功能的影響(±s，n=10，%)

組別 PAG 1 min 3 min 5 min MPAG對(duì)照組 25.50±8.52 37.10±8.55 17.50±8.56 38.14±9.68模型組 40.21±11.52)50.98±12.81)32.66±10.32)57.02±12.42)心悅膠囊組150 mg/kg 35.87±10.6 45.31±11.4 28.51±12.8 48.92±13.2 300 mg/kg 26.66±8.373)38.01±9.743)21.04±8.723)41.32±12.73)600 mg/kg 26.35±9.783)37.17±9.153)17.86±8.134)38.63±8.384)復(fù)方丹參組 25.88±8.644)37.22±8.423)17.72±9.034)39.01±8.544)

表3 心悅膠囊對(duì)急性血瘀模型大鼠血液流變學(xué)的影響(±s，n=10)

表3 心悅膠囊對(duì)急性血瘀模型大鼠血液流變學(xué)的影響(±s，n=10)

組別 劑量(mg/kg) Fib(%) ESR(%) Hct(%) RCET(s)EAI ERI對(duì)照組 － 1.52±0.40 3.22±0.78 40.58±9.25 18.40±4.351.55±0.68 6.15±0.87模型組 － 2.29±0.522) 4.60±1.062) 55.35±12.41) 25.16±5.181) 2.30±0.791) 7.95±1.492)心悅膠囊組 150 2.10±0.42 4.48±1.15 53.17±10.6 25.19±6.81 2.13±0.83 7.58±1.38 300 1.95±0.45 4.02±1.33 48.28±9.18 23.22±5.76 1.98±0.92 6.98±1.62 600 1.54±0.314) 3.58±0.873) 40.76±8.123) 21.02±7.68 1.85±0.95 6.87±1.85復(fù)方丹參組 200 1.56±0.254) 3.42±0.913) 40.65±9.133) 19.25±6.33 1.68±0.583) 6.43±1.053)

3 討論

中醫(yī)理論認(rèn)為，“暴怒”之機(jī)多為“肝火上亢”，突遇“外寒之邪”侵襲可引發(fā)“寒凝氣滯”，致使血行不暢、脈胳不通、心胸痹阻、瘀阻血脈，最終造成血瘀證。本文根據(jù)血瘀證的“暴怒”“寒邪”機(jī)制，采用大劑量腎上腺素加冰水冷浴法復(fù)制出血流變性呈黏、濃、凝、集狀態(tài)的血瘀模型，符合中醫(yī)活血化瘀藥物的治療原則〔7〕。

血液流變學(xué)是研究血液流動(dòng)性、變形性、凝固性及心血管黏滯性的科學(xué)。最常見的檢驗(yàn)項(xiàng)目為全血黏度、血漿黏度、Fib、ESR及Hct等。血液黏度是衡量血液流變性的指標(biāo)，黏度越高，流動(dòng)性越小，越易堵塞血管形成血栓。血液黏度主要由Hct，血漿黏度及紅細(xì)胞聚集性等因素決定〔8〕。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，心悅膠囊可使急性血瘀模型大鼠全血黏度、血漿黏度、Fib濃度、ESR及Hct均明顯降低，說(shuō)明其能抑制紅細(xì)胞聚集，降低紅細(xì)胞脆性，增強(qiáng)其變形性。本實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，急性血瘀模型大鼠血小板聚集功能增強(qiáng)，符合臨床上氣滯血瘀證的表現(xiàn)，與文獻(xiàn)報(bào)道一致〔9〕。心悅膠囊可使大鼠血小板聚集功能明顯降低，表明其對(duì)氣滯血瘀有良好的治療作用。這對(duì)于防止缺血性心血管疾病時(shí)的高黏狀態(tài)、預(yù)防血栓形成均具有益處。

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